生物化学技术

相关专题 生物化学经常考，但是题目类型及考察重点差别很大。建议大家找到所报考院校的历年真题参考一下，看它考察的重点是什么。一般说来，大致有两种出题方向：一种以问答题为主。一种填空选择教多。同济医大，复旦大学医学院，山东大学医学院主要考察问答题，而北大医学部，协和医大，首都医科大学，上海第二医科大学，第二军医大学，中科院生化所考察填空选择较多 ...

相关专题 一、原理：氨基酸混合液经纸上层析，由于不同的氨基酸有不同的分配系数，移动速率不同，从而达到分离。经显色后，与标准氨基酸图谱比较或与氨基酸的标准Rf值比较，可辨别各种氨基酸。二、材料与试剂1、酸向展开剂：正丁醇：88%甲酸：水=15：3：2，量取正丁醇150ml，88%甲酸30ml，蒸馏水20ml，置入分液漏斗中充分振荡。此液需新配制 ...

相关专题 一、原理：酵母细胞置于含有SDS的缓冲溶液中，加等体积的苯酚水溶液，通过激烈振荡一段时间，将RNA和蛋白质分开，然后离心分层，RNA溶于上层水溶液中，DNA和蛋白质在酚相。RNA可用乙醇沉淀析出。二、材料与试剂：新鲜湿酵母、SDS-Tris缓冲液（0.3％SDS，0.01MMgCL2，0.1MTris，用HCL调至PH7.2）、苯酚 ...

相关专题 一、实验目的 学习用阳离子交换树脂柱分离氨基酸的操作方法和基本原理。 二、实验原理 离子交换层析(ion exchange chromatography，简称ICE)是分析和制备样品混合物的液-固相层析方法，是基于待测物质的阳离子或阴离子和相对应的离子交换剂间的静电结合，即根据物质的酸碱性、极性等差异，通过离子间的吸附和脱吸附原理 ...

相关专题 一、实验目的1. 学习从组织细胞中制备酶的方法。2. 掌握多酚氧化酶的作用及各种因素对其作用的影响。二、实验原理多酚氧化酶是一种含铜的酶，其最适pH值为6～7。由多酚氧化酶催化的反应，如以邻苯二酚为底物，可以被氧化形成邻苯二醌。由多酚氧化酶催化的氧化还原反应可通过溶液的颜色的变化鉴定，这个反应在自然界中是常见的，如去皮的马铃薯和水果 ...

相关专题 一、实验目的了解糖酵解过程的某一中间步骤及利用抑制剂来研究中间代谢的方法。 二、实验原理利用碘乙酸对糖酵解过程中3-磷酸苷油醛脱氢酶的抑制作用，使3-磷酸苷油醛不再向前变化而积累。硫酸肼作为稳定剂，用来保护3-磷酸苷油醛是不自发分解。然后用2，4-二硝基苯肼与3-磷酸苷油醛在碱性条件下形成2，4-二硝基苯肼-丙糖的棕色复合物，其棕色 ...

相关专题 一、实验目的①学习和掌握从植物组织中分离核酸的原理和操作方法。②学习和掌握测定核酸含量的定糖法(苔黑酚法和二苯胺法)的原理及操作方法。二、实验原理核酸是生物体内的主要化学成分，核酸在生物体内主要以核蛋白的形式存在。核酸分为脱氧核糖核酸(DNA)和核糖核酸(RNA)。DNA主要存在与在细胞核中，RNA主要存在于细胞质中。用冰冷的稀三氯 ...

相关专题 重组DNA技术工具酶基因工程让一切皆有可能 基因工程操作中涉及一系列相互关联的酶促反应。已经知道有许多重要的核酸酶，如限制性内切核酸酶、外切核酸酶、DNA连接酶、DNA聚合酶、反转录酶、DNA及RNA的修饰酶等，在基因工程的操作中有着广泛的用途。 1.限制性内切核酸酶 限制性内切核酸酶(restrictionendonuclease ...

相关专题 “分子机器”是多种特殊蛋白质组成的复合体，这些蛋白质能共同协作执行某个生物功能。大部分活细胞要发挥功能，必须通过“分子机器”来实现。长期以来，进化的脚步如何一点点地造就出这些复杂的结构还是个谜。 最近，美国芝加哥大学和俄勒冈大学科学家利用生化技术复活了一些古老的基因，在现代生物体上测试了它们的功能，并得出了令人惊讶的结论：分子机器 ...

相关专题 一.玻璃仪器的洗涤及一些常用的洗涤剂 1. 玻璃仪器的洗涤 (1)新购买的玻璃仪器 首先用自来水洗去表面灰垢 然后用洗衣粉刷洗 自来水冲净后 浸泡在 1%~2% 盐酸溶液中过夜以除去玻璃表面的碱性物质。最后 用自来水冲洗干净 并用蒸馏水冲洗 2 次。 (2)对于使用过的玻璃仪器 应先用自来水冲洗 再用毛刷蘸取洗衣粉刷洗。用自来水充 ...

相关专题 重组DNA技术工具酶 什么是VentR、VentR(exo-)、 Deep VentR和 Deep VentR(exo-) DNA聚合酶? NEB公司研发的VentR和Deep VentR DNA聚合酶都是克隆于海底高温喷泉的微生物，其耐热性能和保真性能远高于Taq DNA聚合酶。VentR的半衰期在100°C时是1.8小时，是Ta ...

相关专题 重组DNA技术工具酶 Taq DNA聚合酶是从一种水生栖热菌(Thermusaquaticus)yT1株分离提取的.yT是 一种嗜热真菌，能在70～75℃生长.该菌是1969年从美国黄石国家森林公园火山温泉 中分离的. (一)酶活性与热稳定性 该酶基因全长2496个碱基，编码832个氨基酸，酶蛋白分子为 94KDa.其比活性为200 ...

相关专题 重组DNA技术工具酶 核糖核酸聚合酶(RNA polymerase) 催化RNA合成的酶。主要指DNA指导的RNA聚合酶，即以DNA为模板，以4种核苷三磷酸(ATP，GTP，CTP和UTP)为底物，从5′到3′合成RNA的酶。其催化方式与DNA聚合酶相似，但不具备有校正作用的外切核酸酶活性，聚合反应也不需引物 ...

相关专题 重组DNA技术工具酶 端粒是真核细胞染色体末端的一个特殊结构，由一段具有特定重复序列的DNA和端粒结合蛋白组成，是维持染色体结构稳定的重要因素。端粒DNA的复制不是由DNA聚合酶完成的，而是由端粒酶(telomerase)催化合成后添加到染色体的末端。正常细胞随着细胞分裂活动的进行，端粒DNA逐渐缩短，当缩短到一定程度时，染色体结构 ...

相关专题 重组DNA技术工具酶 DNA聚合酶1: 1.能催化单个脱氧核糖核苷酸连接到DNA链的3'端. 2.能沿5'端到3'端方向外切DNA(切除引物) 3.能沿3'端到5'端方向外切DNA(纠错或者说DNA损伤的恢复) DNA聚合酶2: 1.发挥作用需要镁离子和铵根离子存在 2.同样能参与DNA聚合酶 ...

相关专题 RNA酶A是内切核糖核酸酶，可特异地攻击RNA上嘧啶残基的3"端，切割与相邻核苷酸形成的磷酸二酯键。反应终产物是嘧啶3"磷酸及末端带嘧啶3"磷酸的寡核苷酸(Davidson 1972)。无辅因子及二价阳离子存在时，RNA酶A的作用可被胎盘RNA酶抑制剂(B1ackburn et al.1977)或氧钒—核糖核苷复合物(Puskas ...

相关专题 重组DNA技术工具酶 一、甲基化酶的种类 原核生物甲基化酶是作为限制与修饰系统中的一员，用于保护宿主 DNA 不被相应的限制酶所切割。在 E.coli 中，大多数都有三个位点特异性的 DNA 甲基化酶。 1.Dam 甲基化酶 Dam 甲基化酶可在 GATC 序列中的腺嘌呤 N6 位置上引入甲基。一些限制酶(PvuⅡ BamHⅠ、Bc ...

相关专题 锌指核糖核酸酶(ZFN) 由一个 DNA 识别域和一个非特异性核酸内切酶构成。DNA 识别域是由一系列 Cys2-His2锌指蛋白(zinc-fingers)串联组成(一般 3~4 个)，每个锌指蛋白识别并结合一个特异的三联体碱基。锌指蛋白源自转录调控因子家族(transcription factor family)，在真核生物中 ...

相关专题 (一)　原理 DEAE-SephadexA-50(二乙基氨基乙基-葡聚糖A-50)为弱碱性阴离子交换剂。用NaOH将CL-型转变为OH-型后，可吸附酸性蛋白。血清中的γ球蛋白属于中性蛋白(等电点为PH6.85～7.5)，其余均属酸性蛋白。在PH7.2～7.4的环境中，酸性蛋白均被DEAE-Sephadex A-50吸附 ...

相关专题 NBS溴化试剂与溴化反应 NBS 1. n-bromosuccinimide、n-溴代琥珀酰亚胺(化学物名称) n-溴代丁二酰亚胺(n-bromosuccinimide 简称nbs 又称n-溴代琥珀酰亚胺、1-溴-25-吡咯二酮)是一个很有用的溴化剂，它具有高度的选择性，只进攻弱的c—h键即进攻与双键或苯环相连的α-h ...