蛋白质技术

Western Blot一．配胶1．注意一定要将玻璃板洗净，最后用ddH2O冲洗，将与胶接触的一面向下倾斜置于干净的纸巾晾干。2．分离胶及浓缩胶均可事先配好（除AP及TEMED外），过滤后作为储存液避光存放于4℃，可至少存放1个月，临用前取出室温平衡（否则凝胶过程产生的热量会使低温时溶解于储存液中的气体析出而导致气泡，有条件者可真空抽吸3分钟），加入10%AP（0.7~0.8:100, 分离胶浓度越高AP浓度越低，15%的分离胶 ...

刚开始做,希望多认识几个朋友,做了好几次,都没有出来结果,请多指点Gel Recipe6.6 g Urea1.59 ml Acrylamide/Bis (28.38g:1.62g to 100ml)2.4 ml10% Triton X-1000.48 mlampholyte pH5-80.12 mlAmpholyte pH3-10 (optional)2.4 mlWater12 μlTEMED90 μl3% Ammonium PersulfateThis makes 12 ml total volume, enough to cast two pieces of slab gel (OCEAN mini gel system). Degas the solution before addition of ammonium persulfate.Sample buffer (2X)9.5 M urea5.7 g2.0% Triton X-1002.0 ml 10% Triton X-1005% 2-Mercaptoethanol0.5 ml1.6% Ampholyte(pH 5-8)

FRET (FluorescenceResonance Energy Transfer)荧光共振能量转移是距离依赖的dipole-dipole反应，能量从起始被激发的工体分子转移到受体分子不产生任何光子。FRET多肽是标记着供体分子和受体分子（淬灭基团）的多肽。在大多情况下供体和受体对是两个不同的染料。如果受体分子是非荧光物质（淬灭基团）从荧光供体转移的能量被转变成分子共振。当FRET被终止时（将供体受体分开），可以检测到 ...

1材料和试剂:1.1.1包被液:碳酸盐缓冲液，PH9.61.1. 2洗涤液:PBS-Tween20,PH7.41.1.3稀释液:0.5%BSA-PBS-Tween20,PH7.41.1.4底物缓冲液:柠檬酸-磷酸盐缓冲液,PH5.01.1.5底物液:邻苯二胺8mg溶于底物缓冲液20ml,30%H2O230ul1.1.6终止液:1mol/LH2SO41.1.7兔抗大肠杆菌抗体1.1.8 HRP酶联兔抗大肠杆菌抗体1.1.9菌体蛋白标准:中国药品生物 ...

Volume 101 : Mycobacteria ProtocolsProduct Detailspages: 472 pagesPublisher: Humana PressISBN: 0896034712Average Customer Review: Based on 1 review(s).Format: PDFSize:Supplier: AmazonSummary:http://rapidshare.com/files/9945470/..._1998_MMB_.rarPass ...

Principles of Protein X-Ray CrystallographyBy Jan DrenthPublisher: SpringerNumber Of Pages: 332Publication Date: 2006-11-09Sales Rank: 195069ISBN / ASIN: 0387333347EAN: 9780387333342Binding: HardcoverManufacturer: SpringerStudio: SpringerAverage Rati ...

生物质谱技术帮助发现精神分裂症特征蛋白 (2006-12-28 9:34:47,新闻来源：人民网)日前，四川泸州医学院附属医院硕士研究生姜伟，在导师王开正教授指导下，利用表面增强激光解析电离飞行时间质谱技术，发现了一组对精神分裂症的早期预警、鉴别诊断、治疗观察具有重要意义的蛋白标志物。　　目前鉴别诊断精神分裂症缺乏有效的病理学、影像学和实验诊断依据，也缺乏客观的检查指标用于早期诊断，这也是造成对某些精神分裂症的评定产生分歧、鉴定 ...

蛋白质的一级、二级、三级和四级结构决定了它的物理、化学、生物化学、物理化学和生物学性质，综述了不同蛋白质之间的性质存在差异或者改变条件是使之具有差异，利用一种同时多种性质差异，在兼顾收率和纯度的情况下，选择蛋白质提纯的方法。蛋白质在组织或细胞中一般都是以复杂的混合物形式存在，每种类型的细胞都含有成千种不同的蛋白质。蛋白质的分离和提纯工作是一项艰巨而繁重的任务，到目前为止，还没有一个单独的或一套现成的方法能把任何 ...

Comparison of affinity tags for protein purificationAffinity tags are highly efficient tools for purifying proteins from crude extracts. To facilitate the selection of Affinity tags for purifiation projects, we have compared the efficiency of eight elutable Affinity tags to puri ...

大家好，为了增进跟各位老师和同学之间的学术交流，我们做了个月刊，这是第一期，以后每个月都有，内容涵盖了近期代谢组学的发展、新技术介绍、实用小技巧分享等多个方面，希望能为大家带来一些帮助！同时，也欢迎各位积极发言，如果有什么是您想跟大家分享或是想要了解更多的方面，请将信息反馈给我们，谢谢！ Ⅰ、新技术介绍——ADEMA：一种新的预测分类的方法Ⅱ、如何从SIMCA-P中导出scoreplot等分析图的数据？Ⅲ、2013年03月精品文献1、Comprehensive Analysis ofLC/MS Data Using Pseudocolor Plots2、Evaluation and optimizationof metabolome sample preparation methods for saccharomyces cerevisiae3、Metabolomic profiling as auseful tool for diagnosis and treatment of chronic disease: focus on obesity,diabetes and cardio

重组蛋白A在免疫试剂应用中的新进展广州精达公司-美国免疫学博士 胡勇摘要 抗体是免疫诊断试剂领域最重要的原料，蛋白A是纯化抗体最有效的工具，广泛用于免疫诊断试剂的许多领域。重组蛋白A具有产量大，成本低，纯度高，特异性好的优点。重组蛋白A的国产化将极大促进免疫诊断试剂的产品开发和市场效益。 关键词 抗体纯化 免疫诊断试剂 重组蛋白A 国产化蛋白A（Protein A）为金黄色葡萄球菌细胞壁蛋白，具有与人类和哺乳动物血液中免疫球蛋白IgG分子的Fc段特异性结合的能力，广泛应用于各种免疫诊断试剂的制备，包括抗体的检测和纯化、免疫细胞化学、病原体的快速诊断；蛋白A也可用于免疫吸附治疗领域。采用发酵、基因诱导、镍柱纯化生产的重组蛋白A使得其成本下降、纯度提高、特异性增强，已经成为免疫诊断试剂抗体制备中最重要的工具！目前，国外有2-3家蛋白A的产品在中国销售，但价格昂贵；国内已有数家公司开展了蛋白A 的克隆或表达，其中，广州精达公司采用美国克隆和生产工艺，顺利的完成了该种产品的国产化。I、蛋白A的应用范围1、用于抗体的检测和纯化 由于蛋白A与IgG具有特异性结合

【我们实验室的SDS-PAGE改良集锦】蛋白SDS-PAGE电泳及定量在《蛋白质技术手册》基础上，根据实验条件的方便修改。请仔细看各种细节改良，各种操作效果经本实验室5年验证。【一】 储存液配制（均4℃冰箱保存，用完放回）（1）2 M Tris-HCl (实测pH 8.9±0.1，25℃) 500 mL：121 g Tris base加350 mL双蒸水溶解，以玻璃棒搅拌约1 min，缓慢加入浓盐酸（11.8 M）20 mL，继续搅拌均匀，并使Tris全部溶解，溶液澄清，加入适量双蒸水至500 mL，倒入无色玻璃试剂瓶中，4℃冰箱保存。（2）100 g/L SDS 溶液： 10 g SDS （要求高纯度，其质量明显影响电泳效果）加100 mL双蒸水，于洁净的250 mL烧杯中进行微波加热溶解，注意不要爆沸，间歇用玻璃棒搅拌以加速溶解，完全溶解后的溶液应清澈透明无色。倒入无色玻璃试剂瓶中，4℃冰箱保存。冰箱取出后可微波加热促进储存液的溶化。（3）75%（v/v）甘油：于500 mL量筒中倒入分析纯甘油300 mL，加双蒸水100 mL，以一次性塑料手套封口，颠倒量筒使甘油完全溶解，然后倒

蛋白质纯化－人人都会用到的实用技术研究的最后还是要看基因表达产物,无论是用于检测还是用于棉衣保护,都需要将表达出的蛋白质分离和纯化,然而蛋白质性质各异,故纯化方法不同,现共享一些基本的纯化方法,以飨读者:蛋白质的一级、二级、三级和四级结构决定了它的物理、化学、生物化学、物理化学和生物学性质，综述了不同蛋白质之间的性质存在差异或者改变条件是使之具有差异，利用一种同时多种性质差异，在兼顾收率和纯度的情况下，选择蛋白质 ...

转自：生物探索 http://www.biodiscover.com/news/proteomics.html背景：在有丝分裂过程中，染色体在凝缩蛋白作用下变得紧凑和僵硬。已知这种蛋白在染色体臂和着丝点上的作用机制不同，但还不清楚它是怎样定位到这些区域的。研究结论：Tada等人发现，着丝点蛋白 Monopolin 是着丝点凝缩蛋白的一个招募者(recruiter),此外，Aurora B激酶的磷酸化作用促进凝缩蛋白与某些组蛋白的结合 ...

我搞的是光合作用中的蛋白质。现在大家似乎都乐意去研究最前沿、最热门的东西，如干细胞、信号转导、神经生物学、细胞分化及衰老等，而基础研究受到了大家的冷落。光合作用是绿色植物、藻类和某些光合细菌在光照下将光能转化为化学能，并利用二氧化碳和水等无机物合成有机物同时释放氧气的过程，是地球上最重要的化学反应。光合作用在叶绿体上进行，包括光反应和暗反应两个过程，其中光反应是由光系统I（photosystem I，PSI）和光系统 ...

各位同学，本人前些日子做了脂肪氧化酶活性测定的工作，遇到了一些问题，想在这里向大家请教，希望大家能不吝赐教，来帮助我解脱心中的迷惑。本人是做植物材料的，从叶片中提取粗蛋白，0.5g叶片使用液氮研磨，加入到4ml冰预冷提取缓冲液（0.05mol/L PH6.4 磷酸钠缓冲液，1mmol/L EDTA，1%PVP，1mmol/LDTT）中，12，000g，4℃离心10min，取上清进行脂肪氧化酶酶活性分析。通过检测234nm光吸收（Beck ...

/biology/UploadFiles/201203/2012032221433145.jpg左边是鼠尾草、右侧是鼠尾草活性成分salvinorin A与阿片受体结合在分子水平上，像salvinorin A（致幻植物鼠尾草的活性成分）等*通过激活大脑和身体中某些特定的蛋白质（受体）发挥作用。Salvinorin A是天然的致幻剂，它之所以不寻常是因为它只与人类大脑中一个受体相互作用，这个受体就是阿片受体（kappa opio ...

比色杯比色杯也叫样品池，吸收器或比色皿，用来盛溶液，各个杯子壁厚度等规格应尽可能完全相等，否则将产生测定误差。玻璃比色杯只适用于可见光区，在紫外区测定时要用石英比色杯。不能用手指拿比色杯的光学面，用后要及时洗涤，可用温水或稀盐酸，乙醇以至铬酸洗液（浓酸中浸泡不要超过15分钟），表面只能用柔软的绒布或拭镜头纸擦净。比色杯按照材质大致分为石英杯、玻璃杯以及塑料杯。根据不同的测量体积，有比色杯和毛细比色杯等。一般测试核酸 ...

利钠素家族包括：心房钠尿肽(atrial natriuretic peptide ANP)、脑钠素(brain natriuretic peptide，BNP)、C型利钠素(c-type natriuretic pepdde，CNP)。利钠素家族是肾素-血管紧张素-醛固酮系统的天然拮抗剂，也抑制后叶加压素及交感神经的保钠、保水作用。ANP和BNP两者的作用相似，之前对利钠素与蛛网膜下腔出血(SAH)后的低血钠的关系做过较多的研究，但其与SAH的关 ...

Food Polysaccharides and Their Applications, Second Edition (Food Science and Technology)By Alistair M. Stephen, Glyn O. Phillips, Peter A. WilliamsPublisher: CRCNumber Of Pages: 752Publication Date: 2006-05-26ISBN-10 / ASIN: 0824759222ISBN-13 / EAN: 9780824759223Bindin ...