DNA实验技术

http://www.ebiotrade.com/bbsf/xjszl/B20027816518.asp优化基因表达的关键因素之：基因的重新设计和合成密码子最佳化（codon optimization）遗传密码有64种，但是绝大多数生物倾向于利用这些密码子中的一部分。那些被最频繁利用的称为最佳密码子(optimal codons)，那些不被经常利用的称为稀有或利用率低的密码子(rare or low-usage codons)。实际上用 ...

分子遗传学常用词汇(中文)腺嘌呤Adenine(A)：一种碱基，和胸腺嘧啶T结合成碱基对。等位基因(Alleles)：同一个基因座位上的多种表现形式。一般控制同一个性状，比如眼睛的颜色等。氨基酸（Amino Acid）：共有20种氨基酸组成了生物体中所有的蛋白质。蛋白质的氨基酸序列和由遗传密码决定。扩增（Amplification）：对某种特定DNA片段拷贝数目增加的方法，有体内扩增和体外扩增两种。（参见克隆和PCR技术）克 ...

Electrophoresis其实并不简单我们要学的还很多Chemical Safety . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 334What Is the Safest Approach to Working withAcrylamide? . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 334What Are the Symptoms of Acrylamide Poisoning? . . . . . . 335What Is the Medical Response to Accidental AcrylamideExposure? . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 335How Can You Dispose of Excess, U

前不久在本论坛对转基因食品的一些探讨，中间发生了很多插曲，今天我收到了某生物工程的药理专业jinlzhao博士回信：全文如下：哈药：你好，最近太忙，无暇仔细阅读您的帖子，今日看毕，给出我的一点意见，你可以在合适的时候发出。首先声明，本人不熟悉转基因食品，但是本人有幸做过转基因动物实验。以我的经验以及我和国外几位转基因同行的交流，我发现，转基因动物实际上是不可控的，或者说是很难控制的。转基因动物的制作过程，在此我就不 ...

看了下面的文章，我觉得◎＃￥％％￥＃◎碱裂解法从大肠杆菌制备质粒，是从事分子生物学研究的实验室每天都要用的常规技术。为了方便理解，这里罗列一下碱法质粒抽提用到三种溶液：溶液I，50 mM葡萄糖 /25 mM Tris-Cl / 10 mM EDTA，pH 8.0；溶液II，0.2 N NaOH / 1% SDS；溶液III，3M 醋酸钾 / 2 M 醋酸。让我们先来看看溶液I的作用。任何生物化学反应，首先要控制好溶液的pH，因此用适当浓度的和适当pH值的Tris-Cl溶液，是再自然不过的了。那么50m ...

http://blog.bioon.com/user3/26347/archives/2007/148549.shtml含全文下载日本和美国科学家进行的两项独立研究，首次利用人体测表皮细胞制造出了类胚胎干细胞。这一技术有望用于特定疾病的干细胞研究和治疗，并且避开了利用晶胚或卵母细胞获得胚胎干细胞的伦理争议。相关论文分别在线发表于《细胞》和《科学》杂志。近些年来，从事干细胞研究的科学家已经试图将一些正常的体细胞直接转化 ...

Sequencher - DNA 序列分析软件Sequencher 是 DNA 序列分析的工业标准软件。它可以和所有的自动序列分析仪一同工作，并且因为它的极速 Contig 组装、很短的学习曲线、用户友好的编辑工具，以及卓越的技术支持而众所周知。从差不多 15 年前释出第一个版本到现在，Sequencher 在每个基因专业和制药公司中都应用与于序列分析任务，同时在全球超过40个国家里为数众多的学术和政府实验室中使用。Sequencher 被生命科学研究 ...

琼脂糖糖凝胶电泳，是一门常规技术，需要熟练掌握。1．目的学会常用的DNA琼脂糖凝胶电泳、。2．原理DNA双螺旋分子骨架两侧带有含负电荷的磷酸根，在电场中会向正极方向移动。不同长度的DNA由于受到凝胶介质的阻力不同，表现为不同的迁移率而被分开。3．器材电泳仪，水平凝胶电泳槽和梳子及其制胶模块，250ml三角瓶，微波炉，台式离心机，旋涡混合器，凝胶成像系统，分光光度计，微量移液取样器，1.5ml离心管，双面微量离心管架，试管 ...

【鸡毛蒜皮】之3重组质粒是“筛”出来的吗？重组质粒的筛选是质粒构建的重要步骤，重组子是筛出来的，这个命题没有问题。问题是最关键步骤不在筛选。影响重组质粒构建效率的最关键步骤在于酶切，不管是否是定向克隆还是非定向克隆。酶切的关键在于切干净，彻底的酶切反应是成功的一半，尤其是载体的酶切。1）酶切反应的前提是对质粒载体的大致定量，一般大小的质粒（3－5kb）一次连接的用量在100ng左右，一般挖胶回收的损失在50%左右，为 ...

请问有哪些原核表达载体的mcs含有以下三个以上以下的酶切位点。谢谢AarI CACCTGC,4,8 MfeI C/AATTGAatII GACGT/C MluI A/CGCGTAccI GT/MKAC MmeI TCCRAC,20,18AceII GCTAG/C MscI TGG/CCAAclI AA/CGTT NaeI GCC/GGCAfeI AGC/GCT NarI GG/CGCCAflII C/TTAAG NdeI CA/TATGAgeI A/CCGGT NgoMIV G/CCGGCAhdI Gundefined*N~HNN_...

【1】请在标题前加上【原创】 【求助】 【交流】 【转帖】 【共享】 【建议】 【求购】 【申请加分】 【旧贴整理】等字样，以使版面整齐并便于浏(【】符号可在智能WB中打"v1",下翻几页就可,或自此拷贝)。【2】请在=No exact sub board=下拉框中选择相应的子版发帖。 NCBI生物信息学研究工具：http://www.ncbi.nih.gov/Tools/NCBI生物信息学研究工具网站由美国国家生物技术信息中心支持。该网站提供了许多程序的链接，内容包括数据挖掘、核 ...

DNA QUANTITATION--------------------------------------------------------------------------------AGAROSE-GEL METHOD WITH ETHIDIUM BROMIDE STAINING1) The DNA for assessment was removed from cold storage and heated at 37oC for 30 min (or 3 min at 60oC ). Flicking the bottom of tubes ensured that all the DNA has been suitably r ...

本是想回答一个网友的相关问题，可我找不到他/她的贴在哪儿，只好自己发一贴。谈一下：有关“KOZAK CONSENSUS SEQUENCE”I.Kozak Sequencehttp://www.sciencegateway.org/resources/kozak.htmMost eukaryotic mRNAs contain a short recognition sequence that greatly facilitate the initial binding of mRNA to ...

前一段时间实验室要革新核酸染色技术，于是查了一下这方面的东东，发现有好多产品面市了，现提供几个有用的资料，希望能对大家的健康有用！-------------------------------GoldView(GV)核酸染料 http://www.sbsbio.com我们实验室在用这个产品，尽管效果不如EB，但是无毒害的，所以还是要好些的，并且用看EB的紫外波长就可以了，所以成本要小，推荐使用GoldView(GV)是一种可代替溴化乙锭（EB）的新型核 ...

1 溶解核酸酶P1（sigma)的冷冻干燥物与1.0ml30mM醋酸缓冲液（PH=5.3）？不知道此配法行不行？在sigma的说明书上没有具体说明！酶活性:1mg核酸酶P1在1小时，ph5.3 ,T=50 能够把2gRNA或0.2gDNA酶解为5-单核甘酸促进此酶的稳定性：在孵育时，可加zn和人血清白蛋白增加其稳定性！2牛小肠碱性磷酸酶试剂准备• 10mM Tris-HCl (pH 8.0)• CIAP stop buffer10mM Tris-HCl (pH 7.5)1mM ...

Gateway也可以被视为一种克隆操作平台：把目的基因克隆到入门载体（Entry Vector）后，就不用依赖限制性内切酶，而靠载体上存在的特定重组位点和重组酶，高效、快速地将目的基因克隆到其它的受体载体（Destination Vector，目的载体）上。Gateway的原理也是建立在噬菌体DNA定点整合到细菌宿主基因组上。在噬菌体和细菌的整合因子（INF、Int）的作用下，lambda的attP位点和大肠杆菌基因组的 ...

刚刚看到的，内容不是太多。http://structure.biochem.queensu.ca/protocols/感觉有些东西还是不错的，摘录出来：Purification of 6xHis-Tagged ProteinsWhere (Sample) is noted, take an aliquot of the material and boil in SDS-PAGE sample buffer for running on a gel.1)Inoculate single colony of BL21(DE3) c ...

Atggcgcgctttgaggatccaacacggcgaccctacaagctacctgatctgtgcacggaactgaacacttcactgcaagacatagaaataacctgtgtatattgcaagacagtattggaacttacagaggtatttgaatttgcatttaaagatttatttgtggtgtatagagacagtataccgcatgctgcatgccataa ...

DNA合成公司的尴尬和困惑DNA合成的价格降到这个份上，恐怕每家合成公司都在暗自掂量：还值不值得在DNA合成上继续投资？眼看人家国外的DNA合成公司已经把毛细管电泳、质谱分析等先进手段用在了Oligo DNA的质量监控，而我们还停留在PAGE检测上，条件稍好一点的，也就是再做一下HPLC分析。赛百盛近期与美国一家顶尖的DNA合成公司合作，对国内的DNA合成质量进行了一番分析研究。说是合作，是人家客气，其实是向人家 ...

核酸分离纯化实验技术指南总RNA提取常见问题分析Q：RNA降解A：1. 新鲜细胞：如果试剂没有问题，且外源性污染也可以排除，那么降解几乎都来自裂解液的用量不足。如 果将裂解液直接加入培养皿中裂解细胞，一定要使裂解液能覆盖住细胞。2. 新鲜组织：某些富含内源核酸酶的样品(如肝脏，胸腺等)，即使使用电动匀浆器匀浆也不能避免RNA的降解。更可靠的方法是：在液氮条件下将组织研碎，并且匀浆时使用更多裂解液。3. 冷冻样品：样品取材后应立即置于 ...