胶体金免疫标记技术-蛋白-金复合体的制备一般认为胶体金粒子表面为一层AuCl2,因此,粒子表面带有负电荷,这种负电荷粒子之间相互排斥,形成稳定悬浮的胶体金溶液。金颗粒表面可以包被一层生物大分子(如蛋白)来稳定和保护这些粒子,以免受外来电解质的影响而相互凝聚在一起。胶体金粒子对蛋白的吸附作用取决于pH值,这是因蛋白的净电荷取决于溶液的pH值,在pH=pI时为中性。由于在pH=pI时蛋白溶解度最小,因此这时它水化程度 ...
胶体金标记技术路线的选择1.包埋剂根据抗原或标记底物性质决定包埋剂种类。蛋白类,推荐使用K4M;包埋后立即切片标记。外泌蛋白可选择spurr。可长期保存使用。细胞结构组分,如纤维素、b-1,3-葡聚糖、几丁质、多酚化合物等,可选择spurr。2.胶体金体积精细定位如病毒、细胞器定位等选用5 nm胶体金。细胞壁组分采用15-20 nm胶体金。多标记时,胶体金直径推荐选用6 nm、10 nm、15 nm;稳定抗原采用较大颗粒胶体金。一般蛋白标记采 ...
抗体制备技术的选择(上) 30年以来,杂交瘤方法已经成为实验室制备单克隆抗体的主要技术,现在仍然在免疫组化(immunohistochemistry)和各种不同的细胞生物学技术中发挥着重大的作用。但是在过去10年里,基因工程重组技术带来了组合库和抗体工程等技术,尤其在高端抗体应用领域,包括治疗性抗体药物的开发等。 重组技术例如噬菌体展示等技术需要更高的技巧 ,假如你的实验对象是一些高毒性和无免疫性抗原,例如一些肿瘤和病毒 ...
ELISPOT的优势ELISPOT斑点酶联免疫分析使细胞因子分泌过程更加形象。因为细胞因子围绕在细胞周围,在被上清液稀释之前,会和邻近细胞表面的受体结合,或者降解。细胞因子和GranzemyB ELISPOT实验是最有效的体外监控CD4或CD8T细胞抗原的方法。通过测定单个细胞因子信号及其频率,可以建立具有不同集落大小的特殊T细胞库。 ELISPOT实验检测细胞因子的独特优势 ☆从1到10,000,000,可以精确测量 ...
从分离到表达 不同的抗体重组技术可以用于制备不同的抗体,工业上和学术界都发展了许多相关的技术,噬菌体展示就是其中的主导技术。昆虫和哺乳动物细胞的表达系统从理论上而言是相似的,但是其它的分子进化类型需要重新提炼和分离抗体。剑桥抗体技术(Cambridge Antibody Technologies)和其它研究单位的大规模抗体库的筛选通常都是一些方法组合,例如噬菌体展示和核糖体展示组合,进一步提高抗体的亲和力。然而,较少的 ...
影响ELISA实验效果常见分析 ELISA试验以灵敏度较高、特异性较好的特点在临床上得到了广泛的应用,但操作中的各个环节对试验的检测效果影响较大,如不注意,有可能导致显色不全、花板等结果。我将操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下,以期给同行带来一些启发,提高试验质量。 在实际操作中,除了选择优良试剂外,必须严格按照操作步骤进行操作,同时作好室内质控、室间质评,以严谨的工作作风检测每一份标本,才能保证检测质量。 ...
ELISA的样本收集与前期准备 利用ELISA进行临床检验常见的样本一般包括血液(指血,静脉血),尿,粪便,脑脊液,胸腹水,前列腺液,精液,阴道分泌物等,这些样本收集的时间、方法和保存都有一定的要求。(一) 临床样本的收集A、血液样本 有些生理因素,如吸烟、进食、运动、情绪波动、妊娠、体位等均可影响血液中某些成分的变化,有些甚至还有昼夜变化。因此血液标本的采集应尽量避免生理因素干扰,以条件一致为宜,如无法避免,应在标本上注明该因素。1. ...
免疫组化实验的要点和技巧1.固定:最好用4%的多聚甲醛固定液。对于冰冻切片,甲醛固定有时比冰冻丙酮好;但对于不同的组织和抗原,可选用不同的固定液。 有时候商品化的抗体会有比较适合而推荐的固定液,请于购置前注意说明书。 Bouin S固定液:饱和苦味酸750ml,甲醛250ml,冰醋酸50ml,其对组织的穿透力较强,固定较好,结构完整,但因偏酸,对抗原有一定损害,且组织收缩明显,不适于组织标本的长期保存。 PLP液:即高碘酸钠-赖氨酸-多 ...
抗体(antibody)介绍中文版 抗体 抗体是免疫系统中的B 淋巴细胞(B细胞)产生的 蛋白质。 当花粉、 细菌等外来物质侵入机体时,抗体能与外来物质上的靶分子( 抗原)相结合。靶分子通常是蛋白质,但并不总是蛋白质。抗体也可以与其他细胞表面的抗原相结合,包括肿瘤细胞。抗体与抗原的结合标志着靶细胞或外来物质将被破坏和清除。抗原与抗体之间的相互作用是非常精确的,可以与钥匙和锁之间关系相比。任意一个特定的B细胞能够产生一种抗体,但是我们身体内有数 ...
免疫血清--immune serum免疫血清(immune serum)亦称抗血清。含有抗体的血清制剂。种类很多,包括抗毒素、抗菌血清、抗病毒血清、抗Rh血清等。(1)抗毒素,将类毒素多次免疫动物(常用马)后,采取动物的免疫血清,经浓缩纯化后制得。主要用于治疗细菌外毒素所致疾病。常用的有白喉抗毒素、破伤风抗毒素。(2)抗菌血清,在本世纪40年代以前曾用抗肺炎、抗百日咳、抗炭疽等抗菌血清治疗有关疾病。自从磺胺类药物和抗生素大量应用后, ...
β细胞移植和抑制免疫反应虽然胰岛素治疗糖尿病自从上个世纪20年代就开始使用,但是胰岛素并不能完全治愈糖尿病,并且有很多复杂的并发症。但是从70年代开始的研究发现β细胞能够完全补充移植后的葡萄糖水平,使患者体内的葡萄糖水平维持动态平衡。从尸体获得的胰腺移植到患者体内一直不能成功,直到2000年,肾上腺皮质激素的应用改良了移植的免疫排斥反应,胰腺的移植才成为治疗糖尿病的手段之一。这极大地增强了全世界糖尿病患者 ...
免疫血清的制备及免疫球蛋白的提取实验题目:免疫血清的制备及免疫球蛋白的提取教 师:XXX实验类型:基础学 时:12(参考)内 容:一、实验目的:1.理解免疫血清的来源及主要成份。2.掌握制备抗特定抗原的动物抗血清的方法。3.掌握免疫球蛋白的提取过程。二、实验原理:免疫血清的制备是利用动物,有目的地生产某种抗体,通过这种方法得到的抗体是多克隆抗体,可用于体外的抗原抗体反应。通过对正常健康兔子免疫注射通过免疫佐剂处理的外源抗原,多次免 ...
Cell-Support:Immune Therapy Strengthen Your Immune SystemClinically and Scientifically EffectiveResearch conducted by:The University of Newcastle Research Associates (TUNRA)Human Health Research Australia (HHRA) ü Helps increase White Blood cell activity(Re ...
荧光原位杂交介绍荧光原位杂交方法是一种物理图谱绘制方法,使用荧光素标记探针,以检测探针和分裂中期的染色体或分裂间期的染色质的杂交。荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization, FISH)是在20世纪80年代末在放射性原位杂交技术的基础上发展起来的一种非放射性分子细胞遗传技术,以荧光标记取代同位素标记而形成的一种新的原位杂交方法,探针首先与某种介导分子(reporter molecule) ...
FISH 荧光原位杂交图象分析系统产品性能:安莱公司自1994年就开始在中国大陆推广染色体图像分析系统。是中国大陆的先驱。安莱公司推过近十年的推广,培养了一批技术过硬的客户服务队伍,来帮助顾客选择仪器,组建实验室等工作。现在由香港自然基因有限公司继续跟进.荧光原位杂交(FISH)图像分析软件和专业图像数据库软件VideoTesT-FISH Analytics Software (荧光原位杂交图像分析软件)VideoTesT Al ...
SANDWICH ELISA FOR DETECTING SECRETEMaterials NUNC-Immuno Plate IIF. Horseradish Peroxidase-Streptavidin (Zymed; 43-4323) PBS or Balanced Salt Solution (BSS). Do not use RPMI or any medium that contains biotin. BSA (1% in PBS). ABTS substrate and substrate buffer (Zymed; #00-2011) ABTS ...
相关专题 目的: 展示GlycoWorksTM工作流程的各方面优势,包括在方法验证和故障排除中适用于不同SPE型式的灵活性以及所采用的人IgG对照标准品的可行性。 背景: 蛋白质的糖基化反应是十分有意义的翻译后修饰,可以调节蛋白质的结构和功能。生物治疗药物的糖基化作用无疑是必须进行彻底表征与监测的结构特征,尤其是在多聚糖图谱的变化与疗效和/ ...
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上世纪60、70年代是色谱/层析技术快速发展的时代,首先是层析介质有了飞速的发展,各种人工合成的介质出现,如硅胶、聚苯乙烯二乙烯基树脂、琼脂糖、葡聚糖、聚丙烯酰胺等树脂或凝胶的出现,极大地拓展了层析技术的应用领域和范围,基于不同介质的层析方法也如雨后春笋般不断涌现。如Bio-Rad公司于上世纪50年初推出的分析级离子交换树脂AG系列,广泛用于各种分子物质的分离纯化,包括无机离子、有机酸、核酸以及 ...
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