免疫学技术

血中HBV DNA的存在是HBV感染最为直接，最为灵敏和最为特异的指标。HBV DNA检测方法目前在国内使用最广的是聚合酶链反应(PCR)。使用PCR检测血中HBV DNA，其临床诊疗价值主要有：1．急性HBV感染的诊断。当机体感染HBV时，在外周血中HBVDNA的出现要早于其他血清学抗原抗体指标，并且只有HBVDNA存在才会引起感染，因此使用极为灵敏特异的PCR方法检测HBVDNA可为急性HBV ...

以0-4℃或-20℃低温保存，防止抗体活性降低和蛋白变性。最好加入浓度为1：（5000-10000）的硫柳汞或1：（1000-5000）的叠氮化钠防腐，小量分装，如0.1-1目录，真空干燥后更易长期保存。 (责任编辑：大汉昆仑王) ...

Antibody Dilution BuffersPrimary Antibody Dilution Buffer: 1%BSA (stabilizer and blocking) 0.1% cold fish skin gelatin (blocking) 0.05% sodium azide (preservative) 0.01M PBS ...

抗核抗体(anti-nucleic antibody，ANA)是以真核细胞的核成分为靶抗原的自身抗体的总称。细胞核内含有许多不同成分如核蛋白、核糖核蛋白(ribonucleo protein，RNP)、脱氧核糖核酸(DNA)等。在某些因素，如细菌、病毒、药物等作用下，可改变细胞核某些成分的性质，激发机体免疫系统产生许多抗不同核成分的抗体。这些抗核抗体目前尚无统一命名，有些是以第一个检出该抗体的患者 ...

甲状腺过氧化物酶(thyroidperoxidase，TPO)是甲状腺微粒体(TM)的主要有效抗原活性成分，分子量为84～105kD，基因重组TPO为933个氨基酸的多肽链。鉴于以往使用的粗提TM抗原中混杂有其他抗原成分，在测定自身免疫性甲状腺炎病人血清中抗-TM时，可能出现少数假阳性，为使结果更为可靠，目前国外已将抗-TPO代替抗-TM抗体检测，而且大多数文献已将抗-TM抗体改名为抗-TPO抗体 ...

临床活检，用常规石蜡制片法制作，病理报告如没特殊情况，一般都需要三天才能发出。其程序基本是活检当天下午取材，晚上组织脱水及浸蜡，第二天上午包埋切片及染色，当切片送达医生手里时，已是第二天的上午，下午看阅切片，至复检医生手里时，已是第三天的时间了。这是一般的工作时间，可这对于急需获得病理结果的患者来说，三天时间确实太长，尤其是门诊病人，远道求医的患者，或者外地甚至国外的患者，三天的时间就意味着等待 ...

切片的烘烤看似简单，只在烘烤箱或干燥箱一放，让其烘烤就行了，但从某种意义上讲，它也是一个关键，如果切片烘烤不好，到染色的时候，便会使切片脱离载玻片（掉片），使整个过程毁于一旦，因此，认真烤好切片是制好切片的前提。怎样才能使切片烘烤得好呢？我们的做法如下：当切片裱于载玻片后，于烘烤箱边竖立起来，控干水份，然后平放于烘烤箱的烤板上烘烤，温度可调至70℃。当最后一个蜡块切完后，前面的切片也烤得差不多了。 ...

为分析二抗的使用情况，我们随机抽取了100篇2007年或2008年发表于Science 或 Journal of Biological Chemistry杂志上的文章(英文)，这些文章涵盖了来自于16个国家的约80个研究机构。收集的数据显示二抗的使用非常广泛，可以应用到几乎所有类型的免疫检测中，尤其是Western blot、免疫组织化学和免疫细胞化学。事实上，二抗在ELISA及流式细胞术中应用也 ...

免疫磁珠法分离细胞原理：免疫磁珠法分离细胞是基于细胞表面抗原能与连接有磁珠的特异性单抗相结合，在外加磁场中，通过抗体与磁珠相连的细胞被吸附而滞留在磁场中，无该种表面抗原的细胞由于不能与连接着磁珠的特异性单抗结合而没有磁性，不在磁场中停留，从而使细胞得以分离。免疫磁珠法分为阳性分离法和阴性分离法：阳性分离法－磁珠结合的细胞就是所要分离获得的细胞阴性分离法－磁珠结合不需要的细胞，游离于磁场的细胞为所需 ...

免疫血清　　1.动物的选择 可作为免疫用的动物多为哺乳类和禽类，主要有家兔、绵羊、马、猪、驴、豚鼠和鸡等，其中实验常用家兔、绵羊、鸡和豚鼠。选择动物时要注意以下几个方面：　　a.抗原与动物种系 动物性抗原的免疫原性，随动物种系远近而有差别。近缘动物的蛋白质免疫原性弱，反之则强。因此选择动物时应选用亲缘关系较远的动物。　　b.免疫血清的用量 所需要的免疫血清，如是经常大量地使用，选择免疫动物时则应选 ...

血清中99.95%以上的T4与蛋白结合，其中80%～90%与球蛋白结合称为甲状腺素结合球蛋白(简称TBG)。TT4是指T4与蛋白结合的总量，受TBG等结合蛋白量和结合力变化的影响，TBG又受妊娠、雌激素、病毒性肝炎等因素影响而升高，受雄激素、低蛋白血症(严重肝病、肾病综合征)、泼尼松等影响而下降，在临床上必需注意。血清TT4测定方法有放射免疫法(RIA)、酶标免疫法(EIA)和竞争性蛋白结合法( ...

无菌干燥玻璃容器从屠宰场取回猪血。盛取猪血前玻璃容器中加入无菌生理盐水50ml，庆大霉素8万单位。猪血取回后4℃冰箱静置数小时，待血清析出，回收上清，4000rpm离心15分钟，回收上清，送培养中心用正压过滤器0.22μm滤膜过滤除菌，将血清分装（100ml/瓶）置于-20℃冰箱保存备用。 (责任编辑：大汉昆仑王) ...

一、为什么要用同型对照？同 型对照是使用与一抗相同种属来源、相同亚型、相同剂量和相同的免疫球蛋白及亚型的免疫球蛋白，用于消除由于抗体非特异性与细胞结合而产生的背景染色。同型 对照是真正意思上的阴性对照，它不但可以用来设定流式细胞仪的电压，而且还可以帮忙省去昂贵与繁琐的重组细胞因子竞争封闭步骤。在流式细胞仪上样前，染色方式如下：样本管：一抗＋样本，同型对照管：同型对照＋样本二、如何选择同型对照？( ...

由于在流式细胞实验过程中，荧光抗体对单细胞悬液的标记效果直接影响实验的数据质量。因此，需要考虑各种影响流式抗体品质及检测效果的因素，例如抗体特异性、荧光素信号强弱、荧光素标记方式、同型对照等。 流式抗体的选择： 1. 流式抗体本身也是抗体，所以选择流式抗体一定要满足抗体选择最基本的条件：目标蛋白特异性，反应种属以及应用实验。 2. 流式抗体荧光标记的方式包括直接标记和间接标记两种。在流式实验过 ...

1、Q：rh Annexin V R-PE 20 tests是BD公司用于凋亡流式检测的试剂盒，产品显示种属为人，请问能否用于大鼠细胞的检测？ A：可以。因为Annexin V是与PS亲和，而PS在不同种属间应该没差异。在正常细胞中，磷脂酰丝氨酸（PS）只分布在细胞膜脂质双层的内侧，而在细胞凋亡早期，细胞膜中的磷脂酰丝氨酸（PS）由脂膜内侧翻向外侧。Annexin V是一种分子量为35~36kD的 ...

1、流式细胞仪上的FL2-W FL2-A FL2-H 分别是做什么的？ FL2-W是只检测荧光的脉冲宽度， FL2-H是指脉冲高度。通常在做细胞周期分析时应用，用于去除粘连细胞。 2、流式同型对照怎样选择？ 同型对照（Isotype Control）：使用与一抗相同种属来源、相同亚型、相同剂量和相同的免疫球蛋白及亚型的免疫球蛋白，用于消除由于抗体非特异性结合到细胞表面而产生的背景染色。如果一抗是多 ...

1、Q：要做胃粘膜组织的DNA含量及倍体检查，但取材后要等几个星期才会做流式细胞术检查，请问：胃组织要怎样保存好呢？用低温保存，还是用乙醇固定？或者固定后再低温下保存？ A：我做过乳腺细胞的DNA含量测定，取得组织以后，先处理成单细胞悬液，然后再加70%冰乙醇固定，要保证冰乙醇的最终浓度为50%，这样固定的细胞悬液可以至少保存12小时，最多可保存一个月，上机检测前再加PI综合染液。我就是这样做的， ...

由于在流式细胞实验过程中，荧光抗体对单细胞悬液的标记效果直接影响实验的数据质量。因此，需要考虑各种影响流式抗体品质及检测效果的因素，例如抗体特异性、荧光素信号强弱、荧光素标记方式、同型对照等。流式抗体的选择：1 流式抗体本身也是抗体，所以选择流式抗体一定要满足抗体选择最基本的条件：目标蛋白特异性，反应种属以及应用实验。2 流式抗体荧光标记的方式包括直接标记和间接标记两种。在流式实验过程中，尽量减少 ...

PVDF膜与硝酸纤维素膜的比较： PVDF膜的材质是由 Millipore 公司在1985年首创并应用于蛋白转印。由于PVDF膜与硝酸纤维素膜相比有许多突出的优点，包括更好的蛋白质保留率、更高的机械强度和更广的化学相容性(Pluskal et al. 1986)，因此被广泛使用于免疫检测实验当中。其中更高的机械强度和更优的化学相容性使PVDF膜成为免疫检测中染色和二次免疫检测时的理想 ...

一、如何搭配流式抗体荧光标记流式抗体荧光标记搭配主要由3个因素决定的：流式细胞仪能检测多少个通道、需要同时检测检测多少个指标、厂家的抗体有多少种荧光标记。如果流式细胞仪的通道越多，那么同一份样本能同时做的表面/胞内标志就越多A、 如何根据流式细胞仪搭配流式抗体1） BD流式细胞仪（06版目录第614页）流式细胞仪能检测多少个通道是由有多少根激光决定的以及每根激光的功能决定的，所以首先需要注意两点： ...