免疫学技术

【摘要】目的 探讨嵌合抗CD20抗体Fab’片段的抗肿瘤机制。方法 应用MTT法检测Fab’片段对Raji细胞生长的抑制作用，用Annexin V-FITC和PI测定Fab’片段对Raji细胞凋亡的诱导作用，用RT-PCR和Western blot检测Raji细胞中bcl-2表达的变化。结果 嵌合抗CD20Fab’片段对Raji细胞具有明显的抑制作用 ...

【摘要】 微流器件的制备是 液相芯片技术一项重要的相关技术。 分别简要地介绍了硅、玻璃和石英基片的机械加工法、光刻和蚀刻法与高分子基片的激光烧蚀法制备微流器件的原理和方法，以及实验结果。 【关键词】液相芯片 微流器件 机械加工 光刻和蚀刻 激光烧蚀 中图分类号： TH7 9&n ...

血管新生（angiogenesis）是一个受严格调控的多步骤过程，导致从已存在的脉管系统形成新的血管，对肿瘤的生长及转移，均是必需的。通过抑制新血管生成，中断肿瘤的营养供给，达到治疗目的，它代表了近年来一种治疗肿瘤及其它与病理性血管生成有关的人类疾病的新策略。 血管内皮生长因子（VEGF）作为内皮细胞特异性的促分裂原是其重要的正调节因子，其生物活性被两种高亲和力的酪氨酸激酶受体，即Flt-1（VE ...

一、单链丝状噬茁体展示系统 1、pIII展示系统及噬苗体抗体 丝状噬茵体是单链DNA病毒，pIII是病毒的次要外完蛋白（minor coatprotein）、位于病毒颗粒的一端，每个病毒颗粒都有3—5个拷贝pIII蛋白，pIII有两个位点可供外源序列插入，即N端和近N端可伸屈胃内。当抗体片段或蛋白质融合到PIII的N端时，噬菌体仍有感染性，但若融合到后一位点则会切去N端而丧失感染性，这 ...

【摘　要】目的通过建立多种肿瘤标志物联合检测的液相芯片系统，以期达到早期发现、早期诊断肿瘤的目的，提高肿瘤的治疗效果。方法根据Luminex公司所提供的实验流程进行荧光微球表面捕获抗体的包被，并对耦联效率和交叉反应进行鉴定，利用重组人肿瘤标志物蛋白纯品构建多指标联合检测的液相芯片的标准曲线，并与常规检查方法酶联免疫吸附实验（ELISA）进行对比。结果鉴定结果证实抗体包被成功有效，且无交叉反应的发生 ...

【摘要】为了研究嵌合抗CD20基因工程抗体Fab的抗肿瘤活性及其抗肿瘤机制，本研究利用3H掺入法测定嵌合抗CD20 Fab对Raji细胞生长的影响，结果显示嵌合抗CD20 Fab对Raji细胞的生长具有抑制作用；利用流式细胞仪测定嵌合抗CD20 Fab诱导Raji细胞凋亡作用，结果显示嵌合抗CD20 Fab可诱导Raji细胞凋亡作用。这些实验结果证明嵌合抗CD20 Fab通过诱导Raji细胞凋亡的 ...

摘要：应用单克隆抗体技术抗肿瘤的导向治疗是恶性肿瘤的生物治疗方法之一。本文先介绍了单克隆抗体的特点和构型及研究现状，而后从非结合型单抗、单克隆抗体偶联物（包括化学免疫偶联物、放射免疫偶联物、免疫毒素、抗体导向酶－前体药物疗法）和其它（抗体－细胞因子融合蛋白、微型双特异性抗体）等几方面分别介绍了抗肿瘤导向治疗研究进展，并对未来提出了展望和指出了今后的研究方向。 自从1975年Kohler和Milst ...

【摘　要】目的运用液相芯片技术研究肝细胞癌（HCC）及毗邻癌旁组织中小分子RNA（miRNA）表达谱差异。方法常规抽提20例HCC及对照癌旁组织中总RNA，采用含有114种miRNA的液相芯片及配套的Luminex 100检测系统进行miRNA差异表达谱分析；选取部分筛选出的差异表达miRNA，以半定量逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）和Western blot分析其相对应的靶mRN ...

【摘　要】目的建立利用液相芯片技术定量检测人血清中癌胚抗原（CEA）、甲胎蛋白（AFP）和神经原特异性烯醇化酶（NSE）的反应模式，并对该方法各项指标进行评价。方法制备抗体交联微球及生物素标记抗体，用双抗夹心法检测临床血清标本。结果同时检测CEA、AFP和NSE时的线性范围分别为0．078-200ng／ml、0．025-25U／ml、0．146．75ng／ml，最低检测限分别为39．1pg／ml、 ...

【摘　要】讨论了基于荧光标记的液相芯片及其二维并行检测方法。设计了待测试液的特殊流场。利用脉冲激光激发微球探针上的荧光，配合高灵敏度的CCD检测荧光信息，计算机对各个CCD记录的荧光信息进行后期处理，获得液相芯片中微球探针上的全部信息。对检测技术方案中探针流态和荧光信号的强度进行了分析，建立了荧光信号强度与检测系统中各参量间的表达式。每个探测单元都对荧光信号的收集进行了验证实验。这种检测方法具有快 ...

本文已发表于中国肿瘤生物治疗杂志．2003，10（3）：221-222． 【摘要】表皮生长因子受体（Epidermal Growth Factor Receptor EGFR）是原癌基因ｃ-erb-B1的表达产物。其过表达和突变体均与肿瘤发生发展有密切关系，基于此优点成为目前肿瘤治疗的新靶点。本文就EGFR与肿瘤的关系及其单抗治疗肿瘤的进展作一综述。 【关键词】表皮生长因子受体（EG ...

【摘　要】目的探讨不同交联浓度的抗癌胚抗原（CEA）单克隆抗体对液相芯片荧光检测信号的影响，明确CEA检测中最适抗体交联浓度。方法分别以不同交联浓度的标记有生物素的抗-CEA单抗与Luminex公司生产的44号荧光微球交联，交联完成后在每个反应孔中加入交联有不同浓度抗体的荧光微球各5000个，每个浓度加8孔，在每个抗体交联浓度下对应的检测孔中分别加入藻红蛋白（PE）标记的亲和素，经过15min的反 ...

单核苷酸多态性(SNP)是人类基因组中单个碱基的变异，属于二等位基因的标记，在人类30亿个碱基中每千个碱基出现一次，是近来被受关注的第三代多态性标记。由于SNP的研究将会极大地推动群体遗传学、药物开发、法医学、癌症、糖尿病、精神病等复杂疾病研究，故近年来不断有新的技术及方法出现并应用于SNP的检测。利用芯片技术进行SNP多态性位点的检测是目前发展最快、最有应用前景的技术平台。 本文所介绍的这一技术 ...

一、简介 1、目的 构建和表达抗CD3/抗Pgp微型双功能抗体，并测定该微型双功能抗体的生物学活性。 2、方法 采用PCR和overlap PCR方法构建抗CD3/抗CD20微型双功能抗体，并用双脱氧终止法测定DNA序列；采用亲和层析法纯化该产物，并用Western blot和分子排阻层析鉴定纯化产物；采用免疫荧光法、放射免疫分析法和玫瑰花环试验鉴定纯化产物与靶细胞的结合活性。 3、结果 DNA序 ...

在人体中存在着十万种以上的蛋白质，他们在机体中承担着不同的任务。在面对动态的多因素的生命活动时，识别和检测蛋白质以及认识其生理功能是非常艰巨的和繁重的工作。 为了使蛋白质研究顺利开展并取得突破，人们在技术体系的改进方面做出了不懈的努力，最新开发出的liquichip 液相蛋白芯片系统就是一种新型的蛋白质研究平台。 液相芯片体系由许多不同的小球体为主要基质构成，每种小球体上固定有不同的 ...

人类基因组计划(HGP)的完成和蛋白质组计划(HPP)的启动，获得了数量巨大的基因和蛋白质信息，而要对如此庞大的信息进行全面的处理和研究，必须设计和利用更为高效的硬件和软件技术，建立新型、高效、快速的检测分析方法。生物芯片正是在这种背景下应运而生，其不仅在高通量基因测序、基因表达研究、蛋白质相互作用等方面发挥重要作用，亦将在临床诊断中占据重要地位。液相芯片(1iquichip)是美国纳斯达克上市的 ...

一、摘要 1、目的 构建抗CD20嵌合抗体Fab'和F（ab）2片段表达载体，并在大肠杆菌中进行高效可溶性分泌表达，比较二者的活性差异。 2、方法 从相应的杂交瘤中提取mRNA建立抗CD20 ScFv 噬菌体显示文库，利用PCR方法从阳性克隆扩增抗CD20抗体轻链可变区基因（VL）、重链可变区基因（VH），重组到表达载体pYZF1，构建抗CD20 Fab’和抗CD20 F（ab）2达载 ...

一、Bispecific antibodies introduction Bispecific antibodies usually do not occur in nature but are constructed by recombinant DNA or cell-fusion technologies. Most are designed to recruit cytotoxic eff ...

一、Bispecific antibodies introduction Bispecific antibodies usually do not occur in nature but are constructed by recombinant DNA or cell-fusion technologies. Most are designed to recruit cytotoxic eff ...

1、液相芯片的概念 液相芯片，又称悬浮阵列、流式荧光技术，是基于美国Luminex 公司研制的多功能流式点阵仪 （Luminex 100TM）开发的多功能生物芯片平台，通常用于免疫分析、核酸研究、酶学分析、受体和配体识别分析等研究。也是是目前唯一得到权威机构和医学界共同认可用于临床诊断的生物芯片平台。液态芯片是一种全新概念的生物芯片。该技术的核心是把微小的聚苯乙烯小球（5.6um）用荧光染色的方法 ...