蛋白质技术

整理了一下十月份无人应助贴，以支持版主的工作已被锁、被扣分、标题为空以及不符合发贴格式的无人应助贴不在此列应助战友请到积分申诉区给出链接，谢谢【求助】我想求教一个关于WESTERN的问题http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=65&id=4772826&sty=1&tpg=7&age=0【求助】 请问有做pgap表达系统的么http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=65&id= ...

无需破坏胚胎，能够量身定做，没有排异反应，甚至可以克隆某年某月的某一天，脑子坏了，不再识字；从口腔刮点细胞，导进几个转录因子，变成干细胞；回种到脑子里，神经再生，突触再连，恍然大悟—原来这就是今夏炒得沸沸扬扬的诱导干细胞（induced pluripotent stem cell, iPS cells），为包括Nature在内的各大媒体竞相报道，为大大小小实验室人员广泛研究讨论，丁香园干细胞版亦有精华讨论【新进展】干细胞新进展－－成体细胞 ...

给大家分享一下做了两次itraq实验和分析后的一些经验，有什么说的不对的，请各路大神指教蛋白质组学中itraq数据一般来说做如下分析的比较多1.差异蛋白筛选 2.层次聚类分析 3.差异蛋白GO分类 4.差异蛋白pathway分析 5.差异蛋白互作网络构建我也只能简单介绍一下这些数据分析1.差异蛋白筛选，一般用到的两个值是foldchange值和p值，其中前者是表达量的倍数值，后者是学氏-T检验值，一般都是运用这个两个值来筛选的 ...

蛋白质的自述　我姓蛋，名白质。出生在核仁医院里，从小我就没有见过我的父母，据护士姐姐告诉我，我是由mRNA大叔和tRNA阿姨把我送进医院的，而我的父母DNA早在我还没有出生的时候就过世了，这在常理来说有点奇怪，可我们蛋氏家族向来如此。我的父母在死前留下了一串密码，用了家族的语言—核苷酸语，只有我们家族的人才能看懂，交给了mRNA叔叔：3个核苷酸编码就是一种氨基酸，tRNA阿姨就帮我找来了氨基酸，才让我得以诞生。我非常 ...

下面这个网站，大家可以看看。http://www.stcsm.gov.cn/learning/lesson/shengwu/20030211/lesson-1.asp第一课　概论　　一、蛋 白 质 组 学（Proteomics）　　90年代初期开始实施的人类基因组计划，在经过各国科学家近10年的努力下，已经取得了巨大的成就。不仅完成了十余种模式生物（从大肠杆菌、酿酒酵母到线虫）基因组全序列的测定工作，还有望在2003年提前完成人类所有基因的全序列测定。那 ...

在这个领域做了一段时间的工作了，下面根据个人经验，介绍几个“蛋白质表达”纯化相关的SCI/SCIE杂志，希望对新手能有所帮助。其实收载蛋白表达纯化的杂志有很多，只是看杂志主页的介绍，似乎多数biotech相关的杂志都是收载的，但实际上并非如此，很多杂志只要新蛋白，或者新技术，或者有别的特殊要求；而版上多数朋友的工作可能是应用相关的，研究没有好坏，杂志不分高低，只是在选择杂志时稍微用心一下，可能为后面的审稿及修稿省去 ...

来自 Research Laboratory for Biotechnology and Biochemistry ( RLABB)，不知道那个兄弟可以 翻译 一下：HOW DOES AN SDS PAGE GEL REALLY WORK? 06/06/2007The system most people use for separating proteins by gel electrophoresis was formulated by Laemmli (Nature 227:680-685 ). It is such a commonly used laborat ...

本人原创制作PDF，内容链接十分齐全，阅读十分便利。感谢墨尔本大学分子生物学实验室的网页内容。同时支持icesugar75 Frederic codegreen 三位版主的工作。（read MM ：chhualongdxy）ContentsIsolation of DNA fragments using glass milk (GENE-CLEAN) SOUTHERN BLOTSOUTHERN ANALYSIS OF MOUSE TOE/TAIL DNA Northern transfer p ...

实验一 蛋白质含量测定法本实验的目的是学会各种蛋白质含量的测定方法。了解各种测定方法的基本原理和优缺点。蛋白质含量测定法，是生物化学研究中最常用、最基本的分析方法之一。目前常用的有四种古老的经典方法，即定氮法，双缩尿法（Biuret法）、Folin－酚试剂法（Lowry法）和紫外吸收法。另外还有一种近十年才普遍使用起来的新的测定法，即考马斯亮蓝法（Bradford法）。其中Bradford法和Lowry法灵敏度最高，比 ...

我总结了一下：具体有几类，但有些问题想请教大家。1，由于很多蛋白有各自的特性，我们遇到需要检测磷酸化的时候，可以检索文献资料，看看是否有可靠的方法可选择。2，一些蛋白磷酸化后其生物学功能会发生改变，可以通过检测生物学功能的变化来间接检测其磷酸化是否发生。但是这个办法操作性很差，因为需要提取蛋白并且需要保证其活性，同时也需要一定量才可以达到可以检测到活性变化的水平。3，此外有非特异性的丝，酪氨酸磷酸化抗体，具体情形 ...

选择性阻止大脑中称之为11beta-HSD1的酶在实验中成功逆转了年老小鼠的记忆丧失， 在全球人口老龄化的背景下，这一研究成果将有深远的影响意义。—— Docofsoul Promising Drug Candidate Reverses Age-Related Memory Loss in MiceScienceDaily (Oct. 13, 2010) — Researchers at the University of Edinburgh report a new experimental compou ...

不记得是07还是08年我发过一个帖子，询问western淬灭的解决办法，至今，仍有站有私信我关于这个问题的解决办法。与其一个一个的回复，还是发个帖子，特别说明，帮助更多的朋友走出这个困扰。从私信我的站友的数量上看，western淬灭的现象还是挺普遍的。解决的办法其实非常简单，也常常有人提及，只是我们对这个改进有时不敢相信，或者没有做到相应的程度。呵呵，不卖关子了，下面就对荧光淬灭的现象形成和解决办法做一个详细的解 ...

在蛋白柱常见问题和日常维护分离时选择了合适的蛋白柱，有时往往不能成功地完成蛋白的分离，同一根蛋白分离柱在不同的使用者手中可能会有不同的柱寿命及分离效果，正确的使用蛋白柱和正确的日常维护是保证成功分离蛋白及延长柱寿命的关键。　　不论使用什么类型的蛋白柱，首先必须对其填料的性能有基本了解。如该柱适用什么样的溶剂，什么类型的样品，流速及耐压范围等，GAT提供的各种类型的蛋白柱，在柱箱内均有详细的说明书，使用柱子前，务必要 ...

小弟把最近一个多月来所做的工作，做了个总结，供大家一起分享，希望版主能加分，现在我还是0分，很多帖子不能阅览，希望版主加分，今后我实验有了新的进展，我会把总结发上来，和大家一起分享。我做的是GS115表达VEGF，目前已经做到阳性克隆的筛选这一步。待以后再次做了总结，再与大家分享。希望大家支持，绝对原创！！！一.实验材料1．菌珠E.coli DH5αGS115酵母菌2．质粒PIC9K/VEGF165重组质粒3．试剂NB酵母氮 ...

丁香园蛋白质技术讨论版公用邮箱正式开通＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝蛋白质技术讨论版目前的公共邮箱之供战友下载资料用，因此导致很多战友的大于300Kb的资料无处上传。鉴于此，特开通这个公共邮箱供广大战友上传以及下载资料用。帐号：dxy-protein@56.com空间大小：2G单个邮件附件上限：15M备份邮箱：backup-protein@56.com空间大小：2G单个邮件附件上限：15M1、上传 ...

为了响应ftp资源讨论版不再处理站友的上传申请而由各专业讨论版的版主负责的举措，现做出以下说明：1.有关蛋白质技术的资源希望通过ftp共享，请在本版 http://www.dxy.cn/bbs/post/page?bid=65&sty=1&age=0&s=493 发新帖申请，一般有五人以上需要后即发给上传密码。是否加分鼓励，由本版的版主根据情况决定。对于不易界定专业的资源，以及部分比较难得的精品，仍然在ftp资源讨论版发帖申请。2. ...

转自科学网论坛 Linxubo 点：free user 下载Molecular Biology Methods Bookshttp://rapidshare.com/files/58795488/201_Combinatorial_Library.pdfhttp://rapidshare.com/files/58796259/202_Thyroid_Hormone_Receptors.pdfhttp://rapidshare.com/files/587 ...

Proteomics in Practice: A Guide to Successful Experimental Design, 2nd, Completely Revised EditionShort descriptionStill the only concise practical guide, this edition combines the best features of a laboratory manual with a concise reference for successful experimental des ...

我最近两个月一直在做ECL western，非常困难，都快做疯了，有几条个人经验供参考，对改善困难的非特异带和背景应该会有帮助：1. 不要用平底小盒或杂交袋，用可以旋转的杂交管（可以用50ml塑料离心管做成），我刚刚得到了比较结果，效果大不一样。2. 膜在blocking前先用stripping buffer处理一下（当然也在杂交管中进行，注意要通过旋转使处理均匀）。我偶然发现经过该处理后背景异常干净。并且经多次重复后得出此经验。 ...

外源基因在宿主细胞中的高效表达1．有效的转录起始与基因的高效表达有效的转录起始是外源基因能否在宿主细胞中高效表达的关键性步骤之一，也可以说，转录起始的速率是基因表达的主要的限速步骤。因此，选择强的可调控的启动子及相关的调控序列，是组建一个高效表达载体首先要考虑的问题。最理想的强的可调控的启动子应该是：在发酵的早期阶段表达载体的启动子被紧紧地阻遏，这样可以避免出现表达载体不稳定，细胞生长缓慢或由于产物表达而引 ...