DNA实验技术

BL21BL21（DE3）BL21 Plyss（DE3）BL21Condon Plus (DE3)BL21-AI（DE3）BL21-Trxb（DE3）BL21 gold Plyss（DE3）AD494（DE3）TB1(DE3)C41(DE3）C43(DE3）Rosetta（DE3）Rosetta2（DE3） PlyssOrigami B (DE3)Rosetta-gami-B（DE3）Rosetta-gami-B Plyss（DE3）DH5αTop10Top10F' ...

创英生物TaqMan-MGB双标记荧光探针合成--VIP 客户专属TaqMan-MGB 探针与传统的TaqMan-TAMRA探针比较具有以下优势：1. 提高TM值— 平均15bases可提高18℃，这样可以使探针的长度缩短，尤其对AT含量高的序列设计有很大的帮助，并且提高配对与非配对模板间的TM值差异。2. 提高信噪比— 由于在探针的3’端的淬灭基团为不发光的荧光基团，并且与报告基因在空间的位置更接近，实验结果更精确，分辨率更高。3. 更简化实验— ...

一、一个合格质粒的组成要素复制起始位点Ori 即控制复制起始的位点。原核生物DNA分子中只有一个复制起始点。而真核生物DNA分子有多个复制起始位点。抗生素抗性基因 可以便于加以检测，如Amp+ ,Kan+多克隆位点MCS 克隆携带外源基因片段P/E 启动子/增强子Terms 终止信号加poly（A）信号 可以起到稳定mRNA作用二、如何阅读质粒图谱第一步：首先看Ori的位置，了解质粒的类型（原核/真核/穿梭质粒）第二步：再看筛选标记，如抗性，决 ...

RNA 分泌体可以通过召回RNA聚合酶II促进转录终止Nat Struct Mol Biol. 2014 Sep 21. doi: 10.1038/nsmb.2893. The RNA exosome promotes transcription termination of backtracked RNA polymerase II.Lemay JF1, Larochelle M1, Marguerat S2, Atkinson S3, B?hler J3, Bachand F4Author information

作为遗传信息中心法则的三大掌门人，搞不清楚他们之间的那些纷争，怎么在江湖上混呢？

Pacific Biosciences 公司的PacBio RS II单分子实时测序（single molecule, real-time，SMRT）测序反应是在其专利SMRT cell中进行的，每个SMRT cell中有150,000个ZMW（纳米级的零模波导孔zero-mode waveguides）,每个ZMW都能够包含一个DNA聚合酶及一条DNA样品链，SMRT Cell能够平行检测大约75,000个单分子测序反应。当测序进行时，专利的包被技 ...

近日，赛业生物科技（Cyagen Biosciences）宣布推出其全球专利技术TetraOneTM KO，一种不仅在速度上媲美TALEN、CRISPR/Cas9（把ES打靶基因敲除/敲入鼠的定制周期降低至6个月），而且避免了TALEN、CRISPR/Cas9脱靶效应困扰的革命性技术。TetraOneTM KO的出现，是ES打靶技术制备基因敲除鼠的一个重大突破。基因组编辑的技术进展传统ES打靶、TALEN和CRISPR/Ca ...

总结了丁香园上各位战友的经验，并且总结了sigmaMTT试剂盒和MTT试剂的资料。想进一步交流可以加我的个人微信号：babagowhere。MTT原理：MTT是一种检测细胞功能的方法。细胞在活化增值的过程中，线粒体的能量代谢能够把MTT代谢为蓝紫色的甲臜，甲臜沉积于细胞内或细胞周围，形成甲臜的量与细胞活化的程度成正比，通过盐酸异丙醇或其他溶剂溶解甲臜，用酶标仪测溶液的光密度就可以反映甲臜的量并从而判断细胞活 ...

近年来，CRISPR技术掀起了基因组编辑的热潮。短短一年间，CRISPR技术已登上了数个知名榜单，包括Science的十大科学突破，Nature Methods的值得关注技术，以及Technology Review的十大突破技术。利用CRISPR技术发表的文章更是层出不穷。今天就和大家分享下CRISPR实验的主要步骤及需要考虑的因素。第一步，你要确定你做CRISPR的目的，即选一个CRISPR系统你要考虑清楚为什么 ...

在做病毒包装实验中，有科研工作者常遇到：用同样一个病毒载体系统进行病毒包装实验，为什么有人做的很好，次次成功，有人却是时常做不出来，稳定性很差，不是滴度低就是根本不出毒?从我们对不同载体系统病毒包装的多年经验总结，主要以下几个方面心得：第一，病毒包装的几个关键节点就是细胞因素、载体系统(尽量使用成熟的商业化载体系统)、构建重组的质粒正确与否、质粒抽提纯化情况、包装转染控制(24、48 小时的细胞及荧光状态判断)、目的基因 ...

以六孔板中的1孔为例，每个样品需要1×106个293FT细胞。1、取1.5 ml灭菌EP管，加入1.5 μg包装混合质粒和0.5 μg表达质粒以及250μl的无血清Opti MEM。轻柔混匀，室温孵育5 min。2、取1.5 ml灭菌EP管，取9μl 脂质体2000l溶于250 μl无血清Opti-MEM I培养基中。轻柔混匀，室温孵育5min。3、将DNA溶液和脂质体溶液轻柔混匀。室温孵育20 min。4、用胰酶消化并记数293FT细胞。用含血清的DMEM ...

近年来，ZFN、TALEN、CRISPR/Cas9等基因组编辑技术可谓是层出不穷，尤其是CRISPR/Cas9，一出现便在全球范围内掀起一股热潮。同时，各大公司也开发出一系列相应的产品，其中一种至关重要的就是基因敲除阳性克隆筛选的试剂。目前用的比较多的有CELI酶，CELI是植物来源的一种特异性识别碱基错配的酶，活性高，不会产生假阳性。而且CELI酶是目前生物界发现的唯一能准确切割异源双链DNA中存在错配位点的酶 ...

如何保证2天获得正确的克隆？基本操作步骤:Day1：·A:PCR--电泳回收--酶切（1-2小时）--PCR快纯试剂盒回收；·B:载体DNA的酶切（1-2小时）--?如有需要，进行电泳回收。·注：A和B可同步进行节省时间，然后进行连接（设置载体自连对照），室温0.5-1小时，转化Day2:·观察过夜培养的平板上的克隆数：当目的连接板上的克隆数较较对照连接平板上的克隆数多3倍以上时，·可以直接随机挑选2-3个克隆进行测序分析。·注：基本不用 ...

正文1.如何提高中文论文的阅读效率（前提：已找到相关中文文献+先阅读中文文献后阅读英文文献）？a.在阅读开始前先“打开”并“保存”一个Word文档，并且通过“工具”中的“自定义工具栏”将其中的“替换”拖到工具栏（这样有利于养成良好的“流程”习惯，可以大幅度提高后续的查找、文献再阅读、文献应用等工作，而且也便于以下的“复制”工作进行）；b.快速概览文献，并且注意所读文献的题目、摘要、关键字（尤其是中文文献的英文关键字，它可以成为你查 ...

1. The preparation of native chromatin from cultured human cells1.1.Cultured cells (e.g. HL-60 or lymphoblastoids) are grown to a density of approximately 1 x 106 cells/ml until they are inlog phase.1.2.Harvest cells: centrifuge samples (7,000 g, 10 min, 4°C) and wash the cell pellet 3 x ice cold PBS (Pho ...

Clontech是cDNA合成技术的引领者，近年来SMART(Switching Mechanism at 5’ End of RNA Template)技术被公认为是微量RNA和单细胞RNA-seq的行业金标准。现在创新的DNA SMART技术将模板转换机制的优势拓展到了DNA分析，利用DNA SMART ChIP-Seq Kit无需接头连接即可构建ChIP测序文库，极大地缩短了实验进程。科学技术的发展有时需要突破实验技术的挑战，如何从染色质免疫共 ...

1．溶液I—溶菌液：溶菌酶：它是糖苷水解酶，能水解菌体细胞壁的主要化学成分肽聚糖中的β-1,4糖苷键，因而具有溶菌的作用。当溶液中pH小于8时，溶菌酶作用受到抑制。葡萄糖：增加溶液的粘度，维持渗透压，防止DNA受机械剪切力作用而降解。EDTA：（1）螯合Mg2＋、Ca2＋等金属离子，抑制脱氧核糖核酸酶对DNA的降解作用（DNase作用时需要一定的金属离子作辅基）;（2）EDTA的存在，有利于溶菌酶的作用，因为溶菌酶的反应要求 ...

在临床检验中一般采用商品试剂盒进行测定。ELISA中有三个必要的试剂：免疫吸附剂、结合物和酶的底物等。完整的ELISA试剂盒包含以下各组分：（1）已包被抗原或抗体的固相载体（免疫吸附剂）；（2）酶标记的抗原或抗体（结合物）；（3）酶的底物；（4）阴性对照品和阳性对照品（定性测定中），参考标准品和控制血清（定量测定中）；（5）酶联物（结合物）及标本的稀释液；（6）洗涤液；（7）酶反应终止液。 1　免疫吸附剂　　已包被抗原或抗体的固相载体在低温（2~8℃ ...

　　【疑问】检验技士的考试和护士的一样吗？限2年内累计通过？比如今年这次过2科，明年再过2科就发证了？谢谢！　　【版主回复】检验资格考试和护士资格考试都统一归于全国的卫生资格考试的，所以成绩也是两年内有效。你今年这次过两科，明年把剩下那两门通过了就可以了。但是要提醒的是，你要注意保留今年的成绩单啊，不然明年发证会有麻烦的医学教.育网原创。

　　考试是紧张、激烈的脑力劳动，特别是检验技士，这期间需要考生全身心投入，且处于最佳状态，以保证每分钟都能积极思维。考试开始前，考生应像运动员比赛前先做准备活动一样，摒弃与考试无关的一切杂念，排除种种可能在考场中分散注意力的因素，适当热身，提前进入“角色”。考试中要克服六种不良心态。　　1、偏急心态　　考试时，有些考生为了抢时间，刚拿到试题，情绪急躁，没有审清题设条件，慌忙答题，这种心态称作偏急心态。正确的做法是：拿到试题，先大致浏览一下 ...