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【交流】ELISA一年级生——在丁香园的日子里

我是08届的本科毕业生,在学校时只是知道有个丁香园,但是由于专业学的是生物,对于这个打着医学名头的网站从来没有关注过。跟丁香园的故事是从工作之后开始的:1、懵懂阶段:由于我对于“考研考什么”的问题非常迷茫,就跟老公一起到珠三角找了工作。08年2月份,我来到现在的公司实习,其实当时还是被老公“捎带”来的呢,但是我实习的时候只有一个信念,那就是要证明我是一个会对公司有用的人。上班的时候绝对不能让自己闲着,该问的问题,比如 ...

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【共享】Roitt Essential Immunology 12th ed

Roitt's Essential ImmunologyBy Peter J. Delves, Seamus J. Martin, Dennis R. Burton, Ivan M. Roitt - John Wiley & Sons (2011) - Paperback - 546 pages - ISBN 1405196831"Roitt's Essential Immunology - the textbook of choice for students and instructors of immunology worldwide Bringing you fully up-to ...

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【进展|热点】Nature Immunology:RIG-I活化与IL-1β产生的机制

当病毒入侵机体后,位于抗原递呈细胞表面的模式识别受体旋即对病毒进行识别,并通过复杂的胞内信号转导机制,启动I型干扰素和炎症因子的表达,促进病毒的清除。RIG-I是一类重要的胞内模式识别受体,主要负责RNA病毒的免疫识别。以往的研究表明:RIG-I被激活后即形成同源二聚体,通过其胞内的CARD区域激活接头分子MAVS,后者通过一系列复杂的信号转导,最终引起IRF3/IRF7和NF-κB的活化,启动I型干扰素和炎症因 ...

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(共享)ELISA技术大全

ELISA临床质量评价与质量管理ELISA试剂的评价(evaluation)分两个方面:一是试剂本身的质量评价,符合一定要求后才能生产供应;一是在临床应用中效果的评价。以肝炎ELISA诊断试剂为例,首先必须通过中国药品生物制品检定,以得到生产的许可。检定内容除包装、标签、说明书等外,对试剂的性能,如特异性、灵敏度、精密度和线性等均需逐项检定,通过对一系列参比品的检测,结果符合要求者才为合格。ELISA试剂的临床质量 ...

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(交流)一本系统介绍免疫组织化学方法的好书!

今天因为要学做免疫组化,在网上找了很久才找到一本介绍免疫组化的好书,很系统,也很全面,请大家共享!实用免疫细胞与核酸分子杂交技术http://www.37c.com.cn/literature/library/theory/102/前言第一章 总论  第一节 有关的免疫学理论    一、抗原、抗体的概念及抗原抗体的关系      (一)抗原      (二)抗体      (三)抗原与抗体的关系    二、抗原的性质及种类      (一)抗原的性质      (二)抗原的种类    三、抗体的性质和种类      (一)抗体的一般性质      (二)抗原性和 ...

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(交流)免疫细胞化学技术

一、免疫细胞化学技术的概述•免疫细胞化学(immunocytochemistry, ICC)–是利用抗原与抗体特异性结合的原理,通过化学反应使标记抗体的显色剂 (荧光素、酶、金属离子、同位素) 显色来确定细胞内抗原的成分(主要是多肽和蛋白质),对其进行定位、定性及定量的研究,称为~。(一) 对抗原和抗体的要求•具有特异性高和亲和力强的抗体是实验成功的首要条件。–对抗体的要求:纯度高、比活性强;•高度特异性抗体的获得,取决于抗原的纯度。–对抗原 ...

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免疫学试题半全

中国药品生物制品检定所1999年硕士生入学考试试题考试科目:医学免疫学 考试时间:99年1月31日下午一、将下列免疫学英文缩写符号译成中文(每题2分,共20分)1.TDTH 2.C3PA 3.ADCC 4.McAb 6.PHA7.SRBC 8.F(ab)2 9.APC 10.AIDS二、简要解释下列免疫学名词(每题2分,共20分)1.Ag决定基 2.本—周氏蛋白 3.异噬性Ag4.补体 5.免疫耐受性 6.单核细胞吞噬系统7.免疫载体 8.淋巴因子 9.过继免疫10.主要组织相容性复 ...

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免疫荧光细胞化学染色,你会做吗?

免疫荧光细胞化学染色方法一、标本制作  可制作涂片、印片、细胞单层培养物、组织切片,经适当固定或不固定,作免疫荧光染色用。二、荧光抗体染色方法  (一)直接法  1.染色 切片经固定后,滴加经稀释至染色效价如1:8或1:16的荧光抗体(如兔抗人γ-球蛋白荧光抗体或兔抗人IgG或IgA荧光抗体等),在室温或37℃染色30min,切片置入能保持潮湿的染色盒内,防止干燥。  2.洗片  倾去存留的荧光抗体,将切片浸入pH7.4或pH7.2PBS中洗两次,搅拌,每 ...

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(共享)抗原修复 问题解答汇总!!

免疫组化的一个重要问题就是抗原修复,其直接结果就是常常做不出结果,我整理了一下这方面的内容:cyclinD1的免疫组画染色★以上为临床病理讨论会版块发表的帖子,共:1个★(请教)大家好,请教(请教)抗原修复的问题(请教)免疫组化的抗原修复(请教)免疫组化的问题(请教)明胶涂片是否可以抗原修复?(请教)用磷酸化抗体做免疫组化有什么注意点(请问)灭活内源性酶是在抗原修复前还是后(求助):关于抗原修复液(求助)TritonX-10 ...

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抗体指南:你知道做什么实验用什么抗体吗?

一 抗体选择指南:检测任何目的靶蛋白都有不止一种抗体可供选择,为缩小抗体的选择范围选中合适的抗体,需要考虑如下几种因素:1. 分析或应用的类型2. 样本蛋白的结构性质3. 样本的种属4. 抗体宿主的种类5. 抗体的标记和检测1 分析试验的应用类型一般抗体说明书都列出该抗体经试验验证过适用于何种分析类型,如:可以应用于WB IHC ICC ELASA 分析等,如果抗体说明书没有提及的应用类型,并不意味着该抗体不适用于此种分析应用类型,而仅是说明尚未经过此种 ...

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【交流】关注吴玉章关于自身免疫性疾病的新研究(8-3更新)

理解如下:实施例43说明--合成疫苗可诱导淋巴细胞转化,呈剂量依赖性反应.实施例44说明--不明白实施例45说明--合成疫苗可诱导鼠T淋巴细胞的Th1极化(IFN-r,IL-2为优势的细胞因子),呈剂量依赖性反应.实施例46说明--合成疫苗可诱导细胞毒活性,呈剂量依赖性反应.实施例47说明--合成疫苗可诱导健康人PBMC(T淋巴细胞?)增殖?实施例48说明--合成疫苗可诱导T淋巴细胞向Th1、Th2型转化,尤以Th1型转化明显 ...

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做 ELISA 实验操作时,这些你必须要知道

转自http://www.congenes.com/htm/support_1.htmELISA的实验操作所要求的条件是比较严格的,无论是对实验的硬件条件还是对实验的操作人员的技术要求,都是如此。下面所提到的就是一些在进行ELISA实验时所要注意的一些问题。一、ELISA实验通用规则1、要保证移液枪的准确性,误差不能超过2%。可用水和电子天平进行确定。但最好有专业人员进行矫正。2、要配备20ul、50ul、100ul、1 ...

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[共享]应用SABC法进行免疫组化染色的体会

说明:这是我今年做免疫组化的一点体会,奉献给大家。如有不正确的地方,敬请指教。同时,这也是我应付《免疫组化》的一份作业,老师给了我85分。斑竹呀,如果觉得有点用,就请鼓励一下,加点分吧!:D:D:D应用SABC法进行免疫组化染色的体会SABC(Strept Actividin-Biotin Complex)法是一种显示组织和细胞中抗原分布的简便而敏感的免疫组化染色方法。由于该方法中的链霉亲和素的等电点接近中性(pH=6.0-6.5) ...

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【共享】金标入门者的帮助(转)

免疫胶体金的制备一、胶体金的特性和制备(一)胶体金的结构胶体金(colloidalgold)也称金溶胶(goldsol),是由金盐被还原成原金后形成的金颗粒悬液。胶体金颗粒由一个基础金核(原子金Au)及包围在外的双离子层构成,紧连在金核表面的是内层负离子(AuC12-),外层离子层H+则分散在胶体间溶液中,以维持胶体金游离于溶胶间的悬液状态。胶体金颗粒的基础金核并非是理想的圆球核,较小的胶体金颗粒基本是圆球形的,较大 ...

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(共享)免疫学精彩资料

免疫学精彩资料http://www.med.sc.edu:85/book/immunol-sta.htm全部提供全文(部分章节pdf需要MM但html全文仍免费开放,很容易作成pdf),内有大量图片和幻灯。另外还有BACTERIOLOGY、VIROLOGY、PARASITOLOGY、MYCOLOGY四部书和ppt幻灯提供下载。《免疫学》章节内容CHAPTER ONEINNATE (NON-SPECIFIC) IMMUNITYCHAP ...

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【进展|热点】Science:胰腺腺癌治疗新思路-CD40分子激活抗肿瘤细胞

Science. 2011 Mar 25;331(6024):1612-6.CD40 agonists alter tumor stroma and show efficacy against pancreatic carcinoma in mice and humans.Beatty GL, Chiorean EG, Fishman MP, Saboury B, Teitelbaum UR, Sun W, Huhn RD, Song W, Li D, Sharp LL, Torigian DA, O'Dwyer PJ,Vonderheide RH.Abramson Family Can ...

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这些问题才是导致 ELISA 测定结果出错的元凶?

ELISA 即酶联免疫吸附试验,是一种常用的固相酶免疫测定方法。Engvall 和 Perlmann 于 1971 年最先应用该法进行了 IgG 定量测定,并命名为"enzyme linked immunosorbent assay (ELISA)"。 ELISA 的基本原理是:①使抗原(或抗体)结合到某种固相载体表面,并保持其免疫活性;②使抗原(或抗体)与某种酶联结成酶标抗原(或抗体),而且此酶标抗原(或抗体)既保留其免疫活性,又保留其酶活性;③ 测定时将受检标本(抗体或抗原)和 ...

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【交流】生物素-亲和素系统

生物素-亲和素系统的特点生物素(biontin,B)广泛分布于动、植物组织中,常从含量较高的卵黄和肝组织中提取,分子量244.31kD.生物素分子有两个环状结构(图 11-1),其中Ⅰ环为咪唑酮环,是与亲和素结合的主要郎部位;II环为噻吩环,C2上有一戊酸侧链,其末端羧基是结合抗体和其他生物大分子的惟一结构,经化学修饰后,生物素可成为带有多种活性基团的衍生物——活化生物素(图1)。亲和素(avidin,AV)亦称抗生物素蛋白、卵 ...

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(交流)介绍6种针对免疫荧光染色的细胞固定方法

1、Methanol-Acetone FixationFix in cooled methanol, 10 min at –20 °C.Remove excess methanol.Permeabilize with cooled acetone for 1 minute at –20 °C.2、Paraformaldehyde-Triton FixationFix in 3-4% paraformaldehyde for 10-20 min.Rinse briefly with PBS.Permeabilize with 0.5% Tri ...

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(交流)免疫荧光技术

请注意规范发贴!谢谢合作!!免疫荧光技术第一节 直接免疫荧光法测抗原基本原理  将荧光素标记在相应的抗体上,直接与相应抗原反应。其优点是方法简便、特异性高,非特异性荧光染色少。缺点是敏感性偏低;而且每检查一种抗原就需要制备一种荧光抗体。此法常用于细菌、病毒等微生物的快速检查和肾炎活检、皮肤活检的免疫病理检查。试剂与仪器l 磷酸盐缓冲盐水(PBS):0.01mol/L,pH7.4l 荧光标记的抗体溶液:以0.01mol/L,pH7.4的PB ...

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