免疫学技术

抗原抗体反应（antigen-antibodyreaction）是指抗原与相应抗体之间所发生的特异性结合反应。可发生于体内（invivo），也可发生于体外（invitro）。体内反应可介导吞噬、溶菌、杀菌、中和毒素等作用；医学|教育网搜集整理体外反应则根据抗原的物理性状、抗体的类型及参与反应的介质（例如电解质、补体、固相载体等）不同，可出现凝集反应、沉淀反应、补体参与的反应及中和反应等各种不同的反应类型。因抗体主要存在于 ...

细胞介导的炎症是指由巨噬细胞和T细胞介导的反应，发展较慢，在接触抗原后36小时才发生，所以也称迟发型超敏反应（DTH）。DTH由抗原特异性TH促发，活化的TH释放细胞因子，进行免疫调节和诱导炎症发生。这些可使TH自身增殖；吸引其他循环细胞聚集，包括T细胞、B细胞、单核细胞、粒细胞等；促进吞噬、细胞杀伤、杀菌和抗原递呈功能。上述过程使局部血管扩张，进一步促使循环细胞到达反应部位；使得凝血系统和激肽系统被激活，纤维蛋白形 ...

（一）补体 检测血清补体水平或补体活性时需要从受检者采血及分离血清。做补体结合试验时多采用豚鼠血清作为实验用补体的来源。因为补体在体外极易衰变，所以检测补体活性的血清标本和作为补体试剂的血清必须新鲜。受检者一般做静脉采血，在动物可做心脏采血。血清分离后应及时使用，最好在当日用完。必须保存时采用小量分装的办法，置－70℃下可保存数月，避免反复冻融。冻干制品可长期保存，但其活性都不同程度地比新鲜血清降低。以豚鼠血清作补体 ...

间接凝集反应具有快速、敏感、操作简便、无需特殊的实验设备等特点，而且能用于抗原或抗体的测定，因此在临床检验中广为应用。（一）抗原的检测反向间接凝集试验可用于检测病原体的可溶性抗原，也可用于检测各种蛋白质成分。间接凝集反应的敏感度虽较沉淀反应高，但低于新发展的各种标记免疫测定。因此在微量抗原测定中其实用性取决于临床的要求。医学|教育网搜集整理例如测定尿液HGG的胶乳凝集妊娠试验，直接凝集法的敏感度约为300mIU/ ...

胶乳凝集试验也是一种间接凝集试验，所用的载体颗粒为聚苯乙烯胶乳，是一种直径约为0.8μm大小的圆形颗粒，带有负电荷，可物理性吸附蛋白分子，但这种结合牢固性差。也可制备成具有化学活性基团的颗粒，如带有羧基的羧化聚苯乙烯胶乳等，抗原或抗体以共价键交联在胶乳表面。化学交联一般通过缩合剂碳化二亚胺将胶乳上的羧基与被交联物上的氨基缩合在一起。这种用交联致敏的胶乳试剂性能稳定，保存期长。胶乳凝集试验分试管法与玻片法。 试管法先 ...

血凝试验（hemagglutinationtest）是红细胞凝集试验的简称。间接血凝试验是以红细胞作为载体的间接凝集试验，在临床检验中应用广泛，以下简述其操作过程。（一）载体红细胞是大小均一的载体颗粒，最常用的为绵羊、家兔、鸡的红细胞及O型人红细胞。新鲜红细胞能吸附多糖类抗原，但吸附蛋白质抗原或抗体的能力较差。致敏的新鲜红细胞保存时间短，且易变脆、溶血和污染，只能使用2～3天。为此一般在致敏前先将红细胞醛化，可长期保 ...

细菌和红细胞等颗粒性抗原与相应抗体结合后，可出现肉眼可见的凝集（agglutination）现象。早在1896年，Widal就利用伤寒病人的血清与伤寒杆菌发生特异性凝集的现象，有效地诊断伤寒病。至1900年Landsteriner在特异性血凝现象的基础上发现了人类血型，并于1930年获得了诺贝尔奖金。凝集试验灵敏度高，方法简便，迄今已成为通用的免疫学试验，广泛应用于临床检验。凝集反应的发生分两阶段：①抗原抗体的 ...

细菌、螺旋体和红细胞等颗粒抗原，在适当电解质参与下可直接与相应抗体结合出现凝集，称为直接凝集反应（direct agglutination）。凝集反应中的抗原称为凝集原（agglutinogen），抗全称为凝集素（agglutinin）。常用的凝集试验有玻片法和试管法两种。（一）玻片凝集试验玻片凝集试验为定性试验方法，一般用已知抗体作为诊断血清、与受检颗粒抗原如菌液或红细胞悬液各加一滴在玻片上，混匀，数分钟后即可用肉眼 ...

沉淀反应（precipetaiton）是可溶性抗原与相应抗体特异性结合所出现的反。早在1897年Kraus就发现，细菌培养液与相应抗血清混合时可发生沉淀反应。1905年Bechhold把抗体放在明胶中，将抗原加于其中，发现沉淀反应可在凝胶中进行。Oudin（1946）报告了试管免疫扩散技术，Mancini（1965）提出单向免疫扩散技术，使定性免疫试验向定量化发展。另一方面，免疫浊度法的出现，使沉淀反应达到快速、微 ...

单克隆抗体在生物学和医学研究领域中显示了极大的应用价值，是亲和层析中重要的配体，是免疫组化中主要的抗体，是免疫检验中的新型试剂，是生物治疗的导向武器。作为医学检验试剂，单克隆抗体可以充分发挥其优势。单克隆抗体的特异性强，可将抗原抗体反应的特异性大大提高，减少了可能的交叉反应，使试验结果可信度更大。单克隆抗体的均一性和生物活性单一性使抗原抗体反应结果便于质量控制，利于标准化和规范化。目前已有许多检验试剂盒用单抗 ...

单价特异性是指血清只与其特异性抗原发生反应。有时免疫原不纯，含有微量的杂抗原（性质相近的），制得的抗血清中出现2～3种杂抗体。即使用纯抗原，例如用高度纯化的IgG免疫动物，出现的抗体总是有抗γ重链的抗体，也有抗κ轻链和抗λ轻链的抗体。还有一种情况，有些蛋白质和其他蛋白质处于一种结合状态，如甲胎蛋白常和白蛋白相结合，因此免疫得到的抗血清总是有抗白蛋白杂抗体存在。一、除去杂抗体有两种方法： 1.亲和层析法将交叉杂抗原交联到 ...

肿瘤特异性抗原与正常细胞表面蛋白的差异很小，甚至仅个别氨基酸不同，且表达量较低，故其免疫原性非常弱，难以诱发机体产生有效的抗肿瘤免疫应答。某些肿瘤细胞能表达大量TAA，但多系胚胎期的正常成分，机体对其存在先天性免疫耐受，同样也不能有效激发机体免疫应答。此外，免疫细胞或分子可能使某些肿瘤抗原表位减少或丢失，从而逃逸免疫系统识别和杀伤医学教育|网搜集整理，此现象称为“抗原调变（antigenmodulation）”。

大多数抗原是由大分子蛋白质组成，但只是抗原上有限部位的特殊分子结构能与其相应抗体结合，称此部位为抗原决定簇或表位。一种天然抗原性物质（如细菌或其分泌的外毒素以及各种组织成分等）往往具有多种不同的抗原决定簇，而每一决定簇都可刺激机体一种抗体形成细胞产生一种特异性抗体。在机体淋巴组织内可存在千百种抗体形成细胞（即B细胞），每种抗体形成细胞只识别其相应的抗原决定簇，当受抗原刺激后可增殖分化为一种细胞群，这种由单一细 ...

1.中性粒细胞吞噬功能的检测 较早应用的方法为N试验，即中性粒细胞在杀菌过程中能量消耗剧增、耗氧量增加、糖代谢增强，致使糖代谢的中间产物6-磷酸葡萄糖增多医学教育网搜|集整理，并在己糖途径中氧化脱氢，脱下的氢可被胞浆中的硝基蓝四氮唑（nitroblue tetrazolium，N）所接受，使原来淡黄色的N还原成蓝黑色的沉淀物，沉积在胞浆内。试验时取抗凝血与等体积N混合，37℃温育一定时间后推片，经瑞氏染色后镜下计数百分率， ...

细胞因子分类按其作用大致可分为免疫调节因子和免疫调控因子两大类医学教育网搜集|整理。主要的细胞因子：白细胞介素、干扰素、生长因子、趋化因子家族、肿瘤坏死因子、集落刺激因子、转化因子家族以及其他细胞因子等。

1.遗传基因异常 （1）性染色体隐性遗传（XL）。（2）常染色体隐性遗传（AR）。2.中枢免疫器官发育障碍 可因遗传缺陷所致医学教育网|搜集整理。3.免疫细胞内在缺陷 多由先天酶缺陷引起，如ADA（腺苷脱氨酶）、PNP（嘌呤核苷磷酸化酶）、G-6-PD（葡萄糖6磷酸脱氢酶）的缺乏，很多参加检验技士考试的学员，就是因为对这些缩写没有概念才丢失了很多的分数。4.免疫细胞间调控机制异常 调控机制异常，如辅助不足或抑制过剩，均可导致免疫缺陷。5.继发性 ...

诱导受体对移植物的免疫耐受，是最理想的排斥反应防治措施。目前限于研究阶段，尚未应用于临床。研究思路：1.应用大剂量天然可溶性或人工合成的供者HLA分子医学教育|网搜集整理，通过封闭同种抗原特异性T细胞的TCR，以诱导受者特异性T细胞凋亡。2.输注可溶性CTLA～4，阻断被移植组织细胞的B7与受者T细胞表面CD28的结合，干扰共刺激信号的形成。3.阻断CD40～CD40L、CD2～LFA3等膜分子的相互作用，使T细胞功 ...

已发现，肿瘤细胞MHC～Ⅰ类分子表达缺陷或降低，同时可异常表达非经典MHC～Ⅰ类分子（如HLA～G、HLA～E等）。经典MHC～Ⅰ类分子缺失可致抗原提呈障碍医|学教育网整理，影响肿瘤特异性CTL活化和抗肿瘤效应；NK细胞表面KIR识别肿瘤细胞表面异常表达的非经典MHC～Ⅰ类分子，从而启动抑制性信号，抑制NK细胞的胞毒作用。

由于T细胞对抗体产生有调节作用医|学教育网整理，因此T细胞缺陷也可影响体液免疫效应。T细胞缺陷共同的临床表现是对病毒和真菌易感，易发生GVHR；淋巴组织发育不良，淋巴细胞缺乏，易合并自身免疫病和恶性肿瘤。几种常见的原发性T细胞免疫缺乏病的特征见表：疾病发病年龄性别遗传方式临床和免疫学特征1.先天性胸腺发育不全（DiGeorge型）新生儿男,女－特殊面容,手足抽搐,血钙↓,易感染病毒和真菌,T细胞成熟缺陷,外周血中极少 ...

大多数抗原是由大分子蛋白质组成，但只是抗原上有限部位的特殊分子结构能与其相应抗体结合，称此部位为抗原决定簇或表位。一种天然抗原性物质（如细菌或其分泌的外毒素以及各种组织成分等）往往具有多种不同的抗原决定簇，而每一决定簇都可刺激机体一种抗体形成细胞产生一种特异性抗体医|学教育网整理。在机体淋巴组织内可存在千百种抗体形成细胞（即B细胞），每种抗体形成细胞只识别其相应的抗原决定簇，当受抗原刺激后可增殖分化为一种细胞 ...