我在ExonPrimer（http://ihg.gsf.de/ihg/ExonPrimer.html）网页上设计引物，结果如下，不知道行不行？我是新手，我不明白这些参数，也看不懂，请各位多多指教。我要做的外显子是666bp的。Exon1: 666 bpOLIGO start len tm gc% any 3' rep seqLEFT PRIMER 225 20 58.19 50.00 2.00 2.00 12.00 GGTCTGTGTTTTGTTCCTGCRIGHT PRIMER 950 27 55.92 37.04 4. ...
如果链接不好用，请将网址粘贴到地址栏，回车即可。英文简历常用词汇http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=11&id=1199405&sty=3&keywords=%B3%A3%D3%C3%B4%CA%BB%E3英文简历常用词汇及用语http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=11&id=233169&sty=3&keywords=%B3%A3%D3%C3%B4%CA%BB%E3医学英语常 ...
质粒DNA的提取与鉴定( 一)收获细菌（1）将2ml含相应抗生素的LB液体培养基加入到通气良好的15ML的试管中，接入一单菌落，于37度剧烈振荡培养过夜（2）将1.5ml培养物倒入1.5ml离心管中，用台式离心机于4度以12000g离心5min，将剩余的培养物储存于4度（3）吸尽培养液，使细菌沉淀尽可能干燥2碱裂解法小量抽提质粒 （1）将细菌沉淀重悬于100μl预冷的溶液Ⅰ（50mmol/L葡萄糖，25mmol/l Tris –HCl ...
活体电穿孔法介绍1、什么是活体电穿孔活体电穿孔法(in vivo electroporation) 是将外源基因通过电场作用，导入动物目标组织或器官。由于这种方法能有效导入外源基因，可在多种组织器官上应用,并且效率较高。活体电穿孔法的原理很简单,在直流电场作用的瞬间,细胞膜表面产生疏水或亲水的微小通道105～115μm ,这种通道能维持几毫秒到几秒,然后自行恢复。在此期间生物大分子如DNA 可通过这种微小的通道进入细胞 。近年来活体 ...
本人有大量的资料资源，有需要的朋友欢迎来交换，邮箱：1739507720@qq.com：质粒类别抗性详细信息pGEX4T-1大肠杆菌质粒AmppGEX4T-2大肠杆菌质粒AmppGEX4T-3大肠杆菌质粒AmppGEX-6P-1大肠杆菌质粒AmppGEX-6P-2大肠杆菌质粒AmpPGEX-KG大肠杆菌质粒AmppGEX-6p-Caspase大肠杆菌质粒AmppET3a大肠杆菌质粒AmppET3b大肠杆菌质粒Am ...
真核基因表达调控 一、真核基因组的复杂性 与原核生物比较，真核生物的基因组更为复杂，可列举如下。 ▲真核基因组比原核基因组大得多，大肠杆菌基因组约4×106bp，哺乳类基因组在109bp数量级，比细菌大千倍；大肠杆菌约有4000个基因，人则约有10万个基因。 ▲真核生物主要的遗传物质与组蛋白等构成染色质，被包裹在核膜内，核外还有遗传成分(如线粒体DNA等)，这就增加了基因表达调控的层次和复杂性。 ▲原核生物的基因组基本上是单倍体，而真 ...
LAMP法的原理该方法主要是利用4种不同的特异性引物识别靶基因的6个特定区域，且可在等温条件进行扩增反应。基因的扩增和产物的检测可一步完成，扩增效率高，可在l5～6O min扩增1O^9～lO^10 倍；特异性高，所有靶基因序列的检测可只通过扩增产物的有、无来判别。有、无扩增反应是利用荧光定量PCR仪检测反应的荧光强度或利用核酸扩增过程中产生的焦磷酸镁沉淀反应用浊度仪检测沉淀浊度来判定的1．引物的设计：基于靶基因3'端的 ...
1：DH5a菌株DH5a是一种常用于质粒克隆的菌株。E.coli DH5a在使用pUC系列质粒载体转化时，可与载体编码的β－半乳糖苷酶氨基端实现α－互补。可用于蓝白斑筛选鉴别重组菌株。基因型：F-，φ80dlacZΔM15，Δ(lacZYA-argF)U169，deoR，recA1，endA1，hsdR17(rk-，mk+)，phoA，supE44，λ-，thi-1，gyrA96，relA12：BL21(DE3) 菌株该菌株用于高效表达克 ...
我从网上看到的，与大家分享。点此下载Highly Efficient Ligation for Large InsertsOne of the major problems with the success of ligation reactions, and thus the cloning experiment as a whole, is ensuring the restriction digests are complete and the dephosphorylation of the vector termini was successf ...
Preparation of BAC (Bacterial Artificial Chromosome) DNA with by Alkaline Prep Method1. Grow 250 ml of LB culture at 37 °C for 16 hours ( 250 rpm) with the appropriate antibiotic. Cultures can be started by 1) picking a single colony or 2) by splitting a subculture into 250 ml of culture (1 L Flasks). Colonies shou ...
Star ActivityIt has been demonstrated that under extreme non-standard conditions, restriction endonucleases are capable of cleaving sequences which are similar but not identical to their defined recognition sequence. This altered or relaxed specificity has been termed “star” ...
可以肯定很多战友知道麻省理工学院的课件已经在网上全部公布，但有些战友可能不知道在哪里可以看到他们。下面提供支持在线浏览的生物学课件的网址给大家（并且这些教程是可以下载的）http://www.core.org.cn/OCW_CN/Biology/index.htm我想这对很多战友来说是不可多得的好教材。坦白来说，我把它当成一种财富，我近期已经阅读了他的遗传学教程，发现真的讲得很好，深入浅出的为我们讲述了遗传学的方方面 ...
近10年来，现代分子生物学技术越来越广泛地被用于人类疾病研究的诸领域，为了解病理状态下基因组DNA的变化积累了新资料。目前认为，人类基因组并非人们想像的那样稳定，诸如基因重排、扩增、缺失，突瘘和DNA甲基化类型改变等时有发生，这些改变对于基因表过和调控，以及疾病过程的发展与转归等方面均具有重要意义。 医院病理科档案中积存的大量石蜡包埋组织，是一个可靠的分子生物学研究的材料来源。在石蜡切片上进行原位杂交或原位PCR ...
一、 建立一个标准的酶切反应目前大多数研究者遵循一条规则，即10个单位的内切酶可以切割1μg不同来源和纯度的DNA。通常，一个50μl的反应体系中，1μl的酶在1X NEBuffer终浓度及相应温度条件下反应1小时即可降解1μg已纯化好的DNA。如果加入更多的酶，则可相应缩短反应时间；如果减少酶的用量，对许多酶来说，相应延长反应时间（不超过16小时）也可完全反应。二、 选择正确的酶不言而喻，选择的酶在底物DNA上必须至少有 ...
The RNeasy Mini Kit from Qiagen is designed for RNA extraction, although the basic formatis similar to other Qiagen products designed to purify nucleic acids: ion exchange columnsspecifically bind RNA which is purified by wash steps and subsequently eluted in aqueoussolution. The RNea ...
不用试剂盒的凝胶回收（来自网络） 2008-01-09 15:41:32| 分类： 分子生物学实验室 | 标签： |字号大中小 订阅 .（1）用小针头在0.5ml离心管底部打洞，用玻璃棉塞住离心管底部。（2）紫外透射检测仪下观察，用小刀片小心切出含有目的片段的凝胶。（3）将凝胶条放入0.5ml离心管中，外套1.5ml离心管，8000rpm离心3分钟。用微量取液器吸取1.5ml离心管中的液体，转移到另一干净的1.5ml离心管中。然后重复离心，直到将凝胶条中的液体全 ...
分子生物学实验人员软件解决方案分子生物学实验人员软件解决方案在互联网上，有很多软件可以解决对单个基因进行研究的分子生物学实验人员从立项到最后写论文的实际问题。本文提供了对相同作用的很多软件进行比较后推荐给一线实验人员使用的Windows应用软件。一、资料收集整理阶段。本阶段需要查找某个项目专题的文章,并写出对该专题的综述,以便对自己所要做的课题的现状有一个基本的了解。推荐软件：Reference Manager 9 ...
刚才查文献时看到的，某机构发表的核酸相关研究的文章，都已经提供了PDF格式的链接。大家看看有没有自己需要的文献。http://genome.imb-jena.de/publications/index.pl2006:Birkenmeier G, Nicklisch S, Pockelt C, Mossie A, Steger V, Glaser C, Hauschildt S, Usbeck E, Huse K, Sack U, Bauer M, Schafer A (2006)Polymyxin B-conjugated ...
表达载体的构建方法及步骤一、载体的选择及如何阅读质粒图谱目前，载体主要有病毒和非病毒两大类,其中质粒 DNA 是一种新的非病毒转基因载体。一个合格质粒的组成要素：（1）复制起始位点 Ori 即控制复制起始的位点。原核生物 DNA 分子中只有一个复制起始点。而真核生物 DNA 分子有多个复制起始位点。（2）抗生素抗性基因可以便于加以检测，如 Amp+ ,Kan+（3）多克隆位点 MCS 克隆携带外源基因片段（4） P/E 启动子/增强子（5）Terms 终止信号（6）加 poly（A）信 ...
一，酵母表达系统毕赤酵母表达系统（invitrogen公司）：分泌型质粒pPIC9K，宿主菌毕赤酵母GS115分泌型质粒pPICZalpha （甲醇诱导）宿主菌毕赤酵母x33分泌型质粒pHIL-S1二，原核表达质粒表达宿主菌为BL21(DE3)系列带His标签（N端）：PET5-(a)氨苄抗性带His标签（N端）：PET28-(a)卡那抗性带His标签（C端）：PET24-(b)卡那抗性带His标签（C端）：PET21-(a)氨苄抗性 ...
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