PCR技术

1。real time PCR原理http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=3425617&sty=3&keywords=real+time+PCRhttp://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/1401010_0.htmlhttp://www.dxy.cn/bbs/thread/4604271http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=67&id ...

摘录于某公司技术资料我不是做广告的所以贴在这里：RT-PCR 1. cDNA产量的很低可能的原因：RNA模板质量低对mRNA浓度估计过高反应体系中存在反转录酶抑制剂或反转录酶量不足同位素磷32过期反应体积过大，不应超过50μl2. 扩增产物在电泳分析时没有条带或条带很浅最常见的原因在于您的反应体系是PCR的反应体系而不是RT-PCR的反应体系与反应起始时RNA的总量及纯度有关建议在试验中加入对照RNundefined第一链 ...

最近一直专注于简并引物的设计。从园子里和其他地方学习了不少，终于也设计出了满意的简并引物。现将全过程一并贴出，以供大家学习交流用。所用软件：DNAMAN， FastPCR，在线Blockmaker (http://bioinformatics.weizmann.ac.il/blocks/blockmkr/www/make_blocks.html)，在线Codehop (http://bioinformatics.weizmann.ac. ...

PCR版块FLASH动画汇总：思主任以前总结的部分链接：PCR版发布的网络资源FLASH汇总 A flash for RT-PCRPCR FlashPCR Flash推荐一个与RT-PCR有关的FlashA Flash of How RT-PCR is performedPCR-ELISADNA结构FlashPCR原理Primer Premier 5.0演示PCRRT-PCR admation RT-PCR 中文版PCR原理Polymerase Chain Reaction PCRR ...

本帖介绍了在PubMed主页进入引物blast的操作，有需要的战友可以浏览图片。稍等片刻，系统运行中~

Access RT-PCR System (Promega)DescriptionPromega’s Access RT-PCR System (a) is designed for the reverse transcription (RT) and polymerase chain reaction (PCR) amplification of a specific target RNA from either total RNA or mRNA (1). This one-tube, two-enzyme system provides sensiti ...

这个试验如何直接用细菌模板扩PCR？在real time反应中如何选择control 基因？如何知道一个已知序列的基因在保守序列呢 保守序列在引物设计中是否是一个必须明确的问题 保守序列和NCBI中CDS的又有什么区别呢？关于保守序列 如何知道？做RACE时基因特异性引物的设计这样做还能反映目的基因的转录水平高低吗?DNA凝胶直接作为模板DNA变性时间是否与片断长短有关？GenomeWalker Kits可否用来进行未知RNA ...

实时荧光定量PCR的研究进展及其应用多聚集链反应（polymerase chain reaction,PCR）技术发明至今已近20年了，在这期间技术得到了不断的发展，近年来出现的实时荧光定量PCR（real-time quantitative PCR）技术实现了PCR从定性到定量的飞跃，它以其特异性强、灵敏度高、重复性好、定量准确、速度快、全封闭反应等优点成为了分子生物学研究中的重要工具，本文就此技术及其应用做一综述。1 实时荧光定 ...

请问哪里可以购rat heme oxygenase-1（rHO-1）的全长cDNA？http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=67&id=5598968&sty=1&tpg=7&age=0http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=67&id=5570022&sty=1&tpg=12&age=0http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=67&id=5542551&sty=1 ...

核酸版blast精华 【旧贴整理】关于blast 精华如何使用blast 请教如何使用blast 请教blast如何使用？ 轻轻的问：BLAST怎么用啊？ 怎么样操作Blast及其怎么分析可行性 求助•！！！BLAST如何使用？急！！！其它问题 关于BLAST的问题 blast的结果怎么看 求助！！！如何使用BLAST验证引物？ 求教：我看不懂这个Blast结果！ 请教有关BLAST的一个问题 请BLAST高手帮忙分析一下引物 请帮我看看我设计的引物怎样 blast的结果可 ...

Oligo使用方法介绍转载请注明来自丁香园发布日期: 2006-12-13 19:57 文章来源: 丁香园关键词: Oligo 引物设计 PCR 软件作为目前最好、最专业的引物设计软件，Oligo的功能很强，在这里我们介绍它的一些主要功能，如：普通引物对的搜索、测序引物的设计、杂交探针的设计以及评估引物对质量等等。在正式进行引物设计前，我们首先面临的一个任务就是向Oligo程序导入模板序列，根据不同的实验情况，导入模板有三种方法：1、直接用键盘输入 ...

由于全血中存在有很多PCR反应抑制物，例如，血红素，蛋白质，盐，抗凝剂等，使得常规的Taq聚合酶不能从全血中直接进行PCR反应。因此，现在临床上往往先要从全血中提取DNA, 但即使这样，也不能完全克服上述抑制物的影响，这也是为什么目前临床上的DNA扩增反应，常常失败的原因如果在遗传病诊断中，能够从全血中快速有效地进行DNA扩增，可以节省大量的人力，时间，费用，对临床遗传病鉴定，以及亲子鉴定是一个革命化的改进。KAPA全 ...

多重PCR的一些体会这些年一直做一些多重PCR，对多重PCR，有一些自己的小体会，现写出来与大家一道共享并期待与大家的交流。实际求是的说，高通量核酸扩增技术一直是大规模核酸样品检测分析的瓶颈。现在的样品检测比如基于生物芯片平台的核酸样品检测，都是基于同时对成百上千个样品、上百上千个靶基因位点进行，很不幸的是，现有的核酸扩增技术，当然主要是PCR技术，现有的多重PCR是远远不能满足需求的。因此，现在又很多人都在致 ...

实时定量PCR应用中的问题及优化方案聚合酶链式反应（polymerase chain reaction , PCR）自诞生之日起就决定了它不仅是一种高敏感、高特异的检测核酸分子的定性方法，而且也是一个能对核酸分子进行精确定量的有力工具。随着分子生物学技术研究的不断进展，定量PCR技术取得了突飞猛进的发展，不仅建立了一系列的方法，而且也诞生了许多与这些方法相匹配的新型热循环仪和实验材料。实时定量PCR(real-time qua ...

PCR常见问题总汇PCR产物的电泳检测时间　　一般为48h以内，有些最好于当日电泳检测，大于48h后带型不规则甚致消失。假阴性，不出现扩增条带　　PCR反应的关键环节有①模板核酸的制备，②引物的质量与特异性，③酶的质量及， ④PCR循环条件。寻找原因亦应针对上述环节进行分析研究。　　模板：①模板中含有杂蛋白质，②模板中含有Taq酶抑制剂，③模板中蛋白质没有消 化除净，特别是染色体中的组蛋白，④在提取制备模板时丢失过多，或吸入酚。⑤模 板核酸变性不彻底 ...

PCR Primer DesignBook DescriptionIn the past decade, molecular biology has been transformed from the art of cloning a single gene to a statistical science measuring and calculating properties of entire genomes. New high-throughput methods have been developed for genome sequencing ...

众所周知,PCR技术以其高敏感性在分子生物学上得到了广泛应用,然而每一种方法再其优势方面的同时,其不可避免存在相关的问题,比如PCR技术的高敏感性是不是与其高特异性是一对矛盾??本人就个人研究过程中的经验总结几点所得,希望能为大家起到抛砖引玉的作用.首先,先提出影响PCR特异性的几个方面和解决方法:1. 引物序列不用多说,引物与模板的匹配是PCR成功扩增的关键,尤其上下游引物3'端的序列一定是要匹配的,但究竟要几个 ...

PCR常见问题及对策（一）没有得到扩增产物（1）酶失活或在反应体系中未加入酶。Taq DNA聚合酶因保存或运输不当而失活，往往通过更换新酶或用另一来源的酶以获得满意的结果。（2）模板含有杂质。特别是对甲醛固定及石蜡包埋的组织常含甲酸，造成DNA脱嘌呤而影响PCR的结果。（3）变性温度是否准确：PCR仪指示温度与实际温度是否相符，过高酶在前几个循环就迅速失活；过低则模板变性不彻底。（4）反应系统中污染了蛋白酶及核酸酶，应在 ...

预扩增包含8344位点的序列：8101 agatgcaatt cccggacgtc taaaccaaac cactttcacc gctacacgac cgggggtata8161 ctacggtcaa tgctctgaaa tctgtggagc aaaccacagt ttcatgccca tcgtcctaga8221 attaattccc ctaaaaatct ttgaaatagg gcccgtattt accctatagc accccctcta8281 ccccctct ...

天津美伦医药有限公司实施GMP工作汇报各位专家、各位领导：天津美伦医药有限公司始建于1989年，隶属于天津医药集团。随着“入世”的要求和市场份额的扩大，老厂房狭小、设备陈旧、主要制药工序均委托加工，加之资金匮乏，严重制约了企业的再发展。2001年初，美伦医药有限公司进行了资产重组,筹建了新的天津美伦医药集团。在董事长赵永良先生为首的公司领导总体策划下，在天津北辰经济技术开发区购地200亩，计划投资3亿元，分三期将美 ...