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SPEED技术介绍

这个主意真不错,制备一个能表达siRNA的文库,无需知道靶mRNA 的序列就可以筛选出有效的siRNAs,可以按照不同的要求筛选出许多有用的序列,从而节约了大笔money.采用病毒为载体,可以象PHAGE表面展示技术一样易于筛选。Small interfering RNAs (siRNAs) potently silence expression oftarget genes. In principle siRNA libraries can be used to perfo ...

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【共享】有趣的基因(转)

基因(遗传因子)是遗传的物质基础,是DNA(脱氧核糖核酸)分子上具有遗传信息的特定核苷酸序列的总称,是具有遗传效应的DNA分子片段。基因通过复制把遗传信息传递给下一代,使后代出现与亲代相似的性状。人类大约有几万个基因,储存着生命孕育生长、凋亡过程的全部信息,通过复制、表达、修复,完成生命繁衍、细胞分裂和蛋白质合成等重要生理过程。基因是生命的密码,记录和传递着遗传信息。生物体的生、长、病、老、死等一切生命现象都与基因有关。 ...

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【交流】体外哺乳类细胞(V79HGPRT)基因突变试验(GB)

中华人民共和国国家标准GB 15193.12一91体外哺乳类细胞(V79/HGPRT)基因突变试验V79/HGPRT gene mutation test-------------------------------------------------------------------------1主体内容与适用范围1.1本标准规定了体外哺乳类细胞(V79/HGPRT)基因突变试验的基本技术要求。1.2本标准适用于需要进行食品安全性评价的用作或用于食品的化学物质。2原理2.1细胞在正常培养条件下 ...

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【资源】大肠杆菌的表型大全

刚刚看到的,基本上各种常见的和不常见的大肠杆菌表型在下面都可以查到,内容不是我写的,想成为分子生物学高手的网友应该好好研究一下。其内容来自:http://openwetware.org/wiki/E._coli_genotypesF- = Does not carry the F plasmidF+ = Carries the F plasmid. The cell is able to mate with F- through conjugation.F' = Carries an F plasmid that has host chr ...

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【共享】慢病毒包装操作步骤

★ 慢病毒包装操作步骤:1. 在转染的前一天,传代准备细胞:用0.25%胰蛋白酶消化293T细胞,以含10%血清的DMEM培养基调整细胞密度后,按照每10cm细胞培养皿接种6~8×106cells到10cm细胞培养皿中,置于37℃,5% CO2 培养箱培养,16h~24h后待细胞密度生长到80%~90%时即可用于转染。 2. 第二天,在转染前2~4h,用5ml不含P/S的完全培养基换液(DMEM+10% FBS)。 3.按照以下实验步骤来进行转染: A、加入500ul ...

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【共享】DNA和命运——人类行为的天性和教养

DNA和命运——人类行为的天性和教养DNA and Destiny : Nature and Nurture in Human Behavior格兰特·斯蒂恩(R. Grant Steen) 著李恭楚 吴希美 译作者简介格兰特·斯蒂恩于加利福尼亚大学获得博士学位,然后在约翰霍普金斯和加利福尼亚技术研究所完成了进一步深造。如今,斯蒂恩博士是田纳西州圣尤地儿童研究院的资深学者,主要从事血液病和癌症的研究。他于1993年创作的《细胞的阴谋》被《新书目》赞誉为“对每个人都十分 ...

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some words about how to improve your research ability

When I read some posts, I often read some very basic questions. I always thinking, these questions are commoly taught by attending master or Ph.D courses. Or is easily solved by their tutors. Why they still ask such questions? So I write some of my thinkings, it may be benificial to new beginers. Due to my limited ti ...

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【共享】基因诊断和基因治疗

基因诊断和基因治疗北京大学医学部   李本富 基因(gene)是细胞核内DNA螺旋链上的功能性片断,指示细胞去完成某一种特殊使命,它也是遗传的基本单位。1985年美国科学家率先提出人类基因组计划(HGP),并于1990年在美国正式启动,英国、法国、德国和日本的科学家相继加盟,中国也于1999年获准加入该计划。经过众多科学家的艰辛劳动,终于于2000年6月26日国际人类基因组计划公益协作组宣布:人类生命的蓝图—基因组序列“工作 ...

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【原创】脱氧核酶研究进展

笔者正在从事应用脱氧核酶技术进行基因治疗实验研究,搜索论坛里对该技术讨论得不是很多,从目前形势看该技术具有广泛应用前景。于是就自己所了解的东西写出来供大家研究,同时也希望有兴趣者和我交流。脱氧核酶(deoxyribozyme/DNAzyme)是利用体外分子进化技术获得的一种具有催化功能的单链DNA片段,具有高效的催化活性和结构识别能力。自1994年Breaker首次发现脱氧核酶以来,迄今为止已发现了几十种脱 ...

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【资源】核酸检测的新方法——重组酶聚合酶扩增

2006.04月《PLoS Biology》刊登了此项技术:title: DNA Detection Using Recombination Proteinsabstract: DNA amplification is essential to most nucleic acid testing strategies, but established techniques require sophisticated equipment or complex experimental procedures, and ...

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【原创】启动子与转录因子/基因表达调控蛋白

生命活动丰富多彩、千变万化。但是万变不离其宗,不管如何变化都围绕着中心法则展开。核酸作为遗传物质指导蛋白质的表达,表达产生的一些特殊蛋白(如转录因子、调控蛋白)反过来又对DNA指导合成蛋白质的过程进行调控。对基因表达调控的研究一直是生物学研究热点,涉及到生命活动的各个过程,也是各类信号通路研究无法绕过的部分。当面对某个基因表达调控研究时,第一个想到的研究对象是什么?没错,就是基因的启动子。通过启动子区域对基因表达 ...

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果蝇和线虫基因与人类基因相似度的比较

希望大家喜欢,多多支持。请求加分啊。果蝇和线虫基因与人类基因相似度的比较在目前基因序列已解开的三个动物物种中,人类与果蝇在演化上的亲源关系较近,与线虫较远。这项研究是由由美国宾州和日本科学家组成的小组共同进行,宾州演化生物学家S. Blair Hedges表示,他们比较了这三个物种的100个基因﹝这是目前相关研究中最大规模的一次﹞,得到了一个很明确的结果。这三个物种的基因体解读是个别进行的,都是具代表性的物种:人类是脊 ...

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【交流】blast结果分析

各位大侠帮忙分析下!谢谢!gb|ABO31000.1| tumor protein p53 Length=77 Sort alignments for this subject sequence by: E value Score Percent identity Query start position Subject start position Score = 91.3 bits (225),Expect = 1e-20, Method: Compositional matrix adjust. Identities = 43/44 (98%),Posi ...

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【共享】慢病毒载体

我们实验室有PLVX 和PCDF 两种慢病毒载体,前者没有其他的辅助质粒,不知道哪些大侠用过这种载体系统,能不能共享下辅助质粒呢。有的话尽快联系我哦,QQ869055498data:image/png;base64,iVBORw0KGgoAAAANSUhEUgAAAh8AAAHVCAYAAABRxpmeAAAgAElEQVR4AeydBVhUXRPH/zSoGGCBqCCC3d3Y3d3dYuf32t0tFmKLL ...

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【转帖】无创产前诊断:迎来行业看好的最佳时机

无创产前检测技术起始于香港科学家卢煜明在孕妇血液中发现婴儿DNA的突破性研究,具有羊膜穿刺诊断无法竞争的技术优势。由于其在诊断领域的巨大前景,Illumina公司不愿放弃这一利润丰厚的领域而拒绝罗氏67亿美元的收购,更有专家学者从技术和行业上看好无创产前检测。无创产前检测技术建立在香港科学家卢煜明于1997年发现的孕妇血液中包含胎儿DNA碎片的突破性研究上,研究发现,母亲血液中游离的基因片段约15%来自胎 ...

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【转帖】Nat Methods: 2014年值得关注的技术

2014年首刊,《Nature Methods》杂志将2013年度技术(Method of the Year 2013)授予了单细胞测序(single-cell sequencing)。同时,杂志还介绍了2014年值得关注的技术,包括CRISPR和基因组编辑、原位测序、迷你胞内探针、单粒子低温电子显微镜等。单细胞测序近几年来,基于单细胞测序技术的科学研究取得了突飞猛进的发展,其成果有望为一些重要的医学问题提供新的解决方案。文章总结了201 ...

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【资源】一种被广泛用于实时定量 PCR 的绿色荧光 DNA 染料

EvaGreen qPCR 荧光染料一种被广泛用于实时定量 PCR 的绿色荧光 DNA 染料 EvaGreen®是一种用于实时定量 PCR(qPCR)的 DNA 结合染料。该染料的诸多优点使它远胜于 SYBR Green I。除了有相似的光谱特性,EvaGreen 有三个主要特点使它区别于 SYBR Green I。首先,EvaGreen 对 PCR 的抑制性远小于 SYBR Green I。因此,使用EvaGreen 进行的 qPCR 实验可以使用快速 PCR 步骤。同时,EvaGreen 在实验中可以使用较高的 ...

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【共享】dsDNA微阵列的原理

dsDNA 微阵列又叫蛋白质结合微阵列(Protein binding microarray, PBM), 由Bulyk等在1999 年首次提出。它的基本原理是在玻片上很小的面积内(约1 cm2)固定成千上万的dsDNA分子作为探针, 检测与大量DNA分子与DNA结合蛋白之间的相互作用。这种检测在原理上模拟的是DNA结合转录因子在体内与其DNA结合位点的相互作用。在基因组DNA中, 转录因子的DNA结合位点一般是一段很短(约5~20 bp)的序列, 如转 ...

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【medical-news】检测AML患者表观遗传学改变和预后相关基因信息对指导临床意义重大

PurposeMolecular risk stratification of acute myeloid leukemia (AML) is largely based on genetic markers. However, epigenetic changes, including DNA methylation, deregulate gene expression and may also have prognostic impact. We evaluatedthe clinical relevance of integra ...

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【原创】两步法高分辨溶解曲线(HRM)SNP分型

HRM 是SNP分型的手段之一,其特点为分型费用比较低廉,特别是应用小片段法,鄙人初次应用小片段法对10个SNP成功分型,现将实验的步骤分享,希望能给有需要的同道一点经验,同时希望能多交流,谢谢~~~两步法HRM不同于一般的HRM法在于PCR和HRM分开做,顾名思义:第一步:PCR,最好用预混的PCR试剂,我用的是宝生物的PCR Premix TaqTM,便宜又好用。第二步:HRM,将P好的产物分别加上LC Green及高低温内标, ...

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