适用范围:适用于快速提取植物组织细胞总RNA
随着荧光定量PCR仪器的推广。RNA表达水平的检测越来越灵敏,对于高质量的RNA,不残留基因组DNA或者残留尽可能少成为判断RNA提取产品质量好坏的一个重要指标。目前一般RNA提取剂提取的RNA残留DNA还比较多,甚至肉眼都可以见到明显残留。在此情况下,客户只能采取DNA酶消化,或者再次抽提的方法来减少残留,不仅大大增加了时间成本和经费成本,效果往往也不甚理想,甚至还常常降解RNA。
发展了一种新的体外研究特异性结合pre-mRNA的方法。把寡核苷酸分成结合和未结合部分,然后使用双颜色阵列记录结合部分寡核苷酸的丰度,通过所获得的阵列数据生成高分辨率图谱,从而确定哪些是特异性序列,了解核蛋白结合pre-mRNA时的结构决定因素。
为了可视化RNA定位,我们合成了荧光标记的Vg1定位元件(VLE) RNA,然后将其通过显微注射转录至单个卵母细胞,最后用共聚焦显微镜成像卵母细胞。
详细介绍了分离斑马鱼胚胎全部RNA以及由RNA合成较稳定的cDNA的方法,整个纯化和合成过程均使用商业化的试剂盒。
计划通过获得第三层锥体细胞的基因表达图谱,以探讨精神分裂症患者颞上回灰质减少现象。利用激光捕获显微切割法分离到所需要的锥体神经元特异细胞类型后,再分离RNA以获得基因表达图谱。
12月份出版的《自然—方法学》刊登了一篇文章,描述了一种高通量RNA结构测定方法——“片段化测序”法(Fragmentation sequencing ,FragSeq)。相关研究由美国加州大学圣克鲁兹分校霍华德·休斯医学研究院教授索菲·萨拉马(Sofie Salama)所领导的课题组完成。
细胞因子的分子生物学检测法 细胞因子基因的检测包括对其DNA的检测和mRNA表达水平的检测。特定细胞因子mRNA表达水平的检测有助于判断细胞表达该细胞因子的水平;而细胞因子DNA的检测可以判断该细胞因子基因存在与否及其变异情况。常用的方法有Southern印迹、斑点印迹、PCR,原位杂交及原位PCR等,Northern印迹及RT-PCR。这里简要介绍常见细胞因子mRNA表达水平的检测。一 ...
RNA的斑点杂交--样本RNA点膜【试剂与仪器】(1)20×SSC(标准柠檬酸盐缓冲液)(pH 7.0) NaCl 175.3g 柠檬酸钠 88.2g 加H2O至 1000ml 用10N NaOH or 10N HCl调pH至7.0,高压灭菌。(2)37%甲醛(3)甲酰胺(4)2×Denhardt液(5)硝酸纤 ...
RNA干扰(RNA interference, RNAi)作为一种重要的基因转录后沉默机制, 广泛应用于基因功能研究、肿瘤及病毒感染性疾病治疗的实验研究 ,其核心作用是双链的小干扰RNA ( small interfering RNA, siRNA ) 能够抑制同源基因的表达。
《自然—方法学》网络版近日介绍了瑞士苏黎世大学分子生命科学研究所迈克尔· 恩加特纳(Michael O Hengartner)研究组发明的一种大尺度鉴定miRNA靶点新方法。
1.相似性序列发生Cross-react引起脱靶效应。2.监测手段:对脱靶效应的监测一般通过基因芯片来监测。Gene expression profiling对脱靶效应。3.脱靶效应的特性:转录物表达模式有序列特异性和靶特异性两种。4.大部分脱靶效应具有siRNA序列特异性。低浓度也可能产生脱靶效应,不仅仅是高浓度能产生脱靶效应的假象。脱靶效应在蛋白和mRNA水平同时考虑进行分析,要缜密分析和确定 ...
本文主要介绍了色氨酸操纵子以及它是如何发挥作用的
本文主要介绍了转录的几个步骤
本文主要介绍了不同σ因子对转录的调节
本文主要介绍了乳糖操纵子以及它是如何发挥作用的
本文主要介绍了RNA聚合酶Ⅲ基因包含哪些基因
本文主要介绍了转录的起始、延伸和终止
本文主要介绍了大肠杆菌RNA聚合酶的组成成分
本文主要介绍了mRNA的可变加工