PCR技术

　　基因扩增技术（PCR）聚合酶链反应（polymerase chain reaction简称PCR）又称无细胞分子克隆系统或特异性DNA序列体外引物定向酶促扩增法

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山东大学荧光定量PCR对比实验结果

如何评判荧光定量试剂质量

百泰克undefinedSYBR real-time PCR premixture 进行动物组织样品的实时荧光定量PCR

qPCR中的P代表什么？Polymerase，聚合酶。如果qPCR少了聚合酶，没定量PCR还怎么做。下文就介绍了一种做法。

荧光定量PCR检测技术诞生至今已10多年的时间，而其应用一直都没广泛展开，究其原因，无外乎受制于相关仪器、试剂和技术的发展。近期，尤其是08年以来，仪器和试剂是遍地开花，这也使科研人员均跃跃欲试，都想借此技术使自己的研究能突飞猛进，发展势头通过查找每年所发表的文章数可一目了然。据有关统计，在 Medline 数据库中，用“Taqman” 或 ”real time PCR” 作为关键词检索，1996 年是19 篇，1999 年157 篇，到2003 年就高达2984 篇，2009年会是多少呢？

从菜鸟到高手—荧光定量qPCR手册 本文从real-time qPCR的发展史说起，包括real-time qPCR的原理，实验设计，实际操作（以ABI StepOne仪器，和北京百泰克生物技术有限公司的试剂为例），数据分析，常见问题五个方面，手把手教你从各个方面了解real-time qPCR，彻底从菜鸟到高手的飞跃。

PCR是分子生物学科研人员必做的实验，为了扩增目的基因，经常要对PCR的体系进行“摸条件”，特别是一些GC含量高的目的基因或者DNA纯度不高的样本! “摸条件”成为PCR实验最费时费力的工作！虽然市场上有很多PCR的MasterMix试剂，将酶、dNTP、反应缓冲液混合在一起，很方便客户的使用，但仅仅是简单的混合，极少公司对MIX的应用范围进行广泛的实验和优化，只能做一些不复杂的PCR。

由PCR发展出来的定量PCR技术，以专一性更高、可实时监控、可重复精确定量等优势而日益受到重视，越来越广泛应用于科研、检验、和诊断领域。其准确和快速的优势在各重要部门得到了广泛的采用。

LAMP,即：核酸环介导等温扩增技术。本文简要介绍了LAMP的原理及引物设计与实例。

HRM技术是high-resolution melting analysis即高分辨熔解曲线分析技术，是近年国外兴起的一种全新的突变扫描和基因分型的遗传分析方法。基于高效稳健的PCR技术，HRM不受突变碱基位点与类型局限，无需序列特异性探针，在PCR结束后直接运行高分辨熔解，即可完成对样品突变、单核苷酸多态性-SNP、甲基化、HLA配型等的分析。

cDNA末端快速扩增技术（rapid amplification of cDNA ends，RACE）是一种基于PCR从低丰度的转录本中快速扩增cDNA的5'和3'末端的有效方法，以其简单、快速、廉价等优势而受到越来越多的重视。

亚硫酸氢钠修饰DNA的目的是将DNA序列中未甲基化的胞嘧啶完全转化为尿嘧啶，而甲基化的5-甲基胞嘧啶保持不变。影响此过程的主要因素其中任何一个环节出现问题都将导致MSP扩增失败。

通过生动的图示，具体的详细的介绍引物设计软件的使用方法。

通过生动的图示，具体的详细的介绍引物设计软件的使用方法。

在实验室进行分子克隆实验时，经常需要合成大量的引物，而这些合成的引物首先要进行适当的稀释才能使用。正确的稀释方法，不仅能节约引物，防止引物失活，更能防止引物污染。

为了探讨HBV未分离成功的情况下研究HBV父儿传播途径的可行方法。方法：以巢式PCR检测HBV DNA与序列分析的方法比较父亲与胎儿所携HBV S区nt451-660段，C区nt2022-2321段序列的一致性。

PCR反应中，两条引物上的互补碱基相结合形成的聚合体，如果减肥或者避免引物二聚体，提高PCR扩增的效率，下面的文章给出了一些建议和方法。

免疫PCR（immuno polymerase chain reaction,IM-PCR）是1992年Sano建立的一种检测微量抗原的高灵敏度技术。其本质是一种以PCR扩增一段DNA报告分子代替酶反应来放大抗原抗体结合率的一种改良型ELISA。