腺病毒(adenovirus)是线状双链DNA病毒,基因组内有14个基因。腺病毒载体的主要特点是:(1)宿主范围较广,不仅能感染能进行分裂的细胞,也能感染不再分裂的细胞如神经细胞。反转录病毒只感染具分裂复制能力的细胞。(2)腺病毒载体不整合进宿主细胞基因组,而是以附加体形式游离在宿主细胞基因组外,这样就避免了病毒载体插入宿主细胞基因组可能引起基因突变等后果,因而使用时更安全。但是,这同时也造成一些 ...
反转录病毒的DNA插入宿主细胞染色体时,在5’LTR的U3左端和3’端LTR的U5右端各丢失2 bp,而在宿主染色体插入位点上生成4~6 bp的重复序列。反转录病毒的DNA基因组整合在宿主染色体上的位点是随机的。每个受感染的细胞一般有1~10份前病毒拷贝。反转录病毒DNA的整合是复制病毒RNA的必经阶段。只有当受感染细胞处于细胞分裂期间,反转录病毒DNA基因组才能接触到宿主细胞的遗传物质。因此,反 ...
Herpes这个字源于希腊文,意思是蛇样爬行,疱疹病毒(herpes virus,HSV)是指带状疱疹病毒。爬行类、鱼类、蛙类和人体内的疱疹病毒形态相似,但抗原性、基因组DNA中G C含量和病毒DNA的序列均不相同。病毒颗粒由162个有孔的子粒排列成廿面体的衣壳,外有20多个多肽的脂质包膜。病毒基因组是线状双链DNA分子,长140 000 bp。现在已知与癌有关的疱疹病毒有EB(Epstein B ...
香菇(学名:Lentinus edodes或Lentinula edodes)是一种食用真菌。鲜香菇脱水即成干香菇,便于运输保存,是一宗重要的南北货。干鲜香菇在中国菜中广泛使用。烹饪时需将干香菇先行泡水发制。素三鲜中,香菇往往作为的一鲜出现。在斋食中,香菇亦为重要原料之一。 ...
朊毒体(英文名Prion,最早为proteinaceous infectious particle之意,中文译名以前也叫作朊病毒、蛋白质感染因子、蛋白侵染子、朊病素、朊蛋白等)是一种具有感染性和自我复制能力的因子,也叫做普列昂或蛋白质侵染因子。虽然它们具体的活动和复制机制还不是很清楚,但是它们通常被认为是引起先前一系列人们了解甚少的传染性海绵状脑病的原因,这些脑病包括羊搔痒症和牛绵状脑病(也叫“疯 ...
拟病毒也称为类类病毒,它是一种环状单链RNA。它的侵染对象是植物病毒。被侵染的植物病毒被称为辅助病毒,拟病毒必须通过辅助病毒才能复制。单独的辅助病毒或拟病毒都不能使植物受到感染。
沼气是一些有机物质(如秸杆、杂草、树叶、人畜粪便等废弃物)在一定的温度、湿度、酸度条件下,隔绝空气(如用沼气池),经微生物作用(发酵)而产生的可燃性气体。沼气是气体的混合物,其中含甲烷60~70%,此外还含有二氧化碳、硫化氢、氮气和一氧化碳等。它含有少量硫化氢,所以略带臭味。发酵是复杂的生物化学变化,有许多微生物参与。反应大致分两个阶段:(1)微生物把复杂的有机物质中的糖类、脂肪、蛋白质降解成简单 ...
呈圆球形或近似圆球形,有的呈矛头状或肾状。单个球菌的直径约在0.8~1.2um左右。由于繁殖时细菌细胞分裂方向和分裂后细菌粘连程度及排列方式不同可分为:(一)双球菌(diplococcus):在一个平面上分裂成双排列,如肺炎双球菌、脑膜炎双球菌。(二)链球菌(streptococcus):在一个平面上分裂 ,成链状排列,如溶血性链球菌。(三)四联球菌(micrococcus tetragenus) ...
球孢白僵菌Beauveria bassiana (Bals.) Vuill 属于链孢霉科。寄生于家蚕幼虫体内(可寄生于60多种昆虫体上),使家蚕病死。干燥后的尸体称为僵蚕。入药能祛风、镇惊等。由于加强防治。近年来白僵菌对家蚕的感染大为减少,为解决僵蚕的药源问题,以蚕蛹为原料,接入白僵菌,所得蚕蛹可代僵蚕用。
各种杆菌的大小、长短、弯度、粗细差异较大。大多数杆菌中等大小长2~5um,宽0.3~1um。大的杆菌如炭疽杆菌(3~5um×1.0~1.3um)小的如野兔热杆菌(0.3~0.7um×0.2um)。菌体的形态多数呈直杆状,也有的菌体微弯。菌体两端多呈钝圆形,少数两端平齐(如炭疽杆菌),也有两端尖细(如梭杆菌)或未端膨大呈棒状(如白喉杆菌)。排列一般分散存在,无一定排列形式,偶有成对或链状,个别呈特殊 ...
肉毒杆菌是一种生长在缺氧环境下的致病菌,全称肉毒梭状杆菌,在罐头食品及密封腌渍食物中具有极强的生存能力。它在繁殖过程中所分泌的毒素具有极强的毒性,是KCN毒性的一万倍,是毒性最强的毒素之一。纯化结晶的肉毒杆菌毒素 1 mg 能杀死 2 亿只小鼠,对人的半致死量为 40 IU/kg。 肉毒杆菌毒素(Botulinum Toxin)前体是在肉毒杆菌细胞内产生的无毒化合物,肉毒杆菌死亡后 ...
重组腺病毒构建,扩增及纯化基本技术操作(细菌内同源重组AdEasy System)一 目的基因的克隆(以pshuttle-CMV质粒为例)1. 选择适当酶切位点,进行酶切连接,将目的片段插入pshuttl-CMV质粒多克隆位点。2. 重组质粒鉴定: 酶切鉴定或测序。3. 重组质粒扩增,纯化并准备适量含目的基因的穿梭质粒。4. 用PmeI单酶切线性化重组穿梭质 ...
To 2mls of mid-log culture or 1ml of freshly saturated culture add 1 ml(or an equal volume) of glycerol solution mix gently then freeze rapidly in liquid nitrogen or on dry ice. Store at -20°C and - 7 ...
在293 细胞中大量扩增腺病毒一旦重组病毒已被纯化和鉴定,即可在293 细胞中进行大量扩增。本手册提供了递增培养规模和腺病毒感染周期的基本方法,按这一方法最终得到的病毒量约为3×1011~3×1012。由于一个细胞中所含的病毒颗粒为1000~10000,因此1L 培养细胞可得到约5×1012 病毒颗粒。如果要把病毒用氯化铯梯度离心纯化,则必须至少3×108 的细胞,这样才能正确分辨出病毒带。对于蛋 ...
Procedure: Day One 1. Plate cells in 60 mm dishes using 5 ml DMEM containing 10% Calf Serum. The protocol has worked well for NIH3T3 with 1 x 105 cells and BALB/c3T3 with 2 x 105 cells. For the NIH ce ...
1,用异硫氰酸胍提取1.取200ul样品数+阴性对照+阳性对照个1.5ml灭菌eppendorf管2.加600ul异硫氰酸胍,然后加入对照和样品,再加200ul氯仿,颠倒混匀3.13000rpm离心15min4.在第3步离心快结束时,另取同样多eppendorf管,加入400ul -20度预冷的异丙醇5.取第3步离心的上清(一定不要吸取到中间白色层,第3步离心结束往外拿的时候,管子尽量不要倾斜)转 ...
DNA Digestion and Extraction from Mouse Tail v Cut about 5mm of mouse tail place in a 1.6mL eppendorf tube on ice (if very cold the tail is not going to stick to the teflon pestle) v Homogenize tails ...
As the fungal growth suppression by biocontrol agents (BCA) in solid media using dual plate assay has some issues regarding nutrient limitation. A protocol for fungal suppression in liquid medium cont ...
IntroductionPresently the consumption of probiotic food is highly popular worldwide for their health beneficial effects. Commonly used probiotic bacteria belong to lactic acid bacteria (LAB) family i. ...
Points to bear in mind Target cells have to be dividing to be infected. The viral RNA/protein complex cannot enter the nucleus and has to wait for the nuclear membrane to dissolve at mitosis.Typical p ...