蛋白质技术

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相关专题 蛋白质不得不算是生命体中的神奇机器，不过，在它们正式各就各位时，必须经过一个步骤，即蛋白质折叠，完了没错了之后才能运行工作。那蛋白质没折叠的后果是什么呢?目前的研究证实，疯牛病、帕金森氏病等都与蛋白质的不正确折叠相关。 仅仅了解基因组序列并不能使我们充分了解蛋白质的工作，更无法了解它是如何工作的。为了发挥它的功能作用(比方作为酶和 ...

相关专题 蛋白质的结构与功能作用 凝血因子 凝血因子是参与血液凝固过程的各种蛋白质组分。它的生理作用是，在血管出血时被激活，和血小板粘连在一起并且补塞血管上的漏口。这个过程被称为凝血。它们部分由肝生成。可以为香豆素所抑制。为统一命名，世界卫生组织按其被发现的先后次序用罗马数字编号， 有凝血因子Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ，Ⅳ，Ⅴ，Ⅶ，Ⅷ，Ⅸ，Ⅹ，Ⅺ，Ⅻ，Ⅻi ...

相关专题 酵母单杂交技术是一种研究蛋白质和特定DNA序列相互作用的技术方法，主要包括四个流程即：一、筛选还有报告基因的酵母单细胞株；二、构建表达文库；三、重组质粒转化至酵母细胞；四、阳性克隆菌株的筛选。 1.酵母单杂交的基本原理 酵母单杂交技术是1993年由酵母双杂交技术发展而来的，其基本原理为：真核生物基因的转录起始需转录因子参与，转录因 ...

相关专题 蛋白质浓度测定的方法有很多，考马斯亮蓝测定蛋白质是实验室最常见的一种方式，它利用比色法和色素法混合方法、操作简便，下文介绍了考马斯亮蓝测定蛋白质浓度的原理、优缺点、操作以及注意事项。 实验原理 考马斯亮蓝(Coomassie Brilliant Blue)法测定蛋白质浓度，是利用蛋白质―染料结合的原理，定量的测定微量蛋白浓度的快速 ...

相关专题 通常，可溶性蛋白可通过离心、盐析、电泳和层析来分离。本文介绍可溶性蛋白离子交换柱层析操作规程：包括了装柱、柱的平衡与上样、洗杂蛋白、解离目的蛋白以及柱的清洗与保存操作规范。 1.装柱： 1.1 取出层析柱，用去离子水冲洗干净，连接好管子后固定柱子; 1.2用水冲洗层析柱3-5次，每次10ml去离子水; 1.3取出填料，静止至室温后 ...

相关专题 酵母单杂交法是研究特定DNA序列和蛋白质相互作用的有效手段，cDNA文库构建作为酵母单杂交实验的核心技术，那么酵母单杂交实验中cDNA文库选择什么试剂盒构建呢？ 酵母单杂交体系(yeast one-hybrid system)常用于研究DNA-蛋白质间的相互作用。 酵母单杂交体系可识别稳定结合于DNA上的蛋白质，可在酵母细胞内研究 ...

相关专题 酵母双杂交技术专题 最近在做龙须菜高温胁迫表达cDNA文库的构建，选择的是CaM做诱饵质粒构建表达载体pGBKT-CaM，利用SMART技术将重组质粒转化到酵母菌Y187中，搜集了部分资料找到了一份比较全的酵母双杂交实验操作步骤。 一.酵母双杂交系统的原理 酵母的转录激活因子GAL4由两个可以分开的、功能上相互独立的结构域(doma ...

相关专题 近年来，绿色荧光蛋白的研究越来越受到科研工作者的重视和看好，相关的成果不断见诸各个期刊。今年头中科院生物物理所就联合北京大学通过实验获得了一系列的绿色荧光蛋白。那么，绿色荧光蛋白的前世今生有怎样的故事呢? 2008年10月8日，诺贝尔化学奖揭晓。日本科学家下村修、美国科学家马丁•查尔非和钱永健因发现和改造绿色荧光蛋白(G ...

相关专题 生命科学领域发生的革命性变化，对生命活动的研究正在从传统的还原式研究转向了整体性的研究——以基因组学(功能基因组学)和蛋白质组学为基础的系统生物学。其中蛋白质组学包括表达蛋白质组学(expression proteomics)、结构蛋白质组学(structural proteomics)和功能基因组学(functional pro ...

相关专题 随着生物技术的发展，蛋白质与基因之间的互作逐渐成为科研人员的关注热点，染色免疫沉淀技术由此而生，并被应用到各个科研领域当中。本文聚焦染色质免疫沉淀技术的原理、应用和抗体选择等问题，让您对其有更全面的了解和认识。 随着人类基因组测序工作的基本完成，功能基因组学的研究逐渐成为研究的热点。而基因表达的调控又是功能基因组学的一个重要研究领 ...

相关专题 免疫沉淀(IP)是一种利用的抗原抗体反应的原则，确定具体反应中混合物的抗体蛋白数量及具体物理特性的方法。而免疫共沉淀(Co-IP) 则作为分析蛋白质间的相互作用而被广泛认知。下面是这两种实验方法的具体操作步骤。 Steps of IP: 1. Form the antigen-antibody complex (immune co ...

相关专题 颇尔公司(Pall Corporation)于1946年由颇尔博士(Dr. David B Pall)创建于美国纽约，是目前世界上最大的专注于过滤、分离、纯化技术及产品研制的跨国公司。现在，颇尔公司在层析技术上投入大量的研发力量，通过不断的技术创新，开创性地研制出了众多高性能的层析介质，同时在层析预装柱和层析系统方面也更注重客户的 ...

相关专题 蛋白组学研究是建立在蛋白定量的基础上的，蛋白质快速定量主要原理是依据蛋白自身的发色基团或者和显色试剂间反应物的紫外吸收值来进行定量的，蛋白定量最常用的方法主要有BCA法、考马斯亮蓝法、以及lowry法，目前蛋白定量也有利用荧光法进行蛋白定量实验。 蛋白质含量通常采用氨基酸分析法、凯氏定氮法、比色法、紫外分光光度法等进行测定。蛋白质 ...

相关专题 western blot中膜的选择是实验成功的关键点，Western blot实验中一般可以选择硝酸纤维膜(NC) 和PVDF膜，那NC膜和PVDF膜有什么区别呢?怎样才能选择最恰当的杂交膜进行Western blot实验呢? NC膜 PVDF膜 尼龙膜的特点 解答：尼龙膜是较理想的核酸固相支持物，有多种类型;硝酸纤维素膜(NC膜 ...

相关专题 一、材料与仪器 30%丙烯酰胺溶液;1.5mol/L Tris-HCl分离胶缓冲液，pH8.8;1.0mol/L Tris-HCl浓缩胶缓冲液，pH6.8;电泳缓冲液，pH8.3;10%SDS溶液;10%过硫酸铵溶液;样品处理液;染色液;脱色液;电泳玻璃板，电泳电源架，电泳槽，电泳仪等;蛋白Mark。 二、方法与步骤 1)分离胶和 ...

相关专题 蛋白表达技术全攻略 New England Biolabs在实验室工作时间较长的人都不会陌生特别是海归派.成立于上个世纪七十年代中期NEB是当今全球限制性内切酶最重要的供应商超过 30%已知的限制性内切酶是首先在NEB发现的.NEB供应的限制型内切酶种类足有210多种也是最多的(目前仅有少数几个被其他公司专利的内切酶 NEB不提供比 ...

相关专题 蛋白表达技术全攻略 甲醇酵母表达系统有不少优点，其中以Invitrogen公司的Pichia酵母表达系统最为人熟知，并广泛应用于外源蛋白的表达。虽然说酵母表达操作简单表达量高，但是在实际操作中，并不是每个外源基因都能顺利得到高表达的。不少人在操作中会遇到这样那样的问题，收集了部分用户在使用EasySelect Pichia Expr ...

相关专题 蛋白表达技术全攻略 在原核蛋白表达过程中选择构建一个合适原核表达体系需要综合考虑3大因素：表达载体、宿主菌株、表达诱导条件以获得最满意的表达效果.事实上在平时的实验中最容易被忽视的就是宿主菌的选择――多数人会直接选择自己实验室曾经用过的表达菌株或者是载体配套的菌株而不去追究原因――即使表达结果不佳大多在表达条件和载体上找原因也不会考 ...

相关专题 蛋白表达技术全攻略 研究者们在分离到某一基因后要对其编码蛋白质进行研究最理所当然的工作就是表达――即：有目的性地合成外源基因产物.在重组DNA技术的发展早期人们认为在基因的前面有一个强启动子和一个起始密码子就足以在大肠杆菌中获得很好的表达.随后认识到获得有效的翻译所需的条件要复杂得多除了要有强启动子和起始密码子外良好的表达尚需编码目 ...