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人钙调蛋白(CaM)酶联免疫分析

人钙调蛋白(CaM)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中钙调蛋白(CaM)的含量。实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人钙调蛋白(CaM)水平。用纯化的人钙调蛋白(CaM)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入钙调蛋白(CaM)抗原,再与HRP标记的钙调蛋白(CaM)抗体结合,形成抗体-抗原-酶 ...

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人钙调蛋白(CaM)酶联免疫分析

人钙调蛋白(CaM)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中钙调蛋白(CaM)的含量。实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人钙调蛋白(CaM)水平。用纯化的人钙调蛋白(CaM)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入钙调蛋白(CaM)抗原,再与HRP标记的钙调蛋白(CaM)抗体结合,形成抗体-抗原-酶 ...

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猪免疫球蛋白G2a(IgG2a)酶联免疫分析(ELISA)

猪免疫球蛋白G2a(IgG2a)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定猪血清,血浆及相关液体样本中免疫球蛋白G2a(IgG2a)的含量。实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中猪免疫球蛋白G2a(IgG2a)水平。用纯化的猪IgG2a(IgG2a)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入人免疫球蛋白G2a(IgG2a), ...

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猪免疫球蛋白G2a(IgG2a)酶联免疫分析(ELISA)

猪免疫球蛋白G2a(IgG2a)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定猪血清,血浆及相关液体样本中免疫球蛋白G2a(IgG2a)的含量。实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中猪免疫球蛋白G2a(IgG2a)水平。用纯化的猪IgG2a(IgG2a)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入人免疫球蛋白G2a(IgG2a), ...

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包涵体表达的蛋白的复性包涵体表达的蛋白的复性

相关专题 蛋白的复性是一个世界性的难题,没有通用的方法,甚至没有靠得住的规律,只能试。可以参考以下文章。该文出处已经忘了,如果有人知道原创作者或网上出处,请补充。包涵体表达的蛋白的复性包涵体表达的蛋白的复性包涵体:包涵体是指细菌表达的蛋白在细胞内凝集,形成无活性的固体颗粒。包涵体的组成与特性:一般含有50%以上的重组蛋白,其余为核糖体元件、R ...

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盐析法纯化免疫球蛋白

相关专题 (一) 原理   蛋白质在水溶液中的溶解度是由蛋白质周围亲水基团与水形成水化膜的程度,以及蛋白质分子带有电荷的情况决定的。当用中性盐加入蛋白质溶液,中性盐对水分子的亲和力大于蛋白质,于是蛋白质分子周围的水化膜层减弱乃至消失。同时,中性盐加入蛋白质溶液后,由于离子强度发生改变,蛋白质表面电荷大量被中和,更加导致蛋白溶解度降低,使蛋白质 ...

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无蛋白培养基与限定化学成分培养基

相关专题 一、无蛋白培养基(protein free midiumPFM):即不含有动物蛋白的培养基。无血清培养基仍含有较多的动物蛋白,如胰岛素,转铁蛋白、牛血清白蛋白等。从生物技术发展的趋势来看,不含动物蛋白的培养基又广泛的应用前景,许多利用基因工程技术重组的蛋白质最终要应用于人体,如果再生长过程中使用了含有动物蛋白质的培养基,纯化过程就比 ...

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紫外吸收法

相关专题 蛋白质分子中,酪氨酸、苯丙氨酸和色氨酸残基的苯环含有共轭双键,使蛋白质具有吸收紫外光的性质。吸收高峰在280nm处,其吸光度(即光密度值)与蛋白质含量成正比。此外,蛋白质溶液在238nm的光吸收值与肽键含量成正比。利用一定波长下,蛋白质溶液的光吸收值与蛋白质浓度的正比关系,可以进行蛋白质含量的测定。紫外吸收法简便、灵敏、快速,不消耗 ...

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蛋白质提取与纯化技术

相关专题 选择材料及预处理   以蛋白质和结构与功能为基础,从分子水平上认识生命现象,已经成为现代生物学发展的主要方向,研究蛋白质,首先要得到高度纯化并具有生物活性的目的物质。蛋白质的制备工作涉及物理、化学和生物等各方面知识,但基本原理不外乎两方面。一是得用混合物中几个组分分配率的差别,把它们分配到可用机械方法分离的两个或几个物相中,如盐析, ...

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植物组织蛋白质提取方法

相关专题 1、植物组织蛋白质提取方法 1、根据样品重量(1g样品加入3.5ml提取液,可根据材料不同适当加入),准备提取液放在冰上。2、把样品放在研钵中用液氮研磨,研磨后加入提取液中在冰上静置(3-4小时)。3、用离心机离心8000rpm40min4℃或11100rpm20min4℃4、提取上清夜,样品制备完成。蛋白质提取液:300ml1、1 ...

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蛋白质提取的方法总汇

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蛋白质印迹分析(Western Blot Analysis)

相关专题 【实验目的】 了解蛋白质印迹法的基本原理及其操作和应用。 【实验原理】 蛋白质印迹法又称为免疫印迹法,这是一种可以检测固定在固相载体上蛋白质的免疫化学技术方法。待测蛋白既可以是粗提物也可以经过一定的分离和纯化另外这项技术的应用需要利用待测蛋白的单克隆或多克隆抗体进行识别。 如图所示,可溶性抗原,也就是待测蛋白首先要根据其性质,如分子 ...

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碱性磷酸单酯酶的分离、纯化实验

相关专题 本实验作为“大肠杆菌碱性磷酸单脂酶基因克隆、表达”的下游实验,通过对重组基因表达后的基因蛋白碱性磷酸单酯酶的提取、分离与纯化的实验操作,了解所涉及的生化技术中提取(细胞破碎)、分离(离心、盐析、过滤等)、复性(包涵体)、层析(凝胶与离子交换层析)、浓缩,与酶蛋白含量和酶活力检测、电泳鉴定及其相关的生物制备与分析的系列操作技术,并结合 ...

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Western转印的优化

相关专题 从SDS凝胶中进行Western蛋白转印的优化需要对一系列参数进行考虑。目的是转印所有凝胶上的蛋白并将其定量地转移到转印膜上。进行高效转印需要一定程度的优化,尤其是对于大分子量和小分子量蛋白。 转印后,凝胶上应不残留或残留很少的蛋白。可以在转印后进行染色进行检测。转移出凝胶的蛋白应该仅在接触凝胶的膜的一面可见。如果有怀疑,在转印时使 ...

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重组蛋白在E.coli中表达及纯化

相关专题 一. 实验目的1. 掌握重组蛋白诱导表达的方法;2. 亲和层析法纯化His 标记的融合蛋白二. 实验原理将目的基因连接在表达载体后,通过加入诱导剂IPTG诱导目的基因表达。表达载体除具有蛋白表达所需要的启动子外,在终止子前有6个His编码序列,便于蛋白的亲和层析纯化。亲和层析以蛋白质或生物大分子和结合在介质上的配基间的特异亲和力为基 ...

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DEAE—离子交换剂纯化血清IgG

相关专题 (一)原理 离子交换是指液相中的离子与固定相上可解离基团的可逆交换反应。利用这个反应先将要分离的混合物在一定pH的溶液中解离,而后流经固定相,使之与固定相上的可解离基团进行离子交换,吸附于固定相上,凡不能进行交换吸附的成分,则流出层析柱外。再根据交换吸附于固定相上的各组分解离度的差别,运用不同的pH值或不同盐浓度的溶液作流动相,流过 ...

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蛋白质组学入门问题FAQ

相关专题 常见问题——— HPLC 篇 1 . HPLC 灵敏度不够的主要原因及解决办法 样品量不足:解决办法为增加样品量 样品未从柱子中流出:可根据样品的化学性质改变流动相或柱子 样品与检测器不匹配:根据样品化学性质调整波长或改换检测器 检测器衰减太多:调整衰减即可。 检测器时间常数太大:解决办法为降低时间参数 检测器池窗污染:解决办法为清 ...

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蛋白质组鉴定技术

相关专题 如果目前分离蛋白质组的最好技术是2-DE,那么随之而来的挑战是数百数千个蛋白如何被鉴定. 在这里,我们不考虑传统的蛋白鉴定方法,如免疫印迹法、内肽的化学测序、已知或未知蛋白的comigration分析,或者在一个有机体中有意义的基因的过表达. 并不是因为这些方法无效,而是因为它们通常耗时、耗力,不适合高流通量的筛选. 目前,所选用的 ...

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酪蛋白的提取

相关专题 一、实验目的1、掌握一种提取蛋白的方法。2、掌握一种检测牛乳质量的方法。二、 实验原理酪蛋白是乳蛋白质中最丰富的一类蛋白质,约占乳蛋白的80~82%,酪蛋白不是单一的蛋白质,是一类含磷的复合蛋白质混合物,以一磷酸酯键与苏氨酸及丝氨酸的羟基相结合。它还含有胱氨酸和蛋氨酸这两种含硫氨基酸,但不含半胱氨酸。它在牛乳中的含量约为35g/L, ...

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植物叶蛋白的提取

相关专题 一、实验目的熟悉植物叶蛋白的几种提取原理和方法,了解其意义及其应用价值。二、实验原理植物叶蛋白或称绿色蛋白浓缩物(leaf protein concentration,简称LPC),是从新鲜植物叶片中提取的高质量浓缩蛋白质,不仅是畜禽生长发育和生产畜产品的主要营养物质,而且目前也正成为人类的保健营养理想食品之一。天然蛋白存在于为数甚 ...

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