免疫学技术

DAB染色后切片着色呈阴性结果背景：其实免疫组化在DAB染色后一般有四种情况：阳性染色效果很好、阴性染色、非特异性染色很深、阴阳脸（染色不均匀）。而阴性染色是许多初学者经常遇到的头疼问题。我身边有个研究生同学在我们实验室初次涉入免疫组化，听说步骤不难，跟我后面做了几次之后，就自己开始做了，连续做了三次，结果均是阴性染色。很扫兴，不知是什么原因导致的。问题及其解答：免疫组化染色呈阴性结果的原因有哪些？1、抗体浓度和质量 ...

案例一：DAB染色后切片着色一片黄/背景深背景：奥运会期间我们课题组研究生都在实验室做实验，许多从北京购买的试剂买不到，对我们的许多实验产生了很大的影响。我以前一直用中杉金桥的Sp三步法染色试剂盒，效果不错，在奥运会期间我准备做同批实验分不同批次酶免疫组化实验，第一批组化实验结果很好，抗体浓度感觉比较合适（Santa Cruz公司1：200），等做第二批时发现封闭血清不够了，为了保证实验顺利进行，我又从福州迈新顶了一 ...

目前国内用于全自动系列化分析仪的免疫透射比浊法试剂 CRP，出现了两种：普通 CRP 和超敏 CRP。普通 CRP 有较高的线性，但灵敏度不好；超敏CRP有较高的灵敏度，但线性较低；这样就出现了一种试剂两种名称，其用途也有所区别。近年来，随着检验技术的发展，开始出现了一种全量程的 CRP，这种 CRP 既能满足较高的灵敏度，又能满足较高的线性。当前国内多家 IVD 企业推出了全量程 CRP 免疫透射比浊法诊断试剂盒，而其免疫透射比浊法 CRP 的抗体原料绝大多数来源于国 ...

抗瓜氨酸蛋白抗体（ACPA）检测在类风湿关节炎（rheumatoid arthritis，RA）诊疗过程中的地位无可替代。 ACPA 是一大类与瓜氨酸蛋白相关的抗体，在临床常规检测中最常见的有抗环瓜氨酸肽（Anticycliccitrullinated peptide antibodies，抗CCP）抗体抗角蛋白抗体（Anti-keratin antibodies，AKA）抗突变型瓜氨酸波形蛋白（anti -mutatedcitrulfi ...

梅毒血清学试验对梅毒的诊断有很大的价值，但它存在着一定的假阳性和假阴性情况，其结果一定要结合病史和临床、体格检查综合分析考虑。近年来梅毒在我国的发病率呈上升趋势。梅毒是由梅毒螺旋体感染引起的一种性传播性疾病之一，可侵犯全身各脏器，几乎可以引起全身所有组织器官的损害和病变，导致功能障碍。梅毒螺旋体抗体检测在输血前及手术前安全筛查中的意义已远远超出其自身病原体筛查的范畴。酶联免疫吸附试验（ELISA），因其价格低廉 ...

现代生活中，人们越来越重视自己的健康，体检过程中，有些患者在无意中发现自己丙肝抗体阳性，就认为自己已经是慢性丙肝了，焦急万分。有些患者觉得既然是叫丙肝抗体，说明自己对于丙肝病毒已经有免疫力了，是好事。这两种看法到底有没有道理呢？道理那种观点正确呢？下面就让我们了解丙肝抗体阳性一般有几种可能情况： 1。曾经感染过丙型肝炎病毒： 患者未曾进行干扰素抗病毒治疗，丙肝抗体阳性，但HCV-RNA阴性，转氨酶等指标正常。此时丙肝抗体阳 ...

单克隆抗体单克隆抗体药物一直都是免疫治疗的热点，也成为医药巨头竞争的前沿阵地。1997 年：FDA 批准的针对 CD20 的利妥昔单抗。80 年代后期：针对 HER2，CD52，EGFR 和 VEGFR 的单抗每个都是重磅炸弹。2013 年：从肿瘤药销售额前20名来看（如下图），前三名重磅炸弹均来自于单克隆抗体药物。而针对肿瘤免疫疗法 BMS 的Yervoy 自 2011 年上市以来成为后起之秀，也标志着癌症免疫疗法的开端。癌症免疫疗法被各大顶级学术杂志评为最佳科学突破， ...

最近在不同技术论坛上溜达加上客户的来电咨询，发现 Co-IP 免疫共沉淀的实验小伙伴做得并不是很顺利，遇到的问题也是千奇百怪，有什么条带也没有检测到的，有泳道一片漆黑的，有出了条带但位置大小还不对，真是让小伙伴们伤透了脑筋，万变不离其踪，做实验之前我们先系统地的了解一下实验各个环节的一些基本概念和注意事项，以及如何设置完整的对照以便出问题时快速分析原因。免疫共沉淀实验原理介绍：免疫共沉淀（Co-Immunoprecip ...

TORCH是指一组病原微生物的英文名称缩写。TO即（刚地弓形虫或弓形虫），R即（风疹病毒），C即（巨细胞病毒），H即（单纯疱疹病毒Ⅰ型和Ⅱ型）。这组病原体常可通过胎盘传给胎儿，引起围产期感染，导致流产、死胎、早产、先天畸形和智力障碍等各种异常结果，因此受到广泛关注。TORCH感染的抗体检查在许多地区已作为孕期检查的常规项目。一、感染TORCH对胎儿有哪些影响： 1、刚地弓形虫 弓形虫感染是一种人畜共患疾病，广泛分布于世界各地。由猫与 ...

近年来，甲状腺疾病的发病率呈逐年上升态势，但基层医生对甲状腺疾病的诊治水平并没“水涨船高”。许多基层医生对甲状腺自身抗体的临床意义不清楚，对其检测也不够重视。适应症也掌握得不当，这样就难免造成一些甲状腺疾病的误诊、漏诊、治疗失当及预后判断错误。 1、甲状腺检验报告单引出的话题一份完整的甲状腺功能检查报告单，通常包括两部分内容：一是反映甲状腺功能状态的各项指标（如T3、甲状腺T4、FT3、FT4、TSH），再就是与病因相关 ...

自身抗体诊断的标准技术是间接免疫荧光法，其特点是特异性强，阳性与阴性样品的信号强度对比明显，通过显微镜观测能够精确地判断组织或细胞内荧光的分布。自身抗原的位置决定了其相应抗体的典型的荧光模式，所有与此典型模式不相关区域的染色被认为是非特异性染色。即使偶尔伴有强的非特异性染色，但弱的特异性信号也能够被识别。间接免疫荧光法不需要复杂、费时的化学制备程序，而酶联免疫吸附测定等实验，要取得高特异性则必须提取和纯化抗原 ...

“TORCH”一词是由多种引起宫内感染的微生物和病毒英文名称的第一个字母组成的。TO是弓形虫的字头(Toxoplasma)。R是风疹病毒(Rubella virus)，C是巨细胞病毒(Cytomegalo virus)，H是疱疹病毒(Herpes virus)。TORCH感染在围产医学中称为TORCH综合征，其感染有许多共同的特征。妊娠期感染不仅危害母体，对胎儿和新生儿也造成严重影响。通过胎盘可以引起宫内感染，通过产道或母乳可 ...

expolee 大家好，最近检测肿瘤markerA表达，qPCR和WT检测肿瘤细胞是高表达的，收集病人标本做成组织芯片后免疫组化检测则是：肿瘤组织弱表达、正常组织弱表达，怎么解释呢？尽管IHC只是定位，可弱表达的话有没有再往下做下去的意义了？欢迎大家发言，谢谢！shylook 组织标本保存问题IHC是否规范是否摸过抗体使用浓度 包括二抗一抗能能否做IHCexpolee 同时检测两个指标（一抗分别来自不同公司）IHC结果一个公 ...

songyong 大家好，我在检测人子宫内膜中的NF-kappaB，但做了几次都没做出来，怎么办呢？我一抗用的是CST的，按他们公司的Protocols做也做不出来。大家可以推荐一个NF-kappaB可用于免疫组化的一抗吗？谢谢！genebio8890 投诉，换货小小困惑 我也做你的因子，我是不太懂，你用的是什么剂型的啊？本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴师 ...

chenlinana 各位战友，本人最近做p-caspase3的免疫组化染色，阳性结果明显，但是有一个奇怪的现象：说明书上p-caspase3是胞浆染色，但是我的片子是胞浆和胞核都染色，而且是胞核明显，查看了园子里的资料，有人提出凋亡细胞存在胞浆/胞核移位情况，但本人不明白这是什么意思，难道凋亡的细胞胞浆和胞核已经完全混淆了吗？请指教，是否有文献支持这种说法。chenlinana 怎么没有人回答呢，万分焦急。期待中......刺 ...

环佩从容 要做下一步实验啦，这两个抗体选哪个呀，目前研究有没有区分哪一个更好点啊ronaldo_zj 楼主您好。1. 楼主需要知道Pro caspase-3以及Cleaved caspase-3的功能以及检测手段，不是说哪个好那个不好的问题，而是根据你的课题需要检测何种片段的问题。请楼主先具体查阅关于caspase活化的文献后再定好实验计划；2. 目前多数研究均认为Cleaved caspase-3的表达水平与caspase的活化密切相关 ...

dj070886 从CST新买了一支U0126，是冻干粉，而且是用CST公司那种装抗体的管子装的，没有封口，请问这种状态下的粉子是有菌的还是无菌的？求助啊，求助chp_cn 应该是无菌的，你应该到culture hood中稀释好，分装到无菌的小管中保存。good luck!seagate 就算有菌，拿dmso溶解为母液就可以用了，dmso号称万能溶剂，本身就有强大的杀菌能力吕文明 既然提出来了这个抑制剂,我问一个问题:U0126 作为RAS ...

48126 http://www.univ-bio.com/Products.asp我在优宁维的网站上查到很多关于C-JUN的抗体，磷酸化又分很多种，不知道如何选择，有知道的战友指点一下，谢谢！我要准备做WB,IHC.biolinkphilic 我觉得如果真想在这家公司购买，咨询该公司就可以了。其实专业的抗体网站看看就知道应该要了解那些信息。如Abcam、santa cruz和cst等等最后，提供一个学习的博客，可以看看http:/ ...

songyong 各位亲们：请问用免疫组化的方法检测出来的NF-kB 是已经活化了的NF-kB呢？还是无活性的也包括进去啦？谢谢ronaldo_zj 体内的细胞信号通路研究确实不好评价，不过就NF-kappaB这个通路来说，我个人觉得可以通过一下几个方法来衡量：1. 经典的NF-kappa B的活化往往都是NF-kappaB（包括p50、p65、p52等）作为转录因子活化而转位至细胞核内发挥转录调节功能。所以我觉得楼主可以首先观察和比 ...

dhy481 如图，红色是TRITC标记的细胞膜上的一个蛋白，绿色是FITC连接的一段小肽，是在细胞固定前加入到培养基里的，大家帮忙看看，这是不是共定位，谢谢大家～woxingwosu 看起来好像不是共定位。如果要说共定位，或者说小肽能结合到膜上的蛋白，我认为至少在膜上的绿色至少要比其他的地方要亮的多，这样才能说明是共定位，你这个有可能是非特异性的分布而已。需要加个对照来看看吧。个人意见，呵呵～～P.S. 这个图照得太不清楚了， ...