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液相色谱柱使用样品处理与流动相的配制

相关专题 液相色谱和气相色谱技术 色谱柱在使用前,最好进行柱的性能测试,并将结果保存起来,作为今后评价柱性能变化的参考。但要注意:柱性能可能由于所使用的样品、流动相、柱温等条件的差异而有所不同;另外,在做柱性能测试时是按照色谱柱出厂报告中的条件进行(出厂测试所使用的条件是最佳条件),只有这样,测得的结果才有可比性。 1、样品的前处理: a、最 ...

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色谱柱的平衡、再生与维护

相关专题 液相色谱和气相色谱技术 新的色谱柱在使用之前应该在您自己的液相色谱仪上进行性能测试,即使用色谱柱附带的检验报告上测试条件和样品来测定该色谱柱的柱效。并且,在以后的使用中,应时常对色谱柱进行测试。 卡套柱的安装(不加预柱) 1.将卡套架套入柱芯; 2.将两片夹套片嵌入柱芯的凹槽,使柱芯高于夹套; 3.将已套到柱芯上的卡套架向上推,直至 ...

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高效液相色谱日常操作维护

相关专题 液相色谱和气相色谱技术 1、流动相的抽作要求: 高效液相级色谱醇,二次蒸馏水,缓冲盐一定要过滤; 流动相脱气至关重要(可采用抽滤,超声波脱气等方法)。 2、吸滤头: 特殊情况下可拆下滤头抽取以判断其中是否堵塞;亦可用注射器吸取流动相通过吸滤头打出以判断其是否堵塞。若有堵塞情况可用异丙醇超声波清洗;清洗不成功则需要更换。 3、单向阀: ...

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色谱仪操作规程至岛津LC-10AD型高效液相色谱仪

相关专题 液相色谱和气相色谱技术 1.目的 规范岛津LC-10AD型高效液相色谱仪的使用。 2.范围 适用于岛津LC-10AD型高效液相色谱仪的使用。 3.职责 质检员对本规程的实施负责。 4.规程 4.1 系统组成 本系统由1个LC-10ADvp溶剂输送泵、FCV-10AL低压梯度混合器、在线脱气机、Rheodyne 7725i手动进样阀、 ...

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色谱仪操作规程之P230高效液相色谱仪系统

相关专题 液相色谱和气相色谱技术 1.目的 建立一个大连依利特P230高效液相色谱仪的使用、维护保养标准操作程序,使操作过程标准化。 2.职责 质量部QC负责本文件的起草,质量部及QC检验人员负责本标准的实施。 3.范围 本标准适用于大连依利特P230高效液相色谱仪的使用、维护和保养。 4.内容 4.1 仪器组件、型号 4.1.1 仪器组成: ...

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色谱仪操作规程之BECKMAN 125型高效液相色谱仪

相关专题 液相色谱和气相色谱技术 1. 适用范围 本标准适用于BECKMAN 125型高效液相色谱仪的使用操作。 2. 目的与意义 规范BECKMAN 125型高效液相色谱仪的使用操作,保证高效液相测量结果的准确性。 3. 责任 质量分析人员全面负责本SOP的实施。 4. 仪器的组成 本系统由SYSTEM GOLD® 125溶剂输送泵、SYS ...

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色谱仪操作规程之HP4890D气相色谱仪

相关专题 液相色谱和气相色谱技术 HP4890D气相色谱仪系统通过了各种严格的测试和检验,以保证其符合各项安全和电磁性能方面的工业标准。另外,它还通过了一项测试,即确保在电压波动、温度、湿度和震动等超出规定范围时,系统可保持正常的运行。HP4890D GC是由在现代气相色谱发展史上曾享誉全球的HP5890 GC发展创新而推出的。HP4890D ...

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高效液相色谱仪的原理、应用及故障处理

相关专题 液相色谱和气相色谱技术 1 高效液相色谱仪的系统组成、工作原理 高效液相色谱仪的系统由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。储液器中的流动相被高压泵打入系统样品溶液经进样器进入流动相被流动相载入色谱柱(固定相) 内 由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数 在两相中作相对运动时 经过反复多次的吸附- 解吸的 ...

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色谱仪操作规程之戴安ICS-2000离子色谱

相关专题 液相色谱和气相色谱技术 一、开机步骤: 1. 打开氮气总阀,将分压表调至0.2Mpa。再调节淋洗液瓶上分压表的分压至5~6psi。2. 接通 ICS-2000主机电源,开启电脑,等待屏幕右下角出现 图标后,启动桌面的 图标,进入Broswer界面,找到“ICS-2000_Tradition_System_AS50.pan”文件并双击 ...

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如何进行原位杂交

相关专题 带有标记的(有放射性同位素,如3H、35S、32P、荧光素生物素、地高辛等非放射性物质)DAN或RNA片段作为核酸探针,由于核酸探针的种类和标记物的不同,在具体应用的技术方法上也各有差异,但其基本方法和应用原则大致相同。大致可分为:①杂交前准备,包括固定、取材、玻片和组织的处理,如何增强核酸探针的穿透性、减低背景染色等;②杂交;③ ...

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EDTA-二钠

相关专题 EDTA-2Na(乙二胺四乙酸二钠) 英文名:EDTA-2Na(EDTA Disodium Salt) 分子式:C10H14N2Na2O8?2H2O 分子量:M=372.2 结构式:HOOCH2C CH2COONa N-CH2-CH2-N HOOCH2C CH2COONa 乙二胺四乙酸二钠与钙离子作用   性状:为无味无臭或 ...

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单克隆抗体的制备过程

相关专题 生物帮之抗体制备 单克隆抗体(MAb)是针专一的抗原决定簇产生的抗体,单克隆技术又名杂交瘤技术起源于1975年,由G.KÖhler和Milstein创立。主要原理是利用产生抗体的B细胞与肿瘤细胞杂交融合成杂交瘤细胞,生产抗体。 杂交瘤技术制备单克隆抗是针对体的主要步骤包括: (1)抗原制备; (2)免疫动物; (3)免疫脾细胞和骨 ...

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凝胶层析(分子排阻层析)的种类、操作及应用

相关专题 凝胶层析是一种利用被分离蛋白质分子量的差异进行分离的层析技术,又名凝胶过滤或分子筛层析或分子排阻层析。分子排阻层析最大的优势在于实验所需条件极其温和。 凝胶层析简介 凝胶层析(gel chromatography)又称为凝胶排阻层析(gel exclusion chromatography)、分子筛层析(molecular sie ...

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13种蛋白浓缩方法的应用过程需知

相关专题 蛋白浓缩在免疫学中应用广泛,蛋白浓缩的方法数数还不少:聚乙二醇沉淀法、冷冻干燥浓缩法、超滤膜浓缩法、有机溶剂沉淀法……那么,这些方法用的时候该注意哪些问题呢?请看下文: 1、丙酮沉淀法:三氯醋酸沉淀法试验要求的仪器简单,但是常常导致蛋白质变性。 2、免疫沉淀法:得有特异性抗体 3、硫酸铵沉淀法:利用高浓度盐将蛋白质析出(盐析) 选 ...

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非同位素原位杂交组化与免疫组化联合法实验步骤

相关专题 如何实现完美的免疫组化实验 步骤如下:   (1)将切片漂浮于能经受高压灭菌的器皿中。0.1mol/l PBS pH7.2冲洗3×5min。   (2)0.1mol/L甘氨酸PBS冲洗5min。   (3)0.4% Triton X-100 PBS 15min。   (4)1μg./ml蛋白酶K(0.1mol/l Tris – ...

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另一种BSA——N,O-双三甲硅基乙酰胺

相关专题 它们都是BSA NO-Bis(trimethylsilyl)acetamide 别名:NO-双(三甲基硅基)乙酰胺 CAS No: 10416-59-8 分子式:C8H21NOSi2 分子量:203.43 通用名称:BSA 性状: 无色至浅黄色液体,b.p 74-76oCfp42oCd420 0.829nd20 1.417。本品易 ...

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采用高效液相色谱法纯化小鼠腹水中单克隆抗体实验步骤

相关专题 生物帮之抗体制备 从小鼠腹水中纯化McAb的方法有盐析、离子交换层析、凝胶过滤和亲和层析等。应用TSK DEAE-SPW离子交换层析柱从小鼠腹水中纯化McAb不仅纯化速度快,回收率和得率高,而且保持良好的生物学活性。 (一) 原理 根据离子交换原理,将经硫酸铵粗提的含McAbγ球蛋白上样结合于层析柱上,通过增加洗脱液中的 ...

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探针标记方法

相关专题 探针的原理及其应用 探针标记方法有 ①DNA的缺口平移法。缺口平移是一种快速、简便、成本相对较低以及生产高比活性均一标记DNA的方法。该技术可以制备序列特异的探针。当使用重组质粒探针时,虽然任何形式的双链DNA都可以进行缺口平移标记。但通常使用限制性核酸内切酶将插入片段进行酶切和凝胶电泳纯化后再进行缺口平移标记。此外,用这种探针进行 ...

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多克隆抗体纯化方法

相关专题 生物帮之抗体制备 【实验原理】 亲和层析的高度选择性使得从某一初始材料中纯化,富集某一含量较低的目的蛋白成为可能,因此亲和层析是蛋白质分离纯化过程中最有效的方法之一。另外,如果配基与蛋白质的亲和能力很强,也可同时进行样品的浓缩。 虽然多数情况下不需要将抗体与其他血清蛋白分开,但如果一旦需要,蛋白A亲和层析是一种非常有效的分离方法。蛋 ...

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实验室常用实验生物试剂的配制大全

相关专题 实验室常用试剂的配制:无Ca2+、Mg2+ Hanks液、Hanks液(原液)、甲基红试剂、0.4%酚红溶液、pH7.2 Tris-NH4CI溶液(红细胞崩解液)、0.05moI/L pH8.6 巴比妥缓冲液、磷酸盐缓冲液 (PBS)、0.1mol/L PH8.4 硼酸缓冲液(BBS)、0.05mol/L pH9.6 碳酸缓冲液、 ...

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