1. Transfer plugs of mycelial margin to 0.1 P plates. Allow to grow to fill plate (about one week at 21°). 2. Macerate two plates of mycelia in a blender with 50 ml of .002 P liquid medium. Inocul ...
- make a 5µm section to do an evaluation of the % tumour cells - make 50X50µm sections for the DNA isolation - put sections in a falcon tube containing 10 ml of 1XSE - add 100µg/ml p ...
基因(gene)是遗传物质的最基本单位，也是所有生命活动的基础。不论要揭示某个基因的功能，还是要改变某个基因的功能，都必须首先将所要研究的基因克隆出来。特定基因的克隆是整个基因工程或分子生物学的起点。本文就基因克隆的几种常用方法介绍如下。 1 根据已知序列克隆基因 对已知序列的基因克隆是基因克隆方法中最为简便的一种。获取基因序列多从文献中查取，即将别人报道的基因序列直接作为自己克隆的依据。现在 ...
I have tried to purify my PCR products by using 3 different approaches: 1) QIAQuick PCR purification kit: but when I run the gel to see its efficacy there was simply nothing!! it cleaned everything in ...
Electroelution of agarose fragments Electroelution buffer 1 M Tris pH 7.5 12.0 mls 0.5 M EDTA 0.24 mls 1 M NaCl 3.0 mls qs to 600 mls dH2O Acetate cushion 3 M NaAcetate pH 4.8 480 μl 0.1 % Bromphe ...
1）致癌化学物转化细胞：转化叙利亚地鼠胚胎细胞实验 1．取材：妊娠后第13天取材，取数个同窝胚胎，去头和内脏，在无菌条件下剪碎至米粒大小，再用0.25%胰蛋白酶（含0.01%EDTA）37℃消化30分钟，滤过、低速离心、吸除消化液、加入营养液、制备成细胞悬液、接种入75cm/培养瓶中，接种密度10～20×106/75cm，37℃培养2～3天，在顺利情况下能迅速长满瓶面。 2．贮存：选大 ...
Mitochondrial DNA Isolation from Somatic Embryogenic Cell Cultures of Larix (Excerpt from Thesis). Mitochondrial DNA is isolated by a modification of the methods described by Wilson and Chourey (1984) ...
Preparation of plasmid DNA : a modified mini alkaline-lysis/PEG precipitation procedure. ABI; 1995 Materials GTE buffer (50mM glucose 25mM Tris-HCl (pH8.0) 10mM EDTA (pH 8.0)) (200µl/tube) 0.2N ...
双酶切buffer的选择： 1、U ：Supplied with its own unique reaction buffer that is different from the four standard NEBuffers. Its compatibility with the four standard NEBuffers is indicated by the chart. 2、BSA ...
A practical method for the preparation of total DNA from filamentous fungi M.I. Borges M.O. Azevedo R. Bonatelli Jr. M.S.S. Felipe and S. Astolfi-Filho Departamento de Biologia Celular Universidade de ...
SDS 高盐法(方案1) 具体步骤: 称取1g 土壤放入研钵中倒入适量的液氮立即研磨;再倒入适量的液氮研磨重复3 次使土壤颗粒研成粉末; 将13.5 ml 提取缓冲液(0.1 mol/L磷酸盐 0.1 mol/L EDTA 0.1 mol/L Tris-HCl 1.5 mol/L NaCl 1.0 % CTAB) 和50μl蛋白酶K(10 g/L ) 与5 g 土壤置于50 m ...
目的： 在体外连接组装而成的重组DNA分子只能转入合适的受体细胞，才能大量地进行复制、增殖和表达。通过实验学会重组DNA转化的最基本的操作以及如何提高转化效率的基本思路。 原理： 带有外源DNA片段的重组体分子在体外构建成后，需要导入适当的宿主细胞内进行繁殖或表达出具有一定生物活性的蛋白。能够作为重组体转化的受体，主要有动物细胞、植物细胞、微生物细胞等。导入受体细胞的途径重要有转化（转染），显微注 ...
Abstract: Single strand conformational polymorphism (SSCP)is the most widely used PCR-based methods for point mutation detection. The abnormal band found by SSCP analysis is normally verified ...
Kitto Lab The University of Texas at Austin http://research.cm.utexas.edu/bkitto/Kittolabpage/Protocols/Microbiology/electroporation.html This procedure prepares glycerol stock cultures of bacteria f ...
Kitto Lab The University of Texas at Austin http://research.cm.utexas.edu/bkitto/Kittolabpage/Protocols/Microbiology/ethanolPpt.html This procedure allows the concentration of DNA samples from dilute ...
申海鹰 周元国（第三军医大学野战外科研究所分子生物学中心，重庆400042） 摘要 疾病基因的分离和克隆 是功能学的研究热点，具体策略的选择取决于疾病背景资料的掌握程度，为能快速、准确地克隆 出目的基因，本文介绍两类常用的基因克隆 策略――定位克隆 策略、功能策略――及其主要方法，如：家系连锁分析、等位基因共占法、人群相关分析法、抑制性消减杂交、差示反转录PCR、差异消减显示法、代表性差异分析法、 ...
1 概 述 核酸的分子杂交(molecular hybridization)技术是目前生物化学和分子生物学研究中应用最广泛的技术之一，是定性或定量检测特异RNA 或DNA 序列片段的有力工具。它是利用核酸分子的碱基互补原则而发展起来的。在碱性环境中加热或加入变性剂等条件下，双链DNA 之间的氢键被破坏(变性)，双链解开成两条单链。这时加入异源的DNA 或RNA (单链)并在一定离子强度和温度下保温 ...
原理 DNA 以核蛋白形式存在于细胞核中，制备 DNA 的原则是既要将 DNA 与蛋白质、脂类和糖类等分离，又要保持 DNA 分子的完整。蛋白酶K 及链霉蛋白酶 E 的应用使这两个原则得到了保证。 蛋白酶K 或链霉蛋白酶 E 均为广谱蛋白酶，其重要特性是能在 SDS 和 EDTA 存在下保持很高的活性。在匀浆后提取 DNA 的反应体系中， SDS 可破坏细咆膜、核膜，并使组织蛋白与 DNA 分子分 ...
LiAc/SS-DNA/PEG TRANSFORMATION TRAFO Efficiency: up to 22 million transformanst/ µg of plasmid DNA HIGH EFFICIENCY TRANSFORMATION Please cite: Agatep R. R.D. Kirkpatrick D.L. Parchaliuk R ...
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