微生物学技术

　　(一)分离培养方法 　　Uu在含95% 氮气和5%CO2 环境中生长良好。其生长最适pH为5.5-6.5最适温度为36℃-37℃。Uu具有尿素酶，能分解尿素产氨，使含酚红指示剂的Uu液体培养基pH值上升，颜色由黄色变为红色。再将液体培养物转种到Uu固体培养基上，能生长成具特征性油煎蛋样集落。 　　(1 )液体培养基：支原体肉汤培养基80mL，马血清或小牛血清10mL，酵母浸液10mL 10 ...

　　支原体的计数不像一般的细菌采用一般的比浊法，因为支原体在液体培养基中的生长是澄清透明的，所以一般的比浊法无法用于支原体的计数！要采用CCU（即颜色改变单位法）！其原理在于通过支原体在液体培养基中的代谢活力为指标，来检测支原体的相对浓度！ 　　具体做法如下： 　　取12只无菌小试管，每管中加入1。8毫升的支原体液体培养基，然后在第一管中加入0。2毫升的代测支原体菌液，充分混匀后，从第一管中吸取0 ...

　　丁香园网友“园中木”要做支原体CCU，而不知道这个初始菌液的浓度如何选，因缺少标准的0.5麦氏浓度，所以比较困惑，看了相关文献有说将其定量到10的6次方左右，但又是如何定量的呢？ 　　网友“ljksbs”问答：这个我以前做过，只能用倍比稀释法:取12只无菌试管，每管预先加入1.8ml支原体选择性液体培养基，在第一管中加入0.2ml待测菌液，充分混 ...

支原体常用培养基为PPLO很多公司都有出售.但血清（常用马血清或猪血清）和抗生素(醋酸跎)你要自己加.你可以查查.还有改良的Ｆrey's培养基，常用的微生物实验技术书上都可以查到的．可以自己配制的．在液体培养基中通常要加入酚红做指示剂的，当培养基由红色变为黄色时，即可判定支原体的生长程度．要强调一点，支原体的分离可能不太容易，那么要多盲传几代．液体培养基变黄后，在固体培养基上单克隆， ...

细菌DNA的提取方案，分为三种，普通水煮法，CTAB/NaCl法，盐析法，文中详细叙述了这三种方法

支原体又称霉形体，是很小的原核细胞，完全没有细胞壁．菌体形态多变，具高度多形性，球形、梨形、分枝的或螺旋的丝状等。营养要求苛刻，在高血清量的复杂培养基上生长，在固体培养基上菌落呈油煎荷包蛋样特征性外观。培养基：牛心汤复合培养基等。分离培养：无菌采取肺、肝、脾、肾组织，直接剪成小块放在固体培养基上划一直线，再用无菌铂耳环在与其垂直方向划线，或者将组织块剪碎磨成匀桨，经液体培养基连续系列稀释后培养．若 ...