免疫学技术

间接免疫荧光法是自身抗体等免疫学指标检测的重要手段，是抗核抗体（ANA）检测的“金标准”。为了更好的发挥“金标准”的作用，为临床诊断提供有力的支持，保证间接免疫荧光法检测的准确性和时效性，就显得尤为重要。 为保证检测结果的准确性，荧光结果的判读是至关重要的一个环节。荧光检测结果的获取，需要通过人工观察荧光显微镜。目前常见的荧光核 ...

从1949年美国College of American Pathologists（简称CAP）首先开始研究临床实验室室内质量控制（简称质控）问题，美国学者Levery和Jenning于1950年发表第一篇关于使用质控图的实验室室内质控，临床检验实验室的室内质控工作正式拉序幕。 到70年代，实验室质量控制进入一个新的阶段--全面质量管理，推行GoodLaboratory Parcti ...

如果是新的数据，你只要双击图表，把它输入到图表的数据中，就可以拟和曲线。根据曲线方程式，计算出浓度。 方法： 1、拟和曲线： 输入第一行： 浓度值， 如0 10 50 100 40 ...

QuickAntibody系列免疫佐剂是由北京康碧泉公司研发的一类具有自主知识产权、独特配方的新型免疫佐剂，专业用于制备小鼠单克隆和多克隆抗体。 与常规使用的弗氏佐剂的比较 QuickAntibody佐剂特色详解： 1、为什么无需乳化？ QuickAntibody系列佐剂为水溶性佐剂，抗原与佐剂仅需用移液器吹打几下，即可混匀；弗式佐剂为油性佐剂，需要繁琐的乳化，形成 ...

组织芯片制备的技术路线和基本制作过程： 通过组织芯片制作机细针打孔的方法，从众多的组织蜡块（称为供体蜡块，donor）中采集到数十至上百的圆柱形小组织（组织芯，tissue core），并将其整齐排列另一空白蜡块（称为受体蜡块，recipient）中，而制成组织芯片蜡块。然后对组织芯片蜡块进行切片，再将切片转移到载玻片上制成组织芯片。 1.芯片微陈列设计：在构建组织芯片之前，应该预 ...

ELISA是酶联接免疫吸附剂测定( Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay )的简称。它是继免疫荧光和放射免疫技术之后发展起来的一种免疫酶技术。此项技术自70年代初问世以来，发展十分迅速，目前已被广泛用于生物学和医学科学的许多领域。 (一)　原理 ELISA是以免疫学反应为基础，将抗原、牽9体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来的一种敏感性很 ...

摘要 在免疫学检测中，酶标板的检测精准性和保证酶标板精准性的浓度范围，是决定使用哪种酶标板品牌的非常重要因素。本实验我们采用商业化的ELISA实验方法来分析比较11种不同品牌的酶标板的精准性和线性范围。实验证明在所有测试的酶标板中，Nunc MaxiSorp酶标板具有最广的线性范围（4-2000 pg待测蛋白/mL ）。MaxiSorp酶标板也显示出了良好的重复性，另外100%的 ...

随着酶联免疫分析技术在医学及生物学领域的广泛应用，使体外检测各种细胞因子及抗体研究有了新的突破。在研究免疫应答机制时以往常用用酶联免疫吸附法（ELISA）检测体液中游离的细胞因子（CK）或抗体，但由于游离的循环抗体或CK的半哀期不同，使之在体液中不断的被代谢或与靶器官结合，而不能确切的反映体内的抗体及CK的水平。80年代，国外的科研工作者根据ELISA技术的基本原理，建立了体外检测特异 ...

一、E.coli/phage 裂解液预吸附血清 1. 将E.coli /phage lysate 以1:10-20 稀释在TBST 溶液中。 2. 将4 张82mm 的nitrocellulose membranes（NC）浸入稀释后的E.coli/ phagelysate 中，室温下水平摇动30 分钟，取出NC 并使膜沥干。 3. 用50ml TBST ...

1 前言 唾液酸主要存在于高等动物的细胞表面，是糖蛋白、糖脂等复合糖的组成成分，担任重要的生物学功能1）。另外，众所周知唾液酸糖链是流感病毒的受体，它像病原性微生物一样被人体识别。 传统方法检测α 2-3结合型唾液酸糖链的非还原糖链末端通常使用MAM或者MAH凝集素。这里的凝集素末端具有Sia α 2 -3 Gal β 1- 4Glc ...

目的:通过特异性阻断PI3K和mTOR观察HepG2和Hep3B细胞株PI3K/Akt/mTOR信号通路活性及生物学行为的改变探讨相关的分子机制。 方法:在培养的HepG2、Hep3B人肝癌细胞株和人正常肝细胞株QSG-7701上以免疫印迹方法(Western blot)检测各细胞株中PI3K(p110α亚单位)、PTEN、pAkt(S473T308)和p-mTOR(S ...

Abstract Chaperones (stress proteins) are essential proteins to help the formation and maintenance of the proper conformation of other proteins and to promote cell survival after a large varie ...

免疫血清的制备是一项常用的免疫学实验技术。高效价、高特异性的免疫血清可作为免疫学诊断的试剂(如用于制备免疫标记抗体等)，也可供特异性免疫治疗用。免疫血清的效价高低取决于实验动物的免疫反应性及抗原的免疫原性。如以免疫原性强的抗原刺激高应答性的机体，常可获得高效价的免疫血清。而使用免疫原性弱的抗原免疫时，则需同时加用佐剂以增强抗原的免疫原性。免疫血清的特异性主要取决于免疫用抗原的纯度。因此，如欲获得高特异性的免疫血清，必须予先纯化抗原。此外，抗原的剂量、免疫途径及注射抗原的时间间隔等，也是影响免疫血清效价的重要因素应予重视。

一般所说的结缔组织是指纤维性结缔组织而言，其结构特点是细胞间质内基质外含有较多的纤维成分，主要是胶原纤维、弹性纤维和网状纤维，我们仅简述这三种纤维的常见染色方法。 （1）Mallory三色染色法：常用于判定多种组织、器官的病变程度及修复情况，区分肿瘤组织中的纤维成分与平滑肌。 染色步骤： ①中性甲醛液固定组织，石蜡切片，常规脱蜡至水。 ②重 ...

1957年Ceppelini等首次报道了系统性红斑狼疮（SLE）患者的血清成分可与DNA发生反应，随后建立了几种定性和定量检测抗DNA抗体的方法。随着研究的不断深入，发现定量检测IgG型抗DNA抗体对SLE更具诊疗参考价值。在SLE患者的血清中存在三种类型的抗DNA抗体，其中的抗dsDNA和抗ssDNA最常见也最常用。本文以问与答的形式围绕两种抗体的应用向读者逐一介绍。问：抗ssDNA抗体存在于多 ...

（一） 原理标记抗体法虽然具有许多优点，但也存在一些难以克服的问题，如标记抗体的分子增大，对细胞膜和组织的穿透力减弱；化学交联反应对抗体和酶的活性有所影响；结合物中未标记的抗体可与抗原竞争结合，影响检测方法的敏感性等。不标记抗体法可以避免上述的不利影响因素，通过一系统的非标记抗体的免疫学反应，对组织中的抗原进行定位检测。不标记抗体法又可分为用标记物显示和不同标记物显示两种方法。前者利用基因工程方法 ...

一，免疫组织化学简介免疫组织化学又称免疫细胞化学，是指带显色剂标记的特异性抗体在组织细胞原位通过抗原抗体反应和组织化学的呈色反应，对相应炕原进行定性、定位、定量测定的一项新技术。它把免疫反应的特异性、组织化学的可见性巧妙地结合起来，借助显微镜(包括荧光显微镜、电子显微镜)的显像和放大作用，在细胞、亚细胞水平检测各种抗原物质(如蛋白质、多肽、酶、激素、病原体以及受体等)。二，免疫组化技术的基本原理免 ...

1. 抗原本身的有关性质：抗原刺激免疫动物产生抗体的能力，是否使用佐剂，注射途径及注射间隔时间等。2. 抗原必须纯化：对于免疫用的抗原，成分必须均一，除了作为免疫原的抗原物质外，不能含有可激发机体产生其它抗体的物质。在制备病毒抗血清时，必须去除寄主蛋白成分；假若这种材料是互不相同的病毒复合感染的，还必须将这些互不相同的病毒一一分离。只有制备了具有一定浓度的纯化的抗原，才能制备出高效价的专业性抗血清 ...

1． 剪取一小条0.45 μm 的硝酸纤维膜，置于1.5ml eppendorf 管中，浸没于1 ml，1 mg/ml 的抗原溶液中，5 min。2． 取出膜，置于滤纸上干燥。3． 将膜放置于装有1 ml Buffer A 的eppendorf 管，轻轻震荡混匀30 min。4． 移去Buffer A，用新鲜的Buffer A 洗一次，将膜浸没于0.8-1 ml 相应的抗血清中，1-2 h ...

一．实验器材：1． 器材：40孔塑料板、40孔板离心机、微量加样器、振荡器、盖玻片、荧光显微镜等。2． 试剂：单抗隆抗体（单抗）、荧光标记抗鼠免疫球蛋白、PBS（pH7.2-7.4）、甘油、叠氮钠（NaN3）等。二．方法（微量法）1． 将分离好的单个核细胞用PBS洗2次，1000rpm每次10分钟。用含0.1% NaN3 PBS调细胞浓度在0.5-1×108/ml（5000万-1亿/m ...