DNA实验技术

一. 植物遗传转化的方法 植物遗传转化技术可分为两大类：一类是直接基因转移技术，包括基因枪法、原生质体法、脂质体法、花粉管通道法、电激转化法、PEG介导转化方法等，其中基因枪转化法是代表。另一类是生物介导的转化方法，主要有农杆菌介导和病毒介导两种转化方法，其中农杆菌介导的转化方法操作简便、成本低、转化率高，广泛应用于双子叶植物的遗传转化。 二.农杆菌介导的基因转化方法 （一）农杆菌的Ti质粒与 ...

定位克隆（positoinal cloning），又称图位克隆（map-based clonig），1986年首先由剑桥大学的Alan Coulson提出。用该方法分离基因是根据功能基因在基因组中都有相对较稳定的基因座，在利用分离群体的遗传连锁分析或染色体异常将基因伫到染色体的1个具体位置的基础上，通过构建高密度的分子连锁图，找到与目的基因紧密连锁的分子标记，不断缩小候选区域进而克隆该基因，并单明 ...

Submission Details: *Dr. Simon DawsoundefinedDepartment of BiochemistrundefinedUniversity of NottinghaundefinedU.K.*17:0undefined22/1/96. Database: Method/Protocol-->Spin column purification can be used to change buffers with ...

【基本原 ...

In situ immunodetection of 5-methylcytosine (5-mC) on squashed cells using anti-methylcytosine Cross-references are to Schwarzacher & Heslop-Harrison 2000. Practical in situ Hybridization. Bios Ox ...

DNA微阵列技术（m ...

Hi....I need a prot℃ol for extracting DNA from hair/roots...(specifically horse)...and any additional information such as ?storage pr℃edure/timing/etc....thanks.... -tree- --------------------------- ...

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根据WHO资料，全球范围内恶性肿瘤是人类仅次于心脑血管病的第二大死亡原因，占总死亡人数的22%，并逐年增加。 10种常见肿瘤：胃癌、肝癌、食管癌、结直肠肛门癌、白血病、子宫颈癌、鼻咽癌、乳腺癌和膀胱癌。 肿瘤的早期发现、早期诊断、早期治疗是患者获得长期生存的最主要途径。以肝癌为例，肿瘤直径＜2cm，5年生存率几乎100%；直径每增加1cm，5年生存率下降20%。肿瘤诊断三大支柱是图像诊断（包括B ...

Higuys : I have a problem about mutagenesis. I want to mutate 2 base pairs in plasmidand use stratagenne mutagenesis protocol.Design 2 oligos as primers.After I run PCR I only see one band less than ...

试验原理： 煮沸法是根据Holmex和Quigley(1985)的方法改进而成的。在基因工程中， DNA 分子的切割是由限制性内切酶来完成的。限制性内切酶能识别特定的 DNA 序列，在一定的条件下切断双链 DNA 。限制性内切酶的作用效率是受多方面因素影响的，如反应温度，缓冲体系，离子种类与浓度， DNA 的纯度和甲基化程度等。对 DNA 进行酶切时，首先要选择适合的缓冲液。对于单酶切，应选用该酶 ...

摘要：通过PCR，从E.coli K12 Y1090株系中扩增获得glgC基因，插入pUC19的PstI和SacI 位点之间，得到重组质粒pAGP。对所克隆的glgC基因进行全序列测定，结果表明，与已发表的序列相比，有7个核苷酸发生了改变，核苷酸顺序的同源性为99.4 %; 推导的氨基酸序列的同源性为99.2 % 其中，第296位由赖氨酸变为谷氨酸。通过寡核苷酸介导的定点诱变，将第1007位核苷酸 ...

・CaCl2 感受态细胞的制备的实验步骤 1．前夜接种受体菌（ DH5α或 DH10B），挑取单菌落于LB培养基中37℃摇床培养过夜（约16小时）； 2．取 1ml过夜培养物转接于100ml LB培养基中，在37℃摇床上剧烈振荡培养约2.5-3小时（250-300rpm）； 3．将 0.1M CaCl2 溶液置于冰上预冷； 以下步骤需在超净工作台和冰上操作 4．吸取 ...

采用粘末端连接必须对目的DNA分子和载体分子进行酶切以获得相应的粘末端进行连接。酶切可以是单酶切也可以是双酶切。单酶切操作比较简单，但双酶切如果两种酶所用缓冲液成分不同（主要是盐离子浓度不同）或反应温度不同，这时可以采用如下措施解决：1）先用一种酶切，然后乙醇沉淀回收DNA分子后再用另外一种酶切；2）先进行低盐要求的酶酶切，然后添加盐离子浓度到高盐的酶反应要求，加入第二种酶进行酶切；3）使用通用缓 ...

Rapid elution of DNA from agarose gels James Movius Hahn Lab Last modified Sun Nov 1 1998 A method of quickly purifying agarose gel DNA fragments for use in subsequent reactions such as further restr ...

Author: Suzanne Gerttula Date: March 141994 1.Digest between 1 and 10 μg Genomic DNA. I digest at 37 C for about six hours over the course of a day. Spin down briefly heat to 65℃ for 10 min ...

Equilibriation of Phenol Caution: Phenol and chlorofom are very toxic. Wear gloves protective eye wear and lab coat. Use hood. Phenol dissolves and denatures proteins. It dissolves protein that is ti ...

一、个体识别 个体识别以同一认定理论为指导原则。通过对物证检材 的遗传标记作出科学鉴定，依据个体特征来判断前后两次或多次出现的物证检材是否同属一个个体的认识过程。第一次出现的往往是与案件事实有联系，并且是在案发现场留下该个体的生物检材，如血痕、精斑等。是未知个体，是要查找的对象，称“被寻找个体”。 个体第二次出现一般是侦查或调查活动的结果，第二次出现的个体一般是已知身份的 ...

Description This method was suggested in a BRL "Focus" article several years ago (Zeugin & Hartley 1985). It is a useful way to avoid coprecipitation of proteins and accumulation of salt ...

In the hood: 96 well dish with bacteria titertech microtubes glass pipette Remove colonies from each well using the titertech and place them into the cover Pipette up and down to thoroughly mix the co ...