DNA实验技术

方法一： 效率非常高，一般可到1undefined8，好时可到1undefined9，特别适宜于大片段与文库构建及珍贵材料的连接转化。 实验试剂： A液：1M，MnCl2： B液：1M，HEPES，pH=6.2-6.8，用无菌水配，配后不需灭菌； C液 称取CaCl2 0.10g，KCl 1.18g，全部转入细口试剂瓶，然后加入46ml三蒸水，轻轻振荡使所有组分充分溶解。将瓶塞盖上并用牛皮纸、棉线包扎，然后放入灭菌锅1 ...

I need to purify 20mer from a mixture containing 200mer and 20mer. How to purify this small fragment? Thanks~~ -HS- -------------------------------------------------------------------------------- Hi ...

Protocol for Sequencing Very Difficult Regions Ziyun Yao and B.A. Roe 02-14-2002 Target DNA (SAP-ExoI cleaned PCR 7-deaza-dG containing product) ...

Principle The nucleic acids contained within the gel slice are electrophoresed out of the gel funneled down into the v-shaped channel and trapped within a high salt cushion resting at the bottom of th ...

Hahn Lab，The Fred Hutchinson Cancer Research Center and Howard Hughes Medical Institute http://www.fhcrc.org/science/labs/hahn/methods/mol_bio_meth/BigDye Protocol.pdf ...

在制作酶谱、测定序列、制备探针等实验中需要高纯度、高浓度的质粒DNA为此需要大量提取质粒DNA。 许多年来，一直认为在氯霉素存在下扩增质粒只对生长在基本培养基上的细菌有效，然而在带有pMBl或ColEl复制子的高拷贝数质粒的大肠杆菌菌株中，采用以下步骤可提高产量至每500ml培养物2-5mg质粒DNA，而且重复性也很好。 1、将30ml含有目的质粒的细菌培养物培养到对数晚期（OD600约0.6)。 ...

Part A: Purifying nuclear pellets. 1) Add 50-60ul fresh packed red blood cells (RBC) to 700ul PBS. Mix by inversion. 2) Add 700-800ul Lysis buffer. Close tube. Vortex briefly (2-5s) 3) Centrifuge for ...

一、原理 基因组DNA 文库包括了基因组所有顺序的随机克隆片段。一个好的基因组DNA 文库的大小应足够大，以便包括所有的基因DNA 顺序。DNA 克隆片段也应足够大，其中包括整个基因、连接基因及它们稳定形式所要的侧翼顺序。为了获得高的克隆效率和较大的插入片段，λ噬菌体载体和质粒经常被使用构建基因组DNA 文库。λ噬菌体文库易于操作，噬菌体载体上有多克隆位点。&lambd ...

Important Notes Before Starting • New users are strongly recommended to read the QIAGEN handbook before starting the procedure. •Before using the kit for the first time dissolve the lyophi ...

Hi Dear All Have you ever tried to ligate 3 DNA fragments with sticky ends into Vector(5.2kb). A. Fragment: 3.0kb with HindIII/ Bam HI cut from a Vector. B. Fragment: 0.5kb BamHI / XbaI cut fro ...

Hi I am a Biochem student.I am extracting DNA from plants that have been exposed to contaminants then using restriction enzymes to see if there is any change.I was wondering if there was a ...

基因工程又称遗传工程、DNA 重组技术、分子克隆等。它是七十年代在分子生物学发展的基础上形成的新学科。所谓基因工程，就是在分子水平上，用人工方法提取（或合成）某一生物的遗传物质，在体外切割，拼接和重新组合，然后通过载体把重组的DNA 分子引入受体细胞，使外源DNA 在受体细胞中进行复制和表达。按人们的意愿定向创造生物新性状，使之稳定地遗传给下一代。所以基因工程具有广阔的应用前景，即能为工农业生产和 ...

Southern Blotting: Detection via Chemiluminescence (BM's Genius System) Modified to include the use of CSPD for chemiluminescent detection! This is the method we are currently using for Southern blo ...

涂布棒在酒精蘸一下，然后烧一下，能不能保证把所用的菌烧死？ 参考见解：涂布棒可以在酒精中保藏，但是酒精不能即时杀菌。蘸了酒精后再烧一小会，烧的是酒精而不是涂布棒。建议涂布棒还是干烧较长时间后，冷却了再涂。同时作多个转化时，应用几个涂布棒免得交叉污染。 原先测序鉴定没有问题的细菌，37℃摇菌后发现质粒大小或序列出现异常? 参考见解：这种情况出现的几率较小，常出现在较大质粒或比较特殊的序列中。解决办 ...

Isolation of Mouse genomic DNA Kill mouse by cervical luxation and dissect liver. Add to a 50ml tube and place on liquid nitrogen. Grind to a powder under liquid nitrogen using a mortar and pe ...

(一) ...

实验目的 1.了解转化的概念及其在分子生物学研究中的意义。 2.学习氯化钙法制备大肠杆菌感受态细胞的方法。 3.学习将外源质粒 DNA 转入受体菌细胞并筛选转化体的方法。 实验原理 转化( Transformation )是将异源 DNA 分子引入另一细胞品系，使受体细胞获得新的遗传性状的一种手段，它是微生物遗传、分子遗传、基因工程等研究的基本实验技术。 转化中的受体细胞： 转化过程所用的受体细胞 ...

-Elaine Pinheiro and Aurora Burds Connor MIT Jan2006 This protocol works very well with Hybond-XL membrane from GE Healthcare (formerly Amersham). 1) Digest your genomic DNA using about 10 μg per r ...

CpG islands can be variable in length. Anyone know by what percentage range they can typically vary? I can't find much of any herlp on Google. Cheers Chris -Chris Harris- ---------------------------- ...

Does somebody know how to increase DNA concentration from a too weakly concentrated DNA sample obtained with a Qiagen Extraction Kit (the elution buffer was ddH2O) ?? -BATY- ------------------------- ...