细菌转化指某一受体细菌通过直接吸收来自另一供体细菌的含有特定基因的脱氧核糖核酸(DNA)片段,从而获得了供体细菌的相应遗传性状。这种方法已被引入其他生物,例如采用原生质体转化法,可将外源DNA注入到不具摄取DNA能力的生物中,使其获得某些新的特性。
菌的分离是在微生物技术中的一项基本操作,也是在日常科研中经常用到一项技术。本文主要介绍了几种常见菌的分离方法。
从混杂微生物群体中获得只含有某一种或某一株微生物的过程称为微生物分离与纯化。在分子生物学的研究及应用中,不仅需要通过分离纯化技术从混杂的天然微生物群中分离出特定的微生物,而且还必须随时注意保持微生物纯培养物的“纯洁”,防止其他微生物的混入。
在医学微生物检验及研究工作中,经常分离细菌,接触菌种。菌种是一种重要的生物资源。菌种的保存不仅有利于重现已经做过的研究,证实发现新的菌属和菌科,而且也是研究、推广、开发和实际应用科研成果的基础。因此菌种的保存工作在细菌学中至关重要。
放线菌与人类的生产和生活关系极为密切,目前广泛应用的抗生素约70%是各种放线菌所产生。放线菌在形态上分化为菌丝和孢子,在培养特征上与真菌相似。然而,用近代分子生物学手段研究的结果表明,放线菌是属于一类具有分支状菌丝体的细菌,革兰染色为阳性。
一、用异硫氰酸胍提取 1.取200ul样品数+阴性对照+阳性对照个1.5ml灭菌eppendorf管 2.加600ul异硫氰酸胍,然后加入对照和样品,再加200ul氯仿,颠倒混匀 3.13000rpm离心15min 4.在第3步离心快结束时,另取同样多eppendorf管,加入400ul -20度预冷的异丙醇 5.取第3步离心的上清(一定不要吸取到中间白色层,第3步离心结束往外拿的时候,管子尽量不 ...
搞真菌基因功能研究的不可避免的总要涉及到DNA和RNA提取,由于真菌中有较多的多糖成分影响到所提DNA和RNA的质量和后续的分析。因此一个高质量的、实惠的提取方法是我们的优先选择,在此分享一下我一直在用的提取方法,供大家参考。
微生物是包括细菌、病毒、真菌以及一些小型的原生动物、显微藻类等在内的一大类生物群体,它个体微小,却与人类生活密切相关。
微生物是包括细菌、病毒、真菌以及一些小型的原生动物、显微藻类等在内的一大类生物群体,它个体微小,却与人类生活密切相关。
海洋微生物的培养基:Marine Ameba Medium
海洋微生物的培养基:Marine Agar with Sulfur(ATCC Medium 1922)
海洋微生物的培养基:Marine Agar with Naphthalene
海洋微生物的培养基:Marine Agar with κ- and λ-Carrageenan
海洋微生物的培养基:Marine Agar with l-Carrageenan
海洋微生物的培养基:Marine Agar with Biphenyl
海洋微生物的培养基:Marine Agar 2216(DSMZ Medium 604)
海洋微生物的培养基:Marine Agar (DSMZ Medium 123)
从已经长好的固体培养基上用棉签刮取孢子,使孢子悬浮于离心管中的无菌水中;将离心管放在振荡器上尽可能地激烈振荡1分钟左右;用装有脱脂棉的试管过滤悬液以除去菌丝片段和固体培养基碎片;3000转/分离心5-10分钟以使孢子沉淀,停止离心后马上倒掉上清液;将离心管在振荡器上振荡几秒钟使孢子沉淀物分散于残存的一点无菌水中;加入无菌的20%甘油于-20℃保存。
仪器用具: 酒精灯 接种环 药品试剂: E. coli 菌株 (JM109) LB 培养液: 1% (w/v) Bacto tryptone 0.5% Bacto yeast extract 1% NaCl以5 N NaOH 调至pH 7.0 后,以湿热法灭菌。 LB agar plates: LB 培养液中添加1.5% (w/v) Bacto agar. 方法步骤: 1) 每组应有一支15 mL ...
稀释平板计数是根据微生物在固体培养基上所形成的单个菌落,即是由一个单细胞繁殖而成这一培养特征设计的计数方法,即一个菌落代表一个单细胞。计数时,首先将待测样品制成均匀的系列稀释液,尽量使样品中的微生物细胞分散开,使成单个细胞存在(否则一个菌落就不只是代表一个细胞),再取一定稀释度、一定量的稀释液接种到平板中,使其均匀分布于平板中的培养基内。经培养后,由单个细胞生长繁殖形成菌落,统计菌落数目,即可计算出样品中的含菌数。此法所计算的菌数是培养基上长出来的菌落数,故又称活菌计数。一般用于某些成品检定(如杀虫菌剂等)、生物制品检验、土壤含菌量测定及食品、水源的污染程度的检验。