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牛痘病毒感染及病毒基因瞬时表达分析(第2部分)

为了了解痘病毒和宿主的基因表达调控作用,我们利用全基因组法从病毒和宿主细胞两个方面来分析转录丰度。这里我们将演示使用牛痘病毒感染HeLa细胞后由提取的RNA样品合成cDNA的过程。

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病毒诱导的本生烟和番茄基因沉默

植物能利用RNA干扰来抵御自身感染病毒,病毒诱导的基因沉默就利用了植物RNA干扰介导的抗病毒防御机制。

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牛痘病毒感染及病毒基因瞬时表达分析(第1部分)

为了了解痘病毒和宿主的基因表达调控作用,我们利用全基因组法从病毒和宿主细胞两个方面来分析转录丰度。这里我们将演示使用牛痘病毒感染HeLa细胞以及感染后几个时间点采集样品RNA提取的过程。

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牛痘病毒感染及病毒基因瞬时表达分析(第3部分)

为了了解痘病毒和宿主的基因表达调控作用,我们利用全基因组法从病毒和宿主细胞两个方面来分析转录丰度。这里我们将演示使用牛痘病毒感染HeLa细胞后病毒基因瞬时表达分析的最后一个部分-aRNA的标记及分析。

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大体积(≥20 L)沿岸海水样品过滤

沿岸海水样品过滤工作主要是为了对沿海水域的下游微生物群落,养分和微量气体进行分析。本视频示范的是大体积(≥20升)海水微生物生物量的过滤,过滤掉的微生物生物量直径在0.22μm和2.7μm之间。

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小体积(1~3L)沿岸海水样品过滤

沿岸海水样品过滤工作主要是为了对沿海水域的下游微生物群落,养分和微量气体进行分析。本视频示范的是小体积(~1L)海水微生物生物量的过滤,由大体积海水过滤方法扩展而来,只有一个不同之处,小体积过滤时无需预过滤步骤,所有的微生物生物量直接被0.22 μm过滤器拦截。

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A型流行性感冒病毒核糖核蛋白复合物的纯化和显象

为了研究流行性感冒病毒核糖核蛋白微粒vRNPs的核输入以及流行性感冒病毒的基因组复制过程,有必要纯化出病毒vRNPs,使其它病毒组分不至于干扰实验过程。在此我们描述了一个A型流感病毒vRNPs的纯化方法。

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可靶向注射病毒至完整3D脑循环的可扩展液体进样器阵列

视频示范了如何设计和完成可输送病毒或其它液体至大脑三维结构的进样器阵列。我们采用的是一种编码光敏感蛋白的病毒,它能使完整大脑内特定细胞类型在毫秒内被激活或沉默。

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微观世界的窗口:研究微生物在多孔介质中如何运输的简便微流体系统

天然多孔介质由于其错综复杂的物理拓扑学结构,难以解释微生物运输宏观研究结果。本视频演示了如何利用简便的微流体装置(EcoChip)观察微结构生境下微生物之间的相互作用,以确定影响所观察到的现象的关键过程,并系统地验证预测模型。

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BL/CL用于细菌磁性颗粒(BMPs)

一个新的有趣的方法是基于磁性细菌Magnetospirillum magneticum建立的细菌磁性颗粒(BMPs)。通过融合蛋白技术,在细菌表面BMPs展示了其特异的蛋白性能。这个生物技术工具,组合了磁性和生物特异结合特性,可以应用于全自动的CL免疫分析,也可用于核酸的纯化和分析。 生物发光共振能量转移(Bioluminescence Re ...

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实验室微生物气溶胶的种类

实验室微生物气溶胶的种类 实验室的许多操作可以产生微生物气溶胶,并随空气扩散而污染实验室的空气,当工作人员吸人了污染的空气,便可以引起实验室相关感染。在病原微生物实验室中,产生的微生物气溶胶可分为两大类:一类是飞沫核气溶胶,另一类是粉尘气溶胶。 这两类微生物气溶胶对实验室工作人员都具有严重的危害性,其程度取决于微生物本身的毒力、气溶胶的浓度、气溶胶粒子大小以及当时实验室内的微小气候 ...

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抗胞内细菌感染免疫

根据致病菌与宿主细胞的相互关系,细菌可分为胞外菌和胞内菌。人类致病菌大多为胞外菌,寄居在宿主细胞外的组织间隙和体液中。胞内菌又分兼性胞内菌和专性胞内菌。前者在宿主细胞内寄居繁殖;在体外也可在无细胞环境中生存和繁殖。专性胞内菌则不论在体内或体外必须在细胞内生存和繁殖。感染致病的主要兼性胞内菌有结核杆菌、牛分枝杆菌、麻风杆菌、伤寒杆菌、副伤寒杆菌、布鲁杆菌、肺炎军团菌、产单 ...

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抗胞外细菌感染免疫

致病性胞外细菌主要有革兰阳性的葡萄球菌、链球菌、志贺菌、霍乱弧菌、致病性大肠杆菌和革兰阴性的脑膜炎球菌和淋球菌、白喉杆菌、破伤风梭菌等。胞外菌致病机制主要通过分泌外毒素和细菌死亡时释放的胞壁内毒素致病。细菌代谢中分泌至菌体外的毒性蛋白为外毒素,其毒性极强,可致死。白喉毒素抑制宿主细胞蛋白质合成;破伤风梭菌外毒素可阻断神经元间正常抑制性神经冲动传递;霍乱弧菌肠毒素可激活肠 ...

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细菌表达蛋白质和样本制备(蛋白质的电泳分离)

细菌表达蛋白质和样本制备(蛋白质的电泳分离)【试剂与设备】(1)表达待检测蛋白质的细菌(2)50mmol/L Tris・Cl (pH7.4)(3)2×SDS凝胶加样缓冲液100mmol/L Tris・Cl (pH 6.8)200mmol/L 二硫苏糖醇(DTT)4% SDS(电泳级)0.2% 溴酚蓝20% 甘油不含有二硫苏糖醇(D ...

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细菌DNA PCR反应模板的制备

细菌DNA PCR反应模板的制备 从分析的标本中纯化核酸,即制备PCR反应的模板,是使PCR获得成功的重要的第一步。由于PCR的用途各异,用于抽提核酸的起始材料种类可能差异很大(包括新鲜的、储存的和古代的)。每种特殊样品类型有各自的限制和抽提核酸的不同要求,但它们都有一个共同的标准,扩增的灵敏性要求特别注意不同材料、PCR产物、质粒或对照之间可能存在的交叉污染。由于PCR不需要高分子量和高 ...

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噬菌体滴度的测定

噬菌体滴度的测定 在宿主细胞过量的情况下,噬斑的数量随着噬菌体的增加呈线性增加。由于这个原因,在感染以前,要将噬菌体进行稀释,而不是将宿主细胞稀释。以低MOI(感染重复性)铺板,也可确保每一个噬斑仅包含一个DNA序列。【材料和试剂】(1)微波炉(2)LB/IPTG/Xgal培养板(3)LB培养基(4)顶层琼脂糖凝胶【操作步骤】(1)在5~10ml LB培养基中接种单个ER2537克隆, ...

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以器官和组织为靶目标的噬菌体肽筛选

以器官和组织为靶目标的噬菌体肽筛选 1.实验材料 (1)肽库:美国NewEnglandBiolabs的环状7肽库(Ph,D-C7CTm Phage Display Peptide LibraryKit)。 (2)人正常细胞株和人肿瘤细胞株。 (3)裸鼠。 2.实验器材和常用试剂 同蛋白质分子为筛选靶目标的实验方法。 3.实验方法 1)目标噬菌体 ...

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食品微生物快速检测解决方案-高效、无污染的样品前处理

市面上销售的食品均需经过质检部门的微生物检测,以确保食用安全。固体或液体样品在微生物检测前要经过处理才能进行后续分析。据统计样品前处理所用的时间占到整个检测时间的60%以上,且检测条件的不合格常会造成,因此提高样品前处理的效率、控制检测过程中的交叉污染对于整个食品微生物检测对具有重要意义。

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仿蛙感应器可测试细菌感染

据美国物理学家组织网近日报道,美国普林斯顿大学研究人员通过研究非洲爪蛙的抗菌原理,开发出了一种可用于检测药品和医疗设备是否受到细菌污染的感应器。新感应器不仅可取代目前通用的内毒素检测试剂(LAL),还有望使两种濒危物种的数量不再下降。

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分子生物学之“DNA病毒”

本文主要介绍了DNA病毒基因组的复制和转录

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