蛋白质技术

相关专题 生物学离心机 实验室离心机离心管种类有多种。 1、按材质可分：塑料离心管、玻璃离心管和不锈钢离心管等。 2、按速度可分：低速离心管和高速离心管。 3、按容量可分：微量离心管、小容量离心管和大容量离心管。一般称容量大于100mL的离心管为离心瓶。 4、按离心管口部形状可分：缩口离心管和直口离心管。 5、按离心管底部形状可分：圆底离心管、尖底离心管和平底离心管。 6、按离心管与盖接合形式可分：摁盖离心管和螺口离心管。 7、按用途可分：制备型离心管和分 ...

相关专题 紫外可见分光光度计讲座 分光光度计是实验室检测核酸或者蛋白样品浓度最常用的工具之一。仪器使用频繁，但甚少见到有人维护。其实，保持分光光度计清洁、无污染是成功操作的关键。Jessica Geisler博士是eppendorf北美地区负责PCR、检测和细胞技术的产品经理。她为我们介绍了一些仪器维护的经验。 清洁仪器 我们应该用蘸有中性清洁剂的软布擦拭分光光度计的表面。刺激性的清洁剂可能会损坏仪器表面。你也可以清洁比色皿本身 ...

相关专题 蛋白质的结构与功能作用蛋白纯化技术专题 一、蛋白质盐析分离的原理： 蛋白质在稀盐溶液中溶解度会随着盐浓度的增大而上升(盐溶)，当盐浓度增大到一定数值时，其溶解度又逐渐下降直至蛋白质析出。盐析的发生是由于盐浓度增大到一定数值时使水活性降低，导致蛋白质分子表面电荷逐渐被中和，水化膜逐渐被破坏，引起蛋白质分子之间相互聚集并从溶液中析出，最后经离心机分离后获得沉淀物和上清液。 二、影响蛋白质盐析分离的因素： 1、蛋白质浓度： 蛋白质浓 ...

相关专题 应用优势 ■ 改善蛋白质识别，增加蛋白质组覆盖范围 ■ 即使在极低浓度下也能实现可靠鉴定 ■ 更有效地进行LC/MS/MS分析从而加快决策过程 简介 随着自下而上(bottom-up)蛋白质组学分析的复杂性不断增加，对于质谱仪的能力提出了挑战，其需要生成更多的详细信息才能满足用户的需要。近年来，质谱仪的速度、灵敏度和质量数准确性都有了显著的提高，可获得更好的数据质量、改善的肽序列标注以及更准确的鉴定结果。 随着硬件性能的改善，我们开发出一系 ...

Large scale nuclear extract preparationHattoti's protocol adapted to cell culture:Hattori M, Tugores A, Veloz L, Karin M, Brenner D (1990) A simplified method for the preparation of transcrip-tionally active liver nuclear extracts. DNA Cell Biol. Vol. 10, P.777�781I. Homogenize cells or t ...

Upstate公司在世界上最先开发出步骤优化简洁的商业化ChIP分析试剂盒，保证实验的准确性和可重复性，同时Upstate提供广泛可行的ChIP级别应用抗体。ChIP基本试剂盒和特定蛋白质ChIP级别应用抗体结合完成一个完整的染色质免疫沉淀分析。在过去的数年中，Upstate提供的ChIP分析试剂盒和ChIP级别应用抗体得到了全世界科学家的认可，文献应用极为广泛。Upstate最新推出EZ Chip™（ cata ...

Author InformationPrimary AuthorChi-Wei Lee ( tom.lee1964@msa.hinet.net ) AffiliationChang Gung University , TaiwanCo-Author(s)Yu-Chin Chen (Graduate Institute of Chemistry, National Sun-Yat Sen University, Taiwan. Email: b8722035@student.nsysu.edu.tw) Prot ...

蛋白质组学 肽类在线 蛋白质组学 哈佛蛋白质组学 生物大分子3D结构/PDB 球蛋白数据库 Protein Structure Database 北大蛋白质数据库 PIR蛋白质序列数据库 中国分布计算之蛋白折叠 Proteome Biokownlege 蛋白质晶体论坛 中科院蛋白质科学研究平台 上海生科院蛋白质组分析中心

本文根据华东理工大学生物工程学院的酶工程课件整理而成一、实验流程二、实验安排 第1次菌体超声破壁、离心、包涵体复性、装离子交换柱 第2次测酶活、定蛋白离子交换层析 层析样品进行浓缩、透析 第3次浓缩、透析前、后样品测活、定蛋白 装分子筛柱 第4次分子筛层析，并对收集样品进行测活、定蛋白等 第5次对分离纯化各样品进行蛋白电泳分析，并绘出分离纯化表三、实验操作 第1次：菌体超声破壁、离心、包涵体复性、装离子交换柱 实验顺序：超声破壁→离心→装离子交换柱→平衡 ...

随着 cDNA 微阵列和寡核苷酸芯片（下文没有特别说明时，统称为 DNA 微阵列）等高通量检测技术的发展，我们可以从全基因组水平定量或定性检测基因转录产物 mRNA 。在本章中，基因表达数据特指基于 DNA 微阵列实验得到的反映 mRNA 丰度的数据，而不包括基因表达最终产物――蛋白质丰度的数据。由于生物体中的细胞种类繁多，同时基因表达具有时空特异性，因此，基因表达数据与基因组数据相比，要更为复杂，数据量更大，数据的增长速度更快。基因表达数据中蕴含着基 ...

用于检测基因表达水平的 DNA 微阵列实验，应用之一是比较实验，目的是比较两个条件下的基因表达差异，从中识别出与条件相关的特异性基因，例如，识别可用于肿瘤分型的特异基因等。为了提高实验的可靠性，对于同一样本，往往有两次或更多次的重复实验，但是，由于 DNA 微阵列的费用仍然很昂贵，不可能重复足够多的次数来满足实验数据分析的要求，因此需要采用统计方法来分析这些数据。对于这些表达数据的分析，目的就是要识别在两个条件下有显著表达差异 ...

对于基因表达谱数据的分析是生物信息学的研究热点和难点。转化为数学问题，分析任务是从数据矩阵 M 中找出显著性结构，结构类型包括全局模型 (model) 和局部模式 (pattern) 。对基因表达谱数据的分析是数据挖掘问题，所采用的方法包括通过可视化进行探索性数据分析（ Exploratory Data Analysis ）、描述建模 (descriptive modeling) 、分类、聚类、回归和机器学习等。 基因表达谱分析所采用的常用方法是聚类，其目的就是将 ...

在生物医学中，基于表达数据的肿瘤分型诊断是重要的应用领域。 1999 年， Golub 等人的研究证明了肿瘤亚型之间在基因表达上的差异，通过对一组特异基因的表达检测，可以进行临床诊断，并指导治疗方案的制定。随后，很多研究组开展了用 DNA 微阵列检测基因表达用于肿瘤诊断的研究，所涉及的肿瘤包括白血病、乳腺癌、肺癌、结肠癌等，有些工作已应用于临床实践。在这些研究中，根据表达数据对样本进行肿瘤亚型分类成为生物信息学的一项重要研究内容。分类是 ...

1• 边肇祺，张学工等 .2000 年 . 模式识别（第二版） . 清华大学出版社 . 北京 . 2• 傅京孙 . 1990 . 模式识别应用 . 北京大学出版社 . 北京 . 3• 陆汝钤 . 1996. 人工智能 . 科学出版社 . 北京 . 4• 徐克学 . 1999. 生物数学 . 科学技术出版社 . 5• Alizadeh AA, Eisen MB, Davis RE, Ma C, Lossos IS, Rosenwald A, Boldrick JC, Sabet H, Tran T, Yu X, Powell JI, Yang L, Marti GE, Moore T, Hudson J, Jr., Lu L, Lewis DB, Tibshirani R, Sherlock G, Chan WC, Greiner TC, Weisenburg ...

基因表达存在组织特异性、细胞周期特异性和外界信号的响应特异性等特性，这些特异性都是由细胞内复杂而有序的调控机制实现的。对基因表达调控机制的研究具有非常重要的理论和应用价值，研究的目的是要回答以下问题：在特定的细胞转态下，有哪些基因发生了表达？它们是通过何种方式被调控的？它们的表达量是多少？这些基因的产物对细胞的生理活动会产生什么影响？诸如这些问题的答案将揭示生命奥秘和指导临床实践，例如，可以通过测量基因的表达 ...

我想表达遇到的第一个瓶颈估计就是为什么我的外源片段插到载体里面，PCR鉴定没问题，双酶切也OK，可是就是不见表达。一般我们是如何判断没有表达呢？大多都是首先进行SDS-PAGE。在跑胶的时候一定要设对照，比较严谨的电泳对照，应该是：Marker，标准品阳性对照（如果有，且打算做Western的话），以及空白载体（诱导）和重组载体（不诱导）2个阴性对照，再加上诱导不同时间的表达结果。Marker用于判断条带大小，标准品用 ...

人们合成与生物相关的物质是从尿素开始的，1828年，德国化学家维勒人工合成了存在于生物体的这种有机物。在1960年我国科学家采用化学方法首次成功地合成了具有生物活性的蛋白质――胰岛素。随着内切酶的发现和基因工程技术的发展，人们发现用各种不同的载体在原核、真核系统中进行蛋白表达更为行之有效。而这其中大肠杆菌表达系统发展得最为迅速、成熟。原核表达具有操作方便、快捷，需时较短，表达量大，适合工业化生产等优点。虽然也有缺 ...

之所以首先介绍Novagen公司的产品是因为用过它的pET系列载体，感觉很好用。Novagen的母公司是德国默克（Merck）公司，它是国际著名的化学及制药公司总部位于德国的Darmstadt，已有300多年的历史。已在全世界55个主要国家设立了分公司，其中在28个国家建有62个生产基地。 Novagen公司出品的pET系列载体是目前应用最为广泛的原核表达系统，已经成功地在大肠杆菌中表达了各种各样的异源蛋白。p ...

Clontech公司最新推出的Living Colors Fluorescent Timer，是唯一一种能随着时间的延长而由绿色变为红色的的荧光蛋白报告基因。这种颜色可变的荧光蛋白为实时研究启动子的调控时效提供了可能：在活细胞或者活的生物体内，你不但可以看到某个启动子什么时候、在什么位置开始启动基因的表达，还可以观察到它什么时候关闭表达――这在以前是不可能实现的――而且由于这种报告基因是荧光蛋白，这种监测可以直接进行而 ...

METHOD for Western Blots:While your SDS-PAGE gel is running, make your transfer buffer and chill to 4°C. Check that you have a frozen buffer dam is ready (stored in freezer next to Shikha, top shelf to the right side--looks like rectangular white plastic cup --should be full of ice). Precut 3MM filter paper to s ...