DNA实验技术

QIAGEN Plasmid plus Kit——超快速纯化多至10 mg转染级别纯质粒

1. 从平板上挑单菌落，越多越好（20-30），放于1.5ml离心管中，加1.2ml 左右的液体LB培养基，摇3-5h. 200rpm。 2. 用1.5ml离心管收集一定量（1ml，留0.2ml）含有重组质粒的菌液，10000rpm， 30sec，弃上 清，留管底沉淀（应留有一定量（0.2）的菌液放于4度中，以备摇菌）。 3. 加入30-50ul TE ，重悬菌液，混合均匀。 4. 加入25ul ...

基因工程（gene engineering）或称重组DNA技术（recombinant DNA technique）：是指将获取的目的基因片段在体外与载体DNA通过入工剪切、编接构成DNA重组体，将其导入受体细胞并使之无性繁殖（称之为“克隆”）和表达，这种有目的的应用分子克隆技术，人为的改造基因，改变生物的遗传性状的系列过程，总称为基因工程。

FISH（即荧光原位杂交）技术作为分子诊断的重要工具，在科研和临床诊断领域都有着广泛的应用。FISH检测是利用荧光基团标记DNA探针，再将标记的DNA探针与样本DNA进行原位杂交，最后在荧光显微镜下对荧光信号进行计数，以此作为诊断的依据。FISH的操作简便快捷，结果直观准确，因此FISH成了许多疾病诊断的首选工具。下面我们将从探针的设计，样本的制备，原位杂交和检测结果的观察等几个方面简单介绍FIS ...

PCR产物的电泳鉴定

原核表达之目的基因克隆

快速获取微生物基因组DNA在基因克隆、重组子的筛选以及分类学中十分必需。来自ABGENT的技术人员向您介绍一种简易快速提取细菌（含革兰氏阳性和革兰氏阴性细菌）和酵母染色体DNA的方法。

用离子交换层析法从DNA中去除溴化乙锭

用有机溶剂抽提法从DNA中除去溴化乙锭

CsCl-溴化乙锭平衡梯度离心纯化闭环DNA：不连续梯度法

用牙签从琼脂培养基上挑取的菌落可直接用于制备质粒DNA。

经Triton X-100、溶菌酶和加热处理可从大量（500ml）细菌培养物中分离质粒DNA，所获得的质粒通过柱层析或CsCl-溴化乙锭梯度离心可进一步纯化。

经Triton X-100、溶菌酶和加热处理可从小量（1～2ml）细菌培养物中分离质粒DNA所获得的质粒则可以用电泳或限制性内功核酸酶消化的方法鉴定；经PEG处理进一步纯化后，其可以用做DNA测序反应的模板。

This protocol adapts the method of Williams and Bartel (Nucleic Acids Res. 23:4220) to generate single-stranded DNA suitable to go directly into the emulsion PCR step of 454 pyrosequencing. The protocol was first performed by Wendy Johnston (Bartel lab).

Gateway技术提供以下可能：通过去除冗长的亚克隆步骤节省您的时间，同时将您的基因转移到多个表达系统……

先用细胞裂解液对已制备好的组织匀浆充分裂解，然后用蛋白酶去除其中的蛋白，再用氯仿一次抽提（无需用酚抽提）、预备液沉淀、RNase去除RNA、乙醇再沉淀即可得到完整DNA。该方法适用于从人或动物的各种组织、血液、培养细胞、G+/G-细菌中快速抽提基因组DNA。

目前，免疫细胞化学研究中常用的固定剂仍为醛类固定剂，其中以甲醛类和戊二醛最为常用。在此，简要介绍几种目前较为常用和推荐的固定剂，以供读者选用。

详细的有关禽流感病毒实验室分离及各项实验方案，包括标本的采集与处理、病毒分离、病毒鉴定三大部分。

多数基因表达分析靠多细胞反应或扩增达到观察目的。原位分析绕过这些过程得到单细胞表达信息，它仍是核酸定位的利器。

细胞计数法是用来计数细胞悬液中细胞数量的一种方法。一般利用计数板（血球计数板）进行。即可用于分离（散）细胞培养接种前计数所制备的细胞悬液中的细胞数量，也可用于对培养物的细胞数量进行计数。不论计数的对象如何，均须制备分散的细胞悬液。 一、步骤 1、制备细胞悬液：对于悬液培养的细胞，可直接进行下面的步骤2（计数与计算过程）。如果计数对象为贴壁生长的细胞，首先需将培养物按如下步骤制备成细胞悬液。 1）、 ...