In t ...
Jacks Lab Center for cancer researchMIT 1. Each tail should be in a clean eppendorf tube. 2. Add 500µl of tail lysis buffer containing Proteinase K (PK) to each tube. 3. Incubate tai ...
一、导论 已经提出过许多方法用于从细菌中提纯质粒DNA,这些方法都含有以下3个步骤: 细菌培养物的生长。 细菌的收获和裂解 质粒DNA的纯化。 (一)细菌培养物的生长 从琼脂平板上挑取一个单菌落,接种到培养物中(有含有行当抗生素的液体培养基中生长),然后从中纯化质粒,质粒的提纯几乎总是如此。现在使用的许多质粒载体(如pUC系列)都能复制到很高的拷贝数,惟致只要将培养物放在标准LB 培养基中生长 ...
一.概述:基因敲除是自80年代末以来发展起来的一种新型分子生物学技术,是通过一定的途径使机体特定的基因失活或缺失的技术。通常意义上的基因敲除主要是应用DNA 同源重组原理,用设计的同源片段替代靶基因片段,从而达到基因敲除的目的。随着基因敲除技术的发展,除了同源重组外,新的原理和技术也逐渐被应用,比较成功的有基因的插入突变和iRNA ,它们同样可以达到基因敲除的目的。二.实现基因敲除的多种原理和方法 ...
实验目的 ...
DNA 限制性内切酶消化是基因分析中的关键步骤。内切酶是最关键的工具酶。限制性内切酶是一类具有严格识别位点,并在识别位点内或附近切割双链 DNA 的脱氧核糖核酸酶。 酶单位规定为:在最适反应条件下 1 小时完全消化 lμg λDNA 的酶量为 1 个单位。需注意酶单位数是以切割线性 DNA 为标准定出的。消化其它种 DNA 则应根据 DNA 分子大小、形状适当增加或减少所需 ...
1. A ...
Hey I am analyzing the methylation status of two regions: one ecompasses 500bp the other is around 800bp. Could I just designed primers at flanking sites and amply these two regions? I found usually o ...
一.实验目的 1.掌握DNA 指纹图谱技术的概念、原理和基本操作过程 2.学习DNA 的限制性酶切的基本技术 3.掌握琼脂糖凝胶电泳的基本操作技术,学习利用琼脂糖凝胶电泳测定DNA 片段的长度,并能对实验结果进行分析。 二.实验原理 1984 年英国莱斯特大学的遗传学家 Jefferys 及其合作者首次将分离的人源小卫星DNA 用作基因探针,同人体核DNA 的酶切片段杂交,获得了 ...
HiI'm starting to work whit 5' cytidine on plants. I want to know if it's possible to prepare a stock solution to store it at -20C. In that conditions the drug lose the desmetilant capacity?I've wrote ...
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A gl ...
DNA Fragment Purification from Agarose or Acrylamide For fragments from 200 bp to 10 kb the agarose purification is ideal.For smaller fragments (20 bp to 400 bp)the acrylamide purification is preferre ...
1.grow plants in trays of 96 and leave two spots open (for the PCR controls) 2.harvest 1 to 2 young and green leaves (1cm2 /plant at rosette stage if possible). Use 96 well plates (1 or 2ml E&K p ...
Purpose: The method is used to clone smaller portions of inserts (up to 15 kb in size) which previously have been cloned in YACs phage cosmids or other plasmids. Time required: &nbs ...
关于如何选择基因诊断技术有两层含义:第一,什么情况下选择基因诊断;第二,如果选择了基因诊断,应当采用哪一种基因诊断技术。以下分别介绍。1.选择基因诊断的依据。 (1)基因诊断可以弥补免疫学检测技术的缺陷 免疫学诊断主要依赖于抗原抗体反应,应用于临床只能在体内产生抗体以后,也就是病程的中期及晚期,不能应用于早期诊断,往往由于地区的流行及 ...
近日撰写了一个关于核酸抽提的基础现状的草稿;没有去找参考书润色,所以会有点凌乱。首先声明的是:这篇东西只为有一定核酸抽提基础知识的人准备,同时也将会及时修改。那些分子生物学的过客,最好不要看本文;一是我的思维有点跳跃,二则是没有必要糟蹋自己的时间。 写这篇东西的另外一个原因是,我一直在思考如何简化经典的无介质的核酸抽提程序。 ...
Pick colonies into 0.5ml of SD-Leu (or other appropriate SD medium) Vortex for 1min Leave to grow O/N for 18-24h at 30℃ 230-250rpm (best in 5ml bijou) Spin yeast culture at 13000rpm for 5 min (microfu ...
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