生物化学技术

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相关专题 1. 1.5 mol/L Tris (PH8.8)1.称量181.7g Tris置于1L烧杯中。2.加入约800 ml去离子水，充分搅拌溶解。3.用浓盐酸调节pH值至8.8。4.定容至1L.5.高压灭菌后，室温保存。注意：应使溶液冷却至室温后再调定pH值，因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大，温度每升高1oC，溶液的pH值 ...

相关专题 磁珠法纯化DNA主要是利用利息交换吸附材料吸附核酸，从而将核酸和蛋白质等其细胞中其他物质分离。本文主要概述了磁珠法纯化DNA原理、核酸分离与纯化的原则、核酸分离与纯化的步骤。 磁珠法纯化DNA原理 磁珠法核酸纯化技术采用了纳米级磁珠微珠，这种磁珠微珠的表面标记了一种官能团，能同核酸发生吸附反应。硅磁(Magnetic Silica ...

相关专题 难溶于水的试剂配制，试剂贵重，我想用DMSO直接配好之后保存，需要处理细胞的时候直接加，不知这样可不可以?这样的话如何过滤?还是应该用少量DMSO溶解后用PBS或培养基扩大稀释，然后过滤，分装保存。 冷冻保存使用之DMSO 等级， 必须为Tissue culture grade之DMSO (如Sigma D2650)， 其本身即为 ...

相关专题 蛋白酶抑制剂 破碎细胞提取蛋白质的同时可释放出蛋白酶，这些蛋白酶需要迅速的被抑制以保持蛋白质不被降解。在蛋白质提取过程中，需要加入蛋白酶抑制剂以防止蛋白水解。以下列举了5种常用的蛋白酶抑制剂和他们各自的作用特点，因为各种蛋白酶对不同蛋白质的敏感性各不相同，因此需要调整各种蛋白酶的浓度。由于蛋白酶抑制剂在液体中的溶解度极低，尤其应注 ...

相关专题 解析蛋白酶活性测定 聚焦蛋白酶研究新进展 在动物胰脏中，胰蛋白酶是以无活性的酶原状态存在的。在生理条件下，胰蛋白酶原随胰液分泌至十二指肠后，在小肠上腔有Ca2 的环境中，为肠激酶或胰蛋白酶所激活，其肽链N-端的赖氨酸与异亮氨酸之间的一个肽键被水解，失去一个酸性6肽，其分子构象发生一定的改变后转变为具有催化蛋白质水解活性的胰蛋白酶。 ...

相关专题 一、苏木素 (1) Harris苏木素： 配方：苏木素 1 g 无水乙醇 10 ml蒸馏水 200 ml 钾明矾 20 g HgO 0.5 g 先将苏木素溶于无水乙醇中，备用。把明矾放入蒸馏水，加热溶解，再加入备用的苏木素，煮沸 2 分钟，先加入少量的氧化汞，防止氧化过程中苏木素外溢，玻棒搅拌，然后，边搅拌边加入氧化汞。加完后，立 ...

相关专题 解析蛋白酶活性测定 聚焦蛋白酶研究新进展 1 定义 1g固体酶粉(或1mL液体酶)，在一定温度和PH值条件下，1min水解酪素产生1ug酪氨酸为一个酶活力单位，以(u/ mL)表示。 2 福林法(第一法) 2、1 原理 蛋白酶在一珲的温度与PH条件下，水解底物，产生含有酚基的氨基酸(如：酪氨酸、色氨酸等)，在碱性条件下，将福林试剂( ...

相关专题 毛细管电泳技术也称为高效毛细管电泳(high performance capillary electrophoresis，HPCE)。是从传统电泳发展而来的新型高效的分析分离技术。1967年Hjerten最先提出区带电泳。1974年Virtanen提出用200～500µm内径的毛细管作电泳分离。1981年Jorgenson和Luk ...

相关专题 荧光分析法具有灵敏度高、选择性强、试样量少的特点。本实验的主要目的是通过学习荧光法测定硫酸奎宁，掌握VARIAN荧光分光光度计的使用方法以及利用荧光法进行定量分析。 一、实验目的 1.熟悉VARIAN荧光分光光度计的原理和使用 2.掌握激发光谱和发射光谱的概念及测定方法 3.掌握用标准曲线法进行荧光定量分析 VARIAN荧光分光 ...

相关专题 维生素B12在一定波长的光照射下，会发出绿色荧光，制作多维葡萄糖粉试样的标准曲线，根据荧光强度可以计算多维葡萄糖粉中维生素B12的含量。 实验目的 Ø学习荧光分光光度法测定多维葡萄糖粉中维生素B2的分析原理。 Ø掌握荧光分光光度计的操作技术和测定多维葡萄糖粉中维生素B2 的方法。 荧光分析法实验原理 常温下，处于基态的分子吸收一定 ...

相关专题 PCR实验室产品选择指南 实时荧光PCR定量包括探针类和非探针类两种，探针类是利用与靶序列特异杂交的探针来指示扩增产物的增加，非探针类则是不利用杂交原理，而利用其他的一些理化特征指示扩增产物的增加。前者由于增加了探针的识别步骤，特异性更高，但后者则简便易行。 1.TaqMan 探针 TaqMan 探针是一种寡核苷酸探针，荧光基团连接 ...

相关专题 1、30%丙烯酰胺溶液 【配制方法】将29g丙烯酰胺和1g NN'-亚甲双丙烯酰胺溶于总体积为60ml的水中。加热至37℃溶解之，补加水至终体积为100ml.用滤器(0.45μm孔径)过滤除菌，查证该溶液的pH值应不大于7.0置棕色瓶中保存于室温。 【注意】丙烯酰胺具有很强的神经毒性并可以通过皮肤吸收，其作用具累积性 ...

相关专题 Northern Blotting技术专题 这一方法原于McMaster和Carmichael(1977)。 含有乙二醛-DMSO的凝胶比含有甲醛的凝胶更难于进行电泳， 因为前者泳动速率较慢而且需将电泳液时行循环以避免电泳过程中形成过高的H+梯度。尽管上述两种凝胶具有近乎相等的分辨率(Miller，1987)，但用含朋乙二醛-DMS ...

相关专题 细胞裂解液的成分包括了Tris-HCl、EDTA 和NaCl。组织裂解液的成分主要是 Urea、thiourea、CHAPS 等。除了蛋白提取裂解液外，上述两种裂解液在一些实验中的用途也不可小觑。本文介绍这两种裂解液的配方和配制过程。 组织裂解液配方：` 7M Urea(60. 06) 4.2042 g 2M thiourea(7 ...

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相关专题 实验室常规溶液很多，总是少不了一些缓冲液、培养基、染色液、抗生素的配制等，这里总结了一些常规溶液、细胞化学和细胞组分分离溶液、细胞培养和细胞融合溶液、制备电镜标本的溶液、显影和定影溶液的配制。希望对大家有用。 一、常规溶液 (一)1/15mol/L PBS(磷酸缓冲液Phosphate Buffer Solution，PBS) 甲 ...

相关专题 万能缓冲液PBS 磷酸盐缓冲液(简称PBS)的是生物化学中常用的一种阻碍溶液pH变化的缓冲溶液，这种由盐溶液中含有氯化钠，磷酸盐，磷酸盐，氯化钾和磷酸钾组成。组份浓度：137 mM 氯化钠，2.7 mM 氯化钾，10 mM 磷酸二氢钠，2 mM 磷酸二氢钾。本文总结了PBS和D-PBS溶液的配制方法。 1、常规PBS磷酸盐缓冲液 组 ...

相关专题 很多植物受到机械损伤时在空气中会逐渐变成褐色，这是损伤时植物细胞破碎，原来彼此分开的多酚氧化酶和多酚类物质接触反应的结果。反应如下： 多酚氧化酶(po1yphenoloxidase，PP0)是一种含铜酶，它能够催化酚类物质转变成醌。近几十年来，国内外对植物组织褐变的研究表明，组织的褐变主要是PP0作用于天然底物酚类物质所致。 一 ...

修仙分为五个阶段，一一对应如下： 炼气期———-大学 此时正式打基础的时期，无甚修为，也没有眼界，只能修炼一般的基础功法，除了同辈直接较量一下，各个门派也无甚差别，甚至散修也差不到哪里去。当然有灵根的弟子会被北大，清华等大门派吸纳，但是入门的惨烈争斗还是触目惊心的（高考）； 筑基期———-Ph.D在读时期 此时已经有了一 ...