DNA实验技术

摘要目的：介绍多肽、蛋白质类药物缓释剂型的研究进展。方法：综述了近年来埋植剂（细棒型和可注射埋植剂） 及微球注射剂（多肽微球和疫苗微球注射剂） 研究与开发的品种及优缺点；介绍了两种实用的微球制备方法。结果与结论：以生物可降解聚合物为囊材的微囊化技术是开发研制控（缓） 释多肽、蛋白质微球注射剂的有效的途径，且颇有发展前途。

一、目的 为促进我国丙型肝炎病毒抗体诊断试剂质量的进一步提高，研制了第5套丙型肝炎病毒抗体诊断试剂国家参考品。 二、材料与方法 1、样品来源 样品来自国内13省市，从几十万个供血员中进行筛选。选取初筛中可能为抗HCV阳性或ALT异常的样品，及A值在抗HCV EIA试剂临界值附近的弱阳性或高值阴性样品；用多种试剂对收集到的2000多份血样进行复检，从中选出317份进行HCV RNA、抗HCV抗体谱、 ...

1、DNA的分子大小及构型 不同构型DNA的移动速度次序为：供价闭环DNA（covalently closed circular，cccDNA）>直线DNA>开环的双链环状DNA。线状双链DNA分子在一定浓度琼脂糖凝胶中的迁移速率与DNA分子量对数成反比，分子越大则所受阻力越大，也越难于在凝胶孔隙中蠕行，因而迁移得越慢。当琼脂糖浓度太高时，环状DNA（一般为球形）不能进入胶中，相对迁 ...

DNA分子带负电，从琼脂糖凝胶的负极向正极泳动，速度依赖于其分子质量。小的紧密的DNA分子的较大伸展片断容易穿过琼脂糖介质。依据所要分离的DNA分子的大小来选择琼脂糖的浓度，例如质量浓度3mg/ml的琼脂糖用来做DNA大片段电泳（>20 000碱基）而0.8%只能电泳小的片断。 要注意以下几点： 1、 用移液抢将样品加至点样孔。每孔点样的体积一般少于25ul，因此吸取每一个样品时，操作要稳当 ...

主要试剂： 核酸电泳缓冲液有三种，即Tris-硼酸(TBE)、Tris-乙酸(TAE)和Tris-磷酸(TPE).TBE与TPE缓冲容量高，DNA分离效果好，但TPE在DNA段回收时含磷酸盐浓度高，容易使DNA沉淀.TAE缓冲容量低，但价格较便宜，因而推荐选用TBE.缓冲液中的EDTA可螯合二价阳离子，从而抑制DNA酶的活性，防止PCR扩增产物降解。 核酸分离一般用连续缓冲体系，常用的有： 1) ...

指示剂： 核酸电泳常用的指示剂有溴酚兰和二甲苯青及银染色.溴酚兰在碱性液体中 呈紫兰色，在0.6%、1%、1.4%和2%琼脂糖凝胶电泳中，溴酚兰的迁移率分别与1Kb、 0.6Kb、0.2Kb和0.15Kb的双链线性DNA段大致相同.二甲苯青的水溶液呈兰色，它在 1%和1.4%琼脂糖中电泳时，其迁移速率分别与2Kb和1.6Kb的双链线性DNA大致相似。 指示剂一般与蔗糖、甘油或聚蔗糖400组成载样缓 ...

前言自从1963年MERRIFIELD发展成功了固相多肽合成（SPPS）方法以来，经过不断的改进和完善，到今天这个方法已成为多肽和蛋白质合成中的一个常用技术，表现出了经典液相合成法无法比拟的优点。 固相合成的主要设计思想是：先将所要合成肽链的羟未端氨基酸的羟基以共价键的结构同一个不溶性的高分子树脂相连，然后以此结合在固相载体上氨基酸作为氨基组分经过脱去氨基 ...

多肽药物在治疗上的重要性越来越引起广大药学工作者的重视。根据肽链的构成可将多肽分为同聚肽(Homomeric)和杂聚肽(Heteromeric)两大类前者完全由氨基酸组成后者是由氨基酸部分和非氨基酸部分组成的如糖肽。根据肽键的结构又分为直链肽和环肽。其中直链肽的研究最为广泛和深入尤其在直链肽的合成技术方面无论是液相法还是固相法都已成熟。虽然许多直链肽体外具有很好的生物活性和稳定性但是进入体内后活性 ...

Agarose gel electrophoresis (2) is employed to check the progression of a restriction enzyme digestion to quickly determine the yield and purity of a DNA isolation or PCR reaction and to size fraction ...

ICP的工作原理： 感耦等离子体原子发射光谱分析是以射频发生器提供的高频能量加到感应耦合线圈上，并将等离子炬管置于该线圈中心，因而在炬管中产生高频电磁场，用微电火花引燃，使通入炬管中的氩气电离，产生电子和离子而导电，导电的气体受高频电磁场作用，形成与耦合线圈同心的涡流区，强大的电流产生的高热，从而形成火炬形状的并可以自持的等离子体，由于高频电流的趋肤效应及内管载气的作用，使等离子体呈环状结构。 ...

一、目的 掌握醋酸纤维素薄膜电泳法分离带电颗粒原理；观察核苷酸类物质的紫外吸收现象。 二、原理 带电粒子在电场中向着与其自身带相反电荷的电极移动的现象，称为电泳。控制电泳条件（如pH 等），使混合试样中的不同组分带有不同的净电荷，各组分在电场中移动的速度或方向各不相同，从而达到分离各组分的目的，这就是电泳分析法。以醋酸纤维素薄膜作支持物进行电泳分析的方法称为醋酸纤维素薄膜电泳法。 在pH4.8 电 ...

(The following protocol is for use with the LIBRARY transformation only) Day 1: Grow an overnight culture of a single colony of yeast transformed with bait vector in 2.5 ml of SD-Trp medium Day 2 1.Th ...

This section describes how to amplify a library with minimal danger of substantially reducing its diversity.Amplification is accomplished by infecting fresh cells with a portion of the librarygrowing ...

问：请问哪位仁兄能告知一下EDTA-胰蛋白酶的配制。急用！多谢！ 答：1、胰酶是0.25%这是质量体积比，就是说0.25g胰酶溶于100ml PBS注意，尽量不要用水来溶，因为要保持渗透压。 2、EDTA的工作液溶度是0.02%－0.1%，根据细胞消化的难易程度自己调整。EDTA并不是必须的，容易消化的细胞可不加。EDTA对细胞贴壁性有影响，因此使用时要甚重。如果影响贴壁，但消化时必须要用，那么在 ...

1、基本原理所谓平衡饱和，是指抗原和抗体反应达到再不结合，也不解离的平衡状态，称为饱和状态，即平衡饱和。所以，有人称此为饱和分析法。这意味着抗原或被测抗原、标记抗原、抗体三者一起温育。 2、加样程序一般先加标准物或被测样品，再加抗血清，最后加标记物。这样的顺序是让标准物或被测物与抗体有短暂的结合，提高抗原的竞争抑制能力。 在小分子半抗原的放射免疫分析中，标记抗原和未标记抗原与抗体结合的亲合力常常是 ...

Purpose The protocol describes how to prepare human tonsil lysate for use in purification of ICAM-1LFA-1and PNAd. Materials Safety Equipments Lab Coat Latex Gloves Face Mask Bench Paper Fresh human to ...

YEAST TWO-HYBRID SCREEN WITH LIBRARY AND BAIT (The following protocol is for use with the LIBRARY transformation only) Day 1: Grow an overnight culture of a single colony of yeast transformed with bai ...

Smith LabDivision of Biological SciencesUniversity of Missouri http://www.biosci.missouri.edu/smithgp/PhageDisplayWebsite/AmplifyingLibrary.doc This section describes how to amplify a library with min ...

动物来源：1921年C.C.Little用Lathrop小鼠作近亲培育时，用No.57雄鼠和No.52雌鼠交配，培育成C57。在C57中将毛色呈黑色的进行固定，培育成C57BL。1937年Little将维持的C57BL第六组亚系定名为C57BL/6，将第十组亚系定名为C57BL/10，继而分别维持至今。1947年从Little引入到美国Jackson Lab.，形成C57BL/6J；1951年从J ...

生物科学正迅速地演变为一门信息科学。最明显的一个例子就是目前正在进行的HGP（human genome project），最终要搞清人类全部基因组的30亿左右碱基对的序列。除了人的遗传信息以外，还有其它生物尤其是模式生物（model organism）已经或正在被大规模测序，如大肠杆菌、啤酒酵母、秀丽隐杆线虫以及中国和日本科学家攻关的水稻基因组计划。但单纯知晓生物基因组序列一级结构还远远不够，还必 ...