DNA实验技术

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1997年2月22日，英国罗斯林研究所的科学家维尔穆特等人宣布用体细胞克隆绵羊获得成功，在世界上引起巨大震动。一时间，克隆绵羊“多利”成为动物界最耀眼的“明星”，其“咩咩”的叫声迅速响遍全球。 “克隆”是英文单词“Clone”的音译，其本身的含义是无性繁殖，即由同一个祖先细胞分裂 ...

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克隆是英文Clone一词的单译，意为无性繁殖系，即通过无性繁殖（如细胞丝分裂）可连续传代并形成的群体，常用于细胞水平的描述。克隆技术（Cloning）则指由众多的基因或细胞群体中通过无性繁殖和选择获得目的基因或细胞的技术操作。如基因克隆是指某种目的基因的分离过程，通常是将生物材料的遗传物质如DNA以酶切成片断，插入到载体中，通过无性繁殖（细菌或细胞的倍增）使其扩增，然后再以某种探针选择、钓取目的基 ...

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Miniprep of BAC DNA 1.Inoculate 4 - 8 tubes of 3ml/tube LB with 15μg/ml chloramphenicol with BAC clone and grow oveernight. Miniprep with AutoGen 740 according to the protocol described in our Web ...

Source: Protocol Online Abstract: Modifying DNA using sodium bisulfite to convert unmethylated cytosines to uracils and subsequently detect methylated cytosines using methylation specific PCR (MSP) te ...

The preferred method of de-phosphorylation uses the buffer system described by Pharmacia for most of their restriction endonucleases. You will need: 10 x OPA+ Buffer (100mM Tris.acetate pH 7.5 100mM ...

什么是克隆？ 克隆是英语单词clone的音译，clone源于希腊文klone，原意是指幼苗或嫩枝，以无性繁殖或营养繁殖的方式培育植物，如杆插和嫁接。 如今，克隆是指生物体通过体细胞进行的无性繁殖，以及由无性繁殖形成的基因型完全相同的后代个体组成的种群。克隆也可以理解为复制、拷贝，就是从原型中产生出同样的复制品，它的外表及遗传基因与原型完全相同。 1997年2月，绵羊“多利” ...

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Sample Preparation Cheek cells are obtained by rinsing the mouth with 25mls of any commercial mouth wash solution available for about 30sec the first thing in the morning. It is important not to brus ...

简介 优点：操作简单方便 缺陷：不能像EMSA或footprinting一样区分不同类型复合物 原理 双链 DNA 能够通过硝化纤维膜 (NC)，但是 DNA-protein 复合物不能通过NC filter. 通过定量分析留在滤膜上的复合物，可以判断二者的结合常数。 基本方法 Lable DNA Mix DNA and protein to form complex Pass th ...

Qiagen公司的琼脂糖凝胶回收试剂盒：MinElute Gel Extraction Kit 品牌：Qiagen回收范围：70bp-4kb价格：（50包装1485，约29元/反应） 特点： 洗涤体积只要10μl，回收产物浓度高，方便后继实验 使用方便快捷（wash-and-spin) 高回收率 回收产物纯度高，可用于同位素或荧光测序、芯片分析、连 ...

METHOD: 1.Isolate chromosomal DNA by using the CTAB protocols in current Pr M R. 2.Make a CsCl preparation of pLAFr3 (or other appropriate cosmid). 3.Cut pLAFr with BamHI phenol ext. + ETOH preparatio ...

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Materials: 3 M sodium acetate pH 5.2 or 5 M ammonium acetate DNA 100% ethanol Measure the volume of the DNA sample. Adjust the salt concentration by adding 1/10 volume of sodium a ...

外源DNA片段和线状质粒载体的连接，也就是在双链DNA5'磷酸和相邻的3'羟基之间 形成的新的共价链。如质粒载体的两条链都带5'磷酸，可生成4个新的磷酸二酯链。但如果质粒DNA已去磷酸化，则吸能形成2个新的磷酸二酯链。在这种情况下产生的两个杂交体分子带有2个单链切口，当杂本导入感受态细胞后可被修复。相邻的5'磷酸和3'羟基间磷酸二酯键的形成可在体外由两种不同的DNA连接酶催化，这两种酶就是大肠杆菌 ...