PCR技术

规范发贴，否则删贴。谢谢合作。DNA疫苗1990年Wolff等在做小鼠基因治疗试验时偶然发现，将编码基因的质粒DNA直接注射入动物肌肉细胞内，能在动物体内表达抗原并诱导机体产生免疫应答。这一发现打开了通往新的免疫途径的大门。由于不加任何佐剂或载体，故又称裸DNA免疫。1994年在日内瓦召开的专题会议上将这种疫苗定名为核酸疫苗。核酸疫苗的出现或许将是疫苗发展史上的一次革命。核酸疫苗的含义，除DNA疫苗外，还包括 ...

枣庄市妇幼保健院招聘简章一、简介枣庄市，山东省四大直辖市之一，位于山东南部，在苏、鲁、皖三省交界处，东依沂蒙山，西频微山湖、南接两汉文化胜地徐州，北临孔孟之乡曲阜、邹城，地理位置优越，交通十分便利，素有“山东南大门”之称。枣庄市妇幼保健院位于交通便利、商业繁华的中心城区—市中区，医院建于1953年，隶属于枣庄市卫生局，是一所集医疗、预防、保健、教学、科研、社区服务为一体的三级甲等妇幼保健院。目前开放床位500余张，职工总数8 ...

来自复旦大学医学院医学分子病毒学重点实验室的研究人员发现，利用Talen技术剔除被感染细胞中的乙型肝炎病毒（HBV）可以作为一种治疗乙型肝炎的新策略。乙肝病毒感染会导致人类急、慢性乙型肝炎。据世界性卫生组织报道，全球约20亿人曾感染过乙肝病毒，其中3.5亿人为慢性乙肝病毒感染者，每年约有100万人死于乙肝病毒感染所致的肝衰竭、肝硬化和原发性肝癌（HCC）。目前治疗乙肝的药物主要是干扰素和核酸类似物，用于抑制乙肝 ...

PCR引物设计的11条黄金法则1.引物最好在模板cDNA的保守区内设计。DNA序列的保守区是通过物种间相似序列的比较确定的。在NCBI上搜索不同物种的同一基因，通过序列分析软件（比如DNAman）比对（Alignment），各基因相同的序列就是该基因的保守区。2.引物长度一般在15~30碱基之间。引物长度（primer length）常用的是18-27 bp，但不应大于38，因为过长会导致其延伸温度大于74℃，不适于Taq DNA ...

Publisher: Taylor & FrancisNumber Of Pages: 333Publication Date: 2006-06-13ISBN-10 / ASIN: 041537734XISBN-13 / EAN: 9780415377348Binding: Paperback--------------------------------------------------------------------------------Book Description:The BIOS Advanced Methods series is intended for ...

实时定量PCR完全手册方法简介所谓的实时荧光定量 PCR 就是 通过对 PCR 扩增反应中每一个循环产物荧光信号的实时检测从而实现对起始模板定量及定性的分析。在实时荧光定量 PCR 反应中，引入了一种荧光化学物质，随着 PCR 反应的进行，PCR 反应产物不断累计，荧光信号强度也等比例增加。每经过一个循环，收集一个荧光强度信号，这样我们就可以通过荧光强度变化监测产物量的变化，从而得到一条荧光扩增曲线。RT-qPCR是由三个步骤组成:1.反转录:依赖反 ...

Rt-PCR实验步骤一、实验器具与材料：1、移液枪：1ml、200μl、20μl、10μl、2μl2、吸头：1ml、200μl、20μl3、匀浆管：5ml4、吸头台：放置1ml吸头的一个，放置20μl吸头的一个5、EP管：1.5ml、0.2ml、100μl6、试剂瓶：2个60ml的棕色试剂瓶（广口，带盖）1个125ml的白色试剂瓶（放无水乙醇）7、量筒：50ml、250ml、500ml8、容量瓶：250ml、500ml、1000ml9、 ...

RT-PCR原理http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/130889_0.htmlhttp://www.invitrogen.com.cn/Focus/Focus24/Focus24_Top.htmRT-PCR基础http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/338601_0.htmlRT－PCR flashhttp://www.bio.davidson.ed ...

Q-PCR专栏：Q&A征集活动请大家仔细阅读下列规则！一. 活动目的：为广大战友提供Q-PCR入门知识和基本操作规范，互相交流，惩前毖后。二.活动规则：本活动是建立在旧贴整理的基础上，各位战友发贴前请先搜索本版。并回答下面所列问题。发贴须按下列格式进行，且“园内链接”一项必须详尽切题，否则不予加分。有技术方面的其他问题的战友，请另开贴求助。三. 发贴格式：问题题目：园内链接：问题回答：转自何处：四. 注意事项1. “问题题目”一栏需填写问题的 ...

PCR 引物设计及软件使用技巧张新宇，朱有康，高燕宁（中国协和医科大学中国医学科学院肿瘤研究所，北京100021）摘要：本文旨在介绍使用软件设计PCR 引物的技巧。在PCR 引物设计原则的基础上，详细介绍了两种常用引物设计软件的基本使用方法，并对其各自的优缺点进行了比较。一般性引物自动搜索可采用“Premier Primer 5”软件，而引物的评价分析则可采用“Oligo 6”软件。关键词：PCR；引物设计中图分类号：Q524 文献标识码： 文章编 ...

Oligo使用方法介绍作为目前最好、最专业的引物设计软件，Oligo的功能很强，在这里我们介绍它的一些主要功能：如：普通引物对的搜索、测序引物的设计、杂交探针的设计以及评估引物对质量等等。在正式进行引物设计前，我们首先面临的一个任务就是向Oligo程序导入模板序列，根据不同的实验情况，导入模板有三种方法：1，直接用键盘输入：a，点击file菜单中的New Sequence 浮动命令，或直接点击工具栏中的New Sequenc ...

丁香园的长远发展靠的是专业兴园。本版独立建版，特诚征专业讨论组员，请大家踊跃报名。有了您的积极参与，本版会更出色！组员要求：凡是热爱DXY，经常参与本版讨论，对PCR及相关技术感兴趣并有一定专业基础的战友，学历不限，工作年限不限，总积分超过20分，本版积分超过10分，即可申请为组员。组员的权利：1、有价值的帖子加分，每5个在本板块得分的帖子（时间不限），（只包含专题讨论和回答问题的帖子、对本版专业建设提出非常有意义的帖子 ...

第十七章　PCR及引物设计——【PCR版】已有ychhfl、wydsys报名 编写初稿，请及时奉上！第十八章　RT-PCR——【PCR版】已有yeang、swx_gene报名 编写初稿，请及时奉上！第十九章 实时定量PCR及其它PCR应用——【PCR版】--------------------------------------------------------------注：对PCR感兴趣的战友请到此跟贴！请申请的战友及时总结更新，每一专题暂限5名战友撰写，其他战友如有疑问请PM给原作者或我联系！ ...

由于原来的共享平台技术故障，现将共享资源放入新建的信箱。一个好的平台需要大家共同来维护，所以有一些要求，请大家遵守。1.请勿修改登陆密码。2.请勿对外传播本邮箱地址，以及登陆密码。3.请勿更改、删除其中的文件内容。4.有任何问题，请到丁香园PCR技术讨论版相应版块求助。5.为了避免由于访问量和下载量的原因导致信箱被锁的情况发生，请各位站友控制自己单位时间内的下载量。公共信箱：dxypcr_share@126.com密码： ...

REAL TIME PCR一 ：引物的设计引物的设计对于这个实验至关重要，因为 real time pcr 的检测灵敏度比较高，所以相应的对引物设计的要求就很高。普通的要求规则大家都知道，还有几点必须注意：1，引物的错配率（引物错配形成引物二聚体，但是 SYBR 照样能嵌入进去，结果导致实验结果的误差很大，重复性也不好）。2，引物的特异性一定要高（不像常规 PCR，引物同源性不高，只要两条产物的片段长度相差足够大，在电泳的时候能够区分开就可以。real ti ...

2009年就这样过去了，2009年的下半年我一直在跟RNA提取、逆转录和SYBR GREEN realtime-PCR反应做斗争，现在已经告别当初的迷茫，当别人问自己的时候，也能说出个一二五来了，很高兴。当时在我艰难摸索的时候就想，等我都学会了，我一定要写篇帖子，把一个初学者最初的想法和觉得矛盾、困难、不知如何入手的方法、难点和最后解决的办法写出来，一来可以帮助更多像我这样的人，二来也算让自己有点成就感了，三就是希望版主 ...

因为有热心战友的不断提问，“【心得】引物设计其实很简单，敢于尝试就会成功”就增加到三贴了，我把它们合并一下，方便战友指正吧！第一贴记得当时搞引物设计的时候，还是我的大师兄领入门的，在此谢过了。师兄教了一些基本原则后，就放羊了。接着自己捣鼓来捣鼓去，在导师的实验室内设计了十几条引物，用起来还蛮好的，逐渐赚了点名气。后来，就和上海鼎安合作了，帮别人设计引物在他们公司订购引物，拿点回扣。别人拿给我设计的引物，都是很头痛。因为客 ...

PCR讨论总结(PCR、RT-PCR、REAL-TIME PCR本版置顶贴汇总)http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=67&id=686472&sty=1&tpg=1&age=0PCR的基础知识http://www.37c.com.cn/topic/004/genediag/http://210.83.8.237/us/tech/tech01.asphttp://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid= ...

POST by Bingsen Xu前言：我是刚刚注册到丁香园，在PCR技术讨论版看见置顶贴，“请求助引物设计的战友先进来这里！”稍微浏览了一下，发现很多朋友对PCR引物设计还不是很熟悉，我愿意把自己积累的一点引物设计方面的经验和大家分享，希望不会做引物设计的朋友看完之后，可以不用再发求助贴而是自己动手做引物设计或者引物检验。开始之前：其实非常简单，不需要你下载任何软件，但是你得有一台电脑能上网。当然，最重要的是，你要很清楚 ...

我做了一点RACE PCR的工作，应lhailzhj 主任的邀请，在这里作一点介绍，望广大战友补充和修正，谢谢！近年来随着生物技术的不断发展，出现了许多克隆新基因的方法和手段，如图谱克隆技术、转座子标签技术、mRNA差异显示技术二基因组减法技术以及cDNA文库筛选技术等。但上述方法人多具有实验周期长、技术步骤烦琐且工作量大等特点。cDNA末端快速扩增技术(rapid amplification of cDNA ends, RACE)是一种 ...