免疫学技术

均相酶免疫测定是将半抗原或小分子抗原如药物、激素、毒品、兴奋剂等与酶结合制成酶标记物，酶与抗原(半抗原)结合后仍保留酶和抗原(半抗原)的活性。测定时将待测样品、酶标记物、特异性抗体和底物溶液加在一起，待抗原—抗体和酶底物反应平衡后，即可直接测定结果，无需分离步骤，整个检测过程都在均匀的液相内进行。依据实验原理可分为竞争结合法和非竞争结合法两种类型。 1、酶扩大免疫测定技术 ...

酶免疫分析（Enzyme ImmunoassayEIA）是标记免疫分析中的一项重要技术是以酶标记的抗体（抗原）作为主要试剂，将抗原抗体反应的特异性和酶催化底物反应的高效性和专一性结合起来的一种免疫检测技术。作为经典的三大标记技术之一酶免疫技术在检验医学中得到广泛应用并不断得到更新，不断和其他先进技术如荧光、发光技术以及仪器自动化相融合，日臻完善许多自动化仪器实际上是EIA技术和其他现代化技术的复合 ...

抗体（antibody，Ab）是机体免疫细胞被抗原激活后，由分化成熟的终末B细胞--浆细胞合成、分泌的一类能与相应抗原特异性结合的具有免疫功能的球蛋白。 抗体是具有4条多肽链的对称结构，其中2条较长、相对分子量较大的相同的重链（H链），含450?550个氨基酸残基，相对分子质量在55000?70000之间；2条较短、相对分子量较小的相同的轻链（L链），含210个氨基酸残基，相对分子质量约24000 ...

小分子抗原现在做的最多的是农药和兽药，这方面的文献也很多。以前查过一些材料，作者觉得小分子抗原能否制备出高性能的单克隆抗体主要以下几点决定。 1、对于半抗原结构的选择，如果待测物本身含有NH2，COOH，OH等活性基团，可以利用待测物活性基团加入间隔臂，然后联入载体蛋白就可以成功合成人工抗原，制备特异性良好的抗体。 但大部分待测物上并不含有活性基团或活性基团对药物的特异性和极性影响很大，所以大部分 ...

一、抗原多肽设计的基本原则 为了使生产抗体获得最佳效果，仔细地设计抗原多肽是很有必要的，设计应满足一个基本条件：在免疫过程中，该抗原既不会产生过强的免疫反应，同时又能产生出对感兴趣的蛋白有结合能力的抗体。尽管抗原设计是一个很复杂的课题，有诸多需要注意的细节，已超过了我们所能提供的范围，根据我们所积累的经验，有几点关键的基本设计原则可以提供给大家参考： 1、确定抗体的用途（应用）新开展一个研究项目， ...

一、保存 大多肽在-20℃很稳定，特别是冷冻干燥并保存在干燥器中，在将它们暴露于空气之前，冷冻干燥多肽可以放于室温。这将是湿度影响减少，当无法冷冻干燥时，最好的方法是以小的工作样量存放。 对于含Cys， Met orTrP的多肽，脱氧缓冲剂对其溶解必不可少，因为这种多肽可易空气氧化，在封瓶前，慢慢流过多肽的氮气或氩气也会降低氧化作用。含Gln或Asn的多肽也容易降解，所有这些肽与不含这些有问题解 ...

内容提要： 乙型肝炎核心抗体定性检测操作规程乙型肝炎核心抗体定量检测操作规程乙型肝炎表面抗原定性检测操作规程乙型肝炎表面抗体定量检测操作规程乙型肝炎IgM核心抗体定量检测操作规程 乙型肝炎e抗原定性检测操作规程乙肝表面抗原检测标准化操作乙肝表面抗体检测标准化操作乙肝E抗原检测标准化操作 ...

内容简介： We developed a competitive enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) to analyze brevetoxinsusing goat anti-brevetoxin antibodies obtained after immunization with keyhole limpet hemocyanin-brevet ...

内容提要： 一、ELISA 标准操作要点 1、 标本的采取和保存 2、加样 3、保温 4、洗涤 5、 显色和比色 二、本底及假阳性产生的原因分析 1、 基因工程抗原与合成肽抗原的区别 2、假阳性本底产生的原因 三、cut off 值附近血清的处理 1、cut off 值附近的值是客观存在的 2、怎样对待cutoff 值附近的血清 ...

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Table of Contents 1、 Introduction - What’s an ELISA? 2、 Assay Formats - What are my choices? 3、 How to Choose an Assay Format - I know what I want to measure. What do I do? 4、 Factors to Consid ...

1.　ELISA的原理 2.　ELISA的类型 3.　试剂准备： 免疫吸附剂 结合物 酶底物的准备 4.　对照设定 5.　标本的采取和保存 6.　结果判断 ...

丁香园网友lidm的问题为： 我要分析骨髓间充质干细胞的表面抗原，以分析我提纯的细胞是否有许多造血干细胞和成纤维细胞。请赐教！ 丁香园网友schoman的回答为： 骨髓间质干细胞的检测并不难，只要有荧光标记得抗体，操作非常容易，但是，对于骨髓间质干细胞的特异性标记我并不熟悉，请查找专业的文献，然后，按生产公司定购产品即可。 丁香园网友doctormeng的问题为： 流式与westen在检测蛋白表达 ...

1.Crosslink protein DNA complexes in vivo Grow cells in suspension and collect 5 x108 cells by low speed centrifugation.Resuspend cells in 50ml media.In fume hoodadd 1.4ml 37% fomaldehyde solution to ...

一、用途 本试剂盒用于定量检测大鼠血清中的IL-6的浓度。 二、原理 本试剂盒采用双抗夹心ELISA法。抗大鼠IL-6单抗包被于酶标板上，大鼠标本中的IL-6会与单抗结合。加入生物素化的抗大鼠IL-6（二抗），它将与结合在单抗上的大鼠IL-6结合而形成免疫复合物，未结合的将被洗去。辣根过氧化物酶标记的Streptavidin 将与二抗的生物素结合，多余的物质会被洗掉。加入TMB显色。大鼠IL-6的 ...

ELISA检测系统可谓是免疫学反应应用到科研生产中最为广泛最为灵敏的技术手段。可是在新老手操作过程中总是会出现或大或小的问题，本人在刚开始做ELISA时就面临很多困难，虽然有师兄师姐铺路，但还是常常做得一塌糊涂，比如说花板，假阳性，全显色，全部显色，显色比空白还低。。。。。。自己也为此苦恼过很长一段时间，随着自己技术水平得提高，或多或少地也掌握了ELISA体系的脾气，也是熟能生巧吧，现在做方阵，做 ...

许多试剂检测都涉及到标准曲线的问题，标准曲线做的好与坏会直接影响到实验的结果，甚至是关系到实验的成败，那么究竟如何绘制或制作标准曲线呢？ 一、做标准曲线样品检测时有几个问题需要注意： 1、样品的浓度等指标是根据标准曲线计算出来的，所以首先要把做标准曲线看作是比做正式实验还要重要的一件事，否则后面的实验结果无从谈起。 2、设置标准曲线样品的标准浓度范围要有一个比较大的跨度，并且要能涵盖你所要检测实验 ...

一、基本原理 1971年Engvall和Perlmann发表了酶联免疫吸附剂测定（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）用于IgG定量测定的文章，使得1966年开始用于抗原定位的酶标抗体技术发展成液体标本中微量物质的测定方法。这一方法的基本原理是：①使抗原或抗体结合到某种固相载体表面，并保持其免疫活性。②使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体，这种酶标抗 ...

近年来，疯牛病、瘦肉精事件的连续发生，人们震惊之余发现饲料在某种条件下不仅构成了对动物和人类健康的严重威胁，而且造成了意想不到的经济损失和巨大的政治影响。饲料安全作为食品安全中的一个源头环节，成了上至国际组织、政府部门，下至平民百姓，各个层面广泛关注的热点问题。世界上很多国家及非政府组织都积极加人了饲料、食品安全控制行列。各个国家与地区也都加大力度强化相关的组织机构，制定一系列的法律法规，如美国、 ...