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Protocol of the protein extraction method

相关专题 1. One-step extraction method:在冰上将组织在匀浆缓冲液中(25mM NaH2PO4 pH7.2,1.5mM EDTA,10% Glycerol,10mM Na2MO4,10mM NaF,2μM Aprotinin,5μM Leupeptin,2mM PMSF)剪碎,用高速搅拌器匀浆,而后于10 ...

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毛细管电泳及其应用(capillary electrophoresis, CE)

相关专题 一、毛细管电泳的概述:毛细管电泳又称高效毛细管电泳,它是在熔融的石英毛细管(内径为25~100m)中进行电泳,其管内填充缓冲液或凝胶,是近年来进展最快的分析方法之一。毛细管电泳是电泳技术和现代微柱分离相结合的产物,它具有效率更高、速度更快、样品和试剂消耗量特少的特性。毛细管电泳仪的基本结构:1、 高压电极槽与进样机构 2、填 ...

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表达蛋白的SDS

相关专题 一、原理 细菌体中含有大量蛋白质,具有不同的电荷和分子量。强阴离子去污剂SDS与某一还原剂并用,通过加热使蛋白质解离,大量的SDS结合蛋白质,使其带相同密度的负电荷,在聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)上,不同蛋白质的迁移率仅取决于分子量。采用考马斯亮兰快速染色,可及时观察电泳分离效果。因而根据预计表达蛋白的分子量,可筛选阳性表达的重组 ...

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超氧化物歧化酶的活性测定

相关专题 超氧化物岐化酶(Superoxide dismutase,简称 SOD)广泛存在于生物体内的含Cu、Zn、Mn、Fe的金属类酶。它作为生物体内重要的自由基清除剂,可以清除体内多余的超氧阴离子,在防御生物体氧化损伤方面起着重要作用。离子(O2 -)是人体氧代谢产物,它在体内过量积累会引起炎症、肿瘤、色斑沉淀、衰老等疾病,超氧阴离子与生 ...

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蛋白等电聚焦凝胶电泳技术

相关专题 1.原理:等电聚焦凝胶电泳是依据蛋白质分子的静电荷或等电点进行分离的技术,等电聚焦中,蛋白质分子在含有载体两性电解质形成的一个连续而稳定的线性pH梯度中电泳。载体两性电解质是脂肪族多氨基多羧酸,在电场中形成正极为酸性,负极为碱性的连续的pH梯度。蛋白质分子在偏离其等电点的pH条件下带有电荷,因此可以在电场中移动;当蛋白质迁移至其等电 ...

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全自动电泳疑问解答FAQs

相关专题 Analysis Kits (ChIPs and Reagents)Experion Automated Electrophoresis — Sample Types What types of samples can the Experion separate and analyze?The Experion automated ...

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煮沸法快速提取质粒以及琼脂糖电泳与DNA酶解

相关专题 一. 实验目的: 1、 掌握质粒 DNA 分离,纯化的原理 2、 学习煮沸法快速提取质粒 DNA 的方法 3、 学习 DNA的限制性酶切的基本技术 4 、 学习利用琼脂糖电泳测定 DNA片段的长度 二、 实验原理 在基因工程中, DNA 分子的切割是由限制性内切酶来完成的。限制性内切酶能识别特定的 DNA 序列,在一定的 ...

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Western转印与电泳的常见问题

相关专题 表1 Common problems for electrophoresis and western bloting 问 题可能原因建议解决方法推荐电压条件下电泳时间过长。电泳缓冲液过稀。配制新鲜缓冲液,使用1X稀释液。推荐电压条件下电流过高,热量过大。电泳缓冲液过稀。配制新鲜缓冲液,使用1X稀释液。推荐电压条件下电流过低或无电流。 ...

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组织与细胞蛋白样品的制备

相关专题 1 材料和方法 1.1 材料 1.1.1 组织和细胞的来源: 1.1.2 仪器设备 机械组织匀浆器 低温高速离心机 (40000 g) 超速离心机 超生细胞破碎仪 超纯水装置 1.1.3 试剂 三氯醋酸 (TCA) 丙酮 二硫苏糖醇 (DTT) 尿素 CHAPS PMSF EDTA 乙醇 磷酸 考马斯亮蓝R350 ...

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蛋白质SDS

相关专题 一、蛋白质SDS-Page电泳1、安装垂直板电泳装置用洗洁精、清水和无水乙醇清洗两块玻璃板,晾干后安装。2、制备SDS-聚丙烯酰胺凝胶(1)配制9%分离胶(15ml):双蒸水6.55ml,1.5M Tris-HCl(pH8.8)3.75ml,30%丙烯酰胺储存液(Acry/Bis)4.5ml,10%SDS 150ml,10%过硫酸铵 ...

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琼脂糖凝胶电泳技术

相关专题 1、实验目的:学习与掌握DNA电泳的技术方法,利用琼脂糖凝胶电泳检测DNA纯度、含量以及分子量,及分离不同大小DNA片段。2、实验原理:电泳概念及种类• 电泳: 是指带电粒子在电场中向与其自身带相反电荷的电极移动的现象电泳基本原理迁移率(或泳动度)是指带电颗粒在单位电场强度下泳动的速度,可用下列公式计算:U =υ/E =(d/t) ...

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血清蛋白醋酸纤维素薄膜电泳

相关专题 【目的】   1.掌握电泳法分离蛋白质的原理、操作方法。 2.了解电泳法分离蛋白质的临床意义。 【原理】 带电粒子在电场中向与其电性相反的电极泳动的现象称为电泳。血清中各种蛋白质的等电点大多在pH4.0~7.3之间,在pH8.6的缓冲液中均带负电荷,在电场中都向正极移动。由于血清中各种蛋白质的等电点不同,因此在同一pH环境中所带负电 ...

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血清蛋白醋酸纤维素薄膜电泳的若干问题及解决方法

相关专题 单位:右江民族医学院生化学教研室 (百色 533000) 关键词: 右江民族医学院学报990381 血清蛋白电泳自1957年Kohn开始使用醋酸纤维素薄膜后,经不断改进,已代替纸电泳成为常规方法 ...

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蛋白芯片的基本原理及技术研究现状

相关专题 汕头大学医学院 陈玮莹 综述 温博贵 随着分子生物学芯片技术研究工作的进一步深入开展,NDA芯片技术已经被逐渐应用于对生物样品中的各种已知或未知的核酸序列表达的检测和比较研究。但是,作为生物体细胞中实施化学反应功能成分的蛋白质,其相当部分与活性基因所表达的mRNA之间未能显示出直接的关系,因此使作为高通量基因表达分析平台的cDNA芯 ...

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蛋白质芯片技术简介

相关专题 由于利用了DNA与互补的DNA或RNA结合的典型性质 DNA 芯片在短时间内就取得了成功. 然而 已经有关于mRNA 和蛋白质之间数量关系上的争论 而且实际上在细胞中参与各种不同反应的都是蛋白质. 因此 如果能制造出蛋白质芯片而不是DNA芯片 而且如果蛋白质表达强度和键合物能被发现 就有可能把研究拓展到DNA芯片鞭长莫及的领域 ...

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神经元芯片(Neuron Chip)

相关专题 为了经济地、标准化地实现LonWorks技术的应用,Echelon公司设计了神经元芯片。神经元这一名称是为了表明正确的网络控制机制和人脑是极为相似的。人脑中是没有控制中心的。几百万个神经元连接在一起,每个神经元都能通过位数众多的路径向其他的神经元发送信息。每个神经元通常专注于某一种特殊功能,但是任何一个神经元的故障不会影响整个网络的 ...

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蛋白芯片技术解析

相关专题 人类基因组测序计划完成之后,科学家们凭借良好的DNA芯片及坚实的生物信息"生物信息学平台可以全面地了解生命细胞系统。然而在不同的细胞生理 状态下,细胞内蛋白表达及蛋白的功能存在着差异,细胞蛋白质组存在着差异。而且多种因素影响着细胞在不同环境下的生理状态,比如,细胞信号分子,细胞间及细胞与基质的相互作用等等。细胞内调控通过调节mR ...

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基于神经元芯片的远程水温监控系统的设计

相关专题 在生产生活中,热水的使用量非常大,而市面上流行的热水器通常只能设定固定的温度,并且一般需要在现场控制。但在许多工业场合,经常需要对远端热水装置的工作过程进行控制,使其生产出稳定的热水,并可随时调节水温。本文使用普通的单股双绞线作为网络物理介质,设计了一个基于LON网络的远程监控系统,来完成上述功能。 1 Lonw ...

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核酸碱基薄层层析双波色谱扫描分析

相关专题 贾成禹窦永泽(中国科学院成都生物研究所)核酸组成成分及衍生物的分析除常用的电泳、纸层析和薄层层析洗脱比色法外,近年来又出现了双波长色谱扫描法和高压液相层析法 ...

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聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳分析过氧化物酶同工酶

相关专题 一、目的 同工酶是指能催化同一种化学反应, 但其酶蛋白本身的分子结构组成却有所不同的一组 酶。它们是 DNA编码的遗传信息表达的结果。最近的研究表明,同工酶与生物的遗传、生 长发、代谢调节及抗性等都有一定的关系。因此,测定同工酶在理论上和实践上都有重要的 意义。用聚丙烯酰胺凝胶电泳测定同工酶,方法简便、灵敏度高,重现性强,测定结果便 ...

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