蛋白质技术

相关专题 电泳仪的使用方法和产品推荐电泳设备专题 1.首先用导线将电泳槽的两个电极与电泳仪的直流输出端联接，注意极性不要接反。 2.电泳仪电源开关调至关的位置，电压旋钮转到最小，根据工作需要选择稳压稳流方式及电压电流范围。 3.接通电源，缓缓旋转电压调节钮直到达到的所需电压为止，设定电泳终止时间，此时电泳即开始进行。 4.工作完毕后，应将各旋 ...

相关专题 电泳仪的使用方法和产品推荐电泳设备专题 本实验的目的是学习WEALTEC垂直电泳仪基本操作流程，确保垂直电泳仪正常运行。主要内容如下：灌胶、染色与脱色注意事项，详细方法如下： 一、 灌胶 1. 把制胶器放在平稳的台面上。 2. 保持制胶器干燥，抬起两侧的羽状开关放开卡门，平放，放进橡胶垫圈并紧扣。先把厚玻璃平板放入，再放两侧的垫片， ...

相关专题 电泳仪的使用方法和产品推荐电泳设备专题 Bio-Rad 提供完整系列的电泳仪以满足电泳技术最严格的要求。这些电泳仪轻便、编程简单，并经最严格的国际安全标准IEC1010-1 认证，以确保人员与环境的最高安全保证 。通过以下选购指南选择最适合你电泳需要的电泳仪。 更多信息，请访问： www.bio-rad.com/powersuppl ...

相关专题 电泳仪的使用方法和产品推荐电泳设备专题 小型常规低压电泳仪 AE-8135 Mypower 300 AE-8155 Mypower 500 AE-8135/55充分展示了ATTO在电子技术上的领先优势在保证最高性能的基础上体积极尽轻巧操作非常方便金属外壳尽显美观经典. 技术指标 名称•型号 AE-8135 AE-8155 ...

相关专题 Mini Protean 3 Cell小型垂直电泳简介： 凝胶数:1 或2玻板尺寸(W x L)短板10.1 x 7.3 cm间隔板10.1 x 8.2 cm凝胶大小(W x L) 手灌胶：8.3 x 7.3 cm; 预制胶： 8.6 x 6.8 cm典型上层缓冲液体积120 ml典型下层缓冲液体积180 ml典型SDS-Pag ...

相关专题 电泳仪的使用方法和产品推荐电泳设备专题 多特点： 技术先进，电路开发软件编写，完全拥有自主知识产权，保证产品的合法性。 品种齐全，选择余地大，满足你的基本需要和特殊诉求。 适用范围广，广泛应用于蛋白质电泳及转移，核酸电泳等应用领域。 改变传统的输入输出方式，采用开关电源 性能稳定可靠，使用寿命长。 电脑控制整个输出和反馈过程，精度高 ...

相关专题 蛋白表达技术全攻略 一、材料与仪器 30%丙烯酰胺溶液;1.5mol/L Tris-HCl分离胶缓冲液，PH8.8;1.0mol/L Tris-HCl浓缩胶缓冲液，PH6.8;电泳缓冲液，PH8.3;10%SDS溶液;10%过硫酸铵溶液;样品处理液;染色液;脱色液;电泳玻璃板，电泳电源架，电泳槽，电泳仪等;蛋白Mark。 二、方法与 ...

相关专题 1. 总的策略 ① 化学试剂纯度要高，至少是分析级，目前国产试剂达不到纯度要求 ② 使用去离子水(电导 2. 样品制备 ① 样品提取缓冲液(裂解缓冲液)必须新鲜配制。或者分装成 1ml，于-78℃冷冻保存， 裂解缓冲液一旦溶解不能再冷冻 ② 如有必要，在细胞裂解时加入蛋白酶抑制剂。注意：几种蛋白酶抑制剂在 DTT 或b-巯基乙醇存 ...

相关专题 1. 用 PDQuest软件或肉眼比对，找出感兴趣的蛋白点，并做好标记和记录。 2. 用 MilliQ水冲洗胶 2 次。 3. 用色谱纯甲醇和 MilliQ水冲洗 Ep 管 4. 将枪头(200μl)下端剪去，使其内径略小于蛋白斑点的直径，用色谱纯甲醇和MilliQ水冲洗枪头。 5. 对准斑点中央小心将蛋白切割下来，放入Ep ...

相关专题 水化上样( 被动上样) 1. 从冰箱中取出 IPG 胶条，室温放置 10min。 2. 沿水化盘槽的边缘从左向右线性加入样品，槽两端各 1cm 左右不加样，中间的样品液一定要连贯。注意：不要产生气泡，否则会影响胶条中蛋白质的分布。 3. 用镊子轻轻撕去 IPG 胶条上的保护层。注意：碱性端较脆弱，应小心操作。 4. 将IPG胶条胶 ...

相关专题 样品制备原则 样品制备是双向电泳中最关键的一步，将直接影响 2-DE 结果好坏。目前并 没有一个通用的样品制备方法，尽管处理方法多种多样，但都遵循几个基本的原则：1. 尽可能的提高样品蛋白的溶解度，抽提最大量的总蛋白，减少蛋白质的 损失;2. 减少对蛋白质的人为修饰;3. 破坏蛋白质与其他生物大分子的相互作 用，并使蛋白质处于完全 ...

相关专题 一、培养细胞(culture Cell)样品处理方法： 培养动物组织细胞由于没有细胞壁，因此可以将细胞收集下来，直接加入裂解缓冲液(Lysis buffer)抽提总蛋白。裂解缓冲液有多种配方，本实验室主要采用如下成份： 1. 7M Urea，2M Thiourea，4%(w/v)CHAPS，40mM Tris-Base，40mM ...

相关专题 【实验原理】 免疫电泳又称为γ球蛋白电泳或免疫球蛋白电泳技术，这是一种能够判断血液中三种免疫球蛋白IgM IgG IgA含量水平的实验方法。在这项实验技术中，首先利用蛋白质的分子量和所带电荷的比值运用水平琼脂糖凝胶电泳技术将蛋白质进行分离，然后将特异性的抗体引入到与电泳方向平行的凹槽中，在抗原和抗体的扩散过程中，抗原和 ...

相关专题 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS—PAGE)是蛋白分析中最经常使用的一种方法。它是将蛋白样品同离子型去垢剂十二烷基硫酸钠(SDS)以及巯基乙醇一起加热，使蛋白变性，多肽链内部的和肽链之间的二硫键被还原，肽链被打开。打开的肽链靠疏水作用与SDS结合而带负电荷，电泳时在电场作用下，肽链在凝胶中向正极迁移。不同的大小的肽链由于在迁移 ...

相关专题 原理：转移电泳是将经聚丙烯酰胺凝胶电泳分离出的蛋白质谱直接转移到硝酸纤维膜上，而形成固定相，并同时排除各种干扰物质，保持其天然构象和生物学活性，完成在凝胶中难以进行的各种生物试验。 材料 1.琼脂糖 2.丙烯酰胺 3.甲叉双丙烯酰胺 4.十二烷基磺酸钠(SDS) 5.硝酸纤维膜滤纸 孔径0.45μm 6.琼脂糖凝胶电泳缓冲液 ...

相关专题 【材料与试剂】 (1)2×SDS凝胶加样缓冲液 (2)聚丙烯酰胺凝胶电泳槽和电泳仪 (3)加样器和吸头等 (4)水浴锅 【操作方法】 (1) 把上述处理的样品按1:1(V/V)与2×SDS凝胶加样缓冲液混合，100℃加热3分钟，使蛋白质变性; (2) 取出变性蛋白质，立即放于冰上。样品如粘稠可进行超声对DNA进行剪切，以最大功率处 ...

相关专题 一、实验目的与原理 蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶中电泳时，它的迁移取决于它所带电荷以及分子大小和形状等因素。1967年Shapiro等人发现，如果在聚丙烯酰胺系统中加入阴离子去污剂十二烷基磺酸钠(SDS)，大多数蛋白质能与SDS按一定比例结合，即每克蛋白质结合1.4g的SDS-复合物都带上相同密度的负电荷，它的量大大超过了蛋白质分子原有 ...

相关专题 水平条纹的出现可能是第一向分离时(通常在IPG胶条上开展)出现问题。这篇文章着重讨论了垂直条纹，它是由第二向分离的相关问题引起的。垂直条纹不应与双向图中的垂直缺口或空白区域相混淆。 蛋白溶解度差 在第一向分离之后，所有蛋白移至它们的等电点，不携带净电荷。介质的离子强度也非常低，因为小的离子已经全部迁移出第一向胶条。在这些条件下，蛋 ...

相关专题 (一)原理 将放射性元素标记的抗体(或抗原)与相应的抗原(或抗体)沉淀时，沉淀线通过自显影而证实。所谓自显影，就是通过复合物中的标记同位素在蜕变过程中 放出的射线，作用于感光材料的卤化银晶体而产生潜影，再经过显影把“像”显示出来。这样，能检出肉眼看不见的沉淀线，从而提高反应的敏感性，这种方法可应 用于凝胶中的所有反应。 (二)材料 ...

相关专题 一、第一向等电聚焦 1. 从冰箱中取-20℃冷冻保存的水化上样缓冲液(I)(不含DTT，不含Bio-Lyte)一小管(1ml/管)，置室温溶解。 2. 在小管中加入0.01g DTT， Bio-Lyte 4-6、5-7各2.5ml，充分混匀。 3. 从小管中取出400ml水化上样缓冲液，加入100ml样品，充分混匀。 4. 从冰箱 ...