DNA实验技术

BCA 蛋白定量法是实验室常用的蛋白质定量方法。Invent 所有蛋白提取试剂盒提取的蛋白均可使用 BCA 法进行定量！那么今天小编就手把手的教大家该如何用 BCA 来定量！BCA 法原理碱性条件下，蛋白将 Cu2+还原为 Cu+，Cu+与 BCA 试剂相互作用形成紫色的络合物，该水溶性的复合物在 562nm 处显示强烈的吸光性，吸光度和蛋白浓度在广泛范围内有良好的线性关系，因此根据吸光值可以推算出蛋白浓度。实验操作具体步骤1. 梯度稀释牛血清白蛋白（BSA）标准品（ ...

按时间顺序整理1、 细胞房和生物安全柜（或超净工作台）先开紫外照射30min。作用：对环境灭菌（空气）。（备注：如果着急，至少也要开15分钟）在做实验之前考虑好需要哪些物品。开始照射之前，将所需要用到的物品都放到生物安全柜（或超净工作台）里面。常用移液枪或电动移液器等，需要在工作台上放置一套专用设备。细胞培养箱一般都已经调整好。定期留意一下二氧化碳是否足够。不够及时更换。2、 显微镜需要定期消毒酒精擦拭。注意：显微镜一般都放在细 ...

做了 5 年的 MTT 实验 ，耗费了上万块 96 孔板。有成功的喜悦，有失败的沮丧，有好多话要对各位实验同仁说。在这之前，我们先回顾一下 MTT 的原理及操作步骤。实验原理MTT 是一种接受氢离子的染料，可作用于活细胞线粒体中的呼吸链，在琥珀酸脱氢酶和细胞色素 C 的作用下，生成蓝色的 formazan 结晶。formazan 结晶的生成量仅与活细胞数目成正比（死细胞中琥珀酸脱氢酶消失，不能将 MTT 还原，无法形成结晶），且该结晶溶解于 DMSO。利用酶标仪测定波长 490 nm 处的光密度 OD ...

验地点：某动物研究所实验样品：新鲜植物叶片（水稻、黄瓜、苜蓿等）实验仪器：鼎昊源TL2010S中通量组织研磨仪TL2010S 中通量组织研磨仪,可编程,操作简单,适用各种样品,避免交叉污染，提高实验数据重复性。 配合独有的冷冻操作配件,方便组织核酸提取。 同样的研磨效果省时、省力将您从繁杂手工研磨中解脱出来，100 多名真实客户好体验。 实验步骤：1、在 2ml 圆底离心管底放入剪成小段的新鲜苜蓿叶片，每管样品量不超过单管体积的 1/5；2、在离心管中 ...

ChIP（染色质免疫共沉淀，Chromatin Immunoprecipitation）技术是现代分子生物学研究，特别是表观遗传学的机制研究中一种非常重要的研究手段。ChIP 技术的主要目的是研究目的蛋白（包括： 修饰组蛋白， 转录因子， 辅因子及其他染色质蛋白）在染色质上的定位及丰度分析。ChIP 技术可以帮我们解答特异性修饰组蛋白或转录因子在染色质上是如何分布的，通过分析它们的染色质定位可以为解码目的蛋白的功能提供帮助。以组蛋白 ...

上一篇分享了做好 ChIP 实验需要注意的一些细节。但是注意了这些细节，按照流程完成了实验就结束了吗？当然没有，接下来的问题又来了。得到了目的片段 DNA，但是怎么判断得到的片段是不是自己想要的呢？换句话说，怎么判断 ChIP 是不是成功呢？IP 之后的染色质经过洗脱，解交联，RNase A 和 Protease K 处理，抽提或 DNA 纯化柱回收（这些步骤类似于前面的检测超声效果）就可以获得目的蛋白结合的 DNA。后续的这些步骤对于有分子生物学基础的人来说并不会 ...

CRISPR：细菌体内一串规律成簇的间隔短回文重复 (Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats)DNA 序列，是大多数细菌及古细菌中一种获得性免疫系统。现在使用的 CRISPR/Cas 9 系统是由最简单的 type II CRISPR 改造而来，该系统由单链的 guide RNA 和有核酸内切酶活性的 Cas 9 蛋白构成。原理此系统的工作原理是 crRNA(CRISPR-derived RNA) 通过碱基配对与 tracrR ...

导语：来自美国埃默里大学医学院、中国科学院和暨南大学的研究人员在在9个月大的亨丁顿舞蹈症模式小鼠中利用通过一种病毒载体运送的CRISPR/Cas9切除它们的脑细胞中的mHTT基因的一部分。几周后，在大脑中接受这种病毒载体注射的地方，这些蛋白聚集物几乎消失了。此外，这些小鼠的运动能力得到改善，不过没有恢复到健康小鼠的水平。相关研究结果于2017年6月19日首次发表在Journal of Clinical Investig ...

实验准备：1. 石蜡切片或石蜡块样本2. 无水乙醇，二甲苯3. 移液器及配套RNase-Free无菌枪头（200 μl ，1 ml）； 1.5 ml，2.0 ml 离心管（RNase-free）4. 涡旋振荡器，台式低温离心机，金属浴/水浴实验准备-试剂盒准备：第一次使用前应在漂洗液RW中加入无水乙醇，加入量请参见瓶上标签。在加入无水乙醇后在瓶身做好标记。

实验准备：1. 血清/血浆样本（本实验以血清为例）2. 无水乙醇3. 移液器及配套无菌枪头（10 μl， 200 μl ，1ml），1.5 ml离心管4. 涡旋振荡器，金属浴/水浴，台式离心机实验准备-试剂盒准备：使用前先在漂洗液PW和GD中加入无水乙醇，加入体积请参照瓶上的标签。Carrier RNA储存液的配制第一次使用 Carrier RNA 时，请将 Carrier RNA（310 µg）溶解在310 µl RNase-Free ddH2O中，将溶液分装储存于-20℃，此时该溶液的浓度为1 µg/ ...

实验准备：1. 抗凝全血(本实验以300 μl人的抗凝全血为例 )2. 移液器及配套无菌枪头（2.5 μl ， 200 μl ，1ml），1.5 ml离心管3. 无水乙醇，70%乙醇，干净的吸水纸4. 涡旋振荡器，金属浴/水浴，台式离心机备注：本实验以人血为例，如提取哺乳动物全血可以用此流程，如果禽类、鸟类、两栖类或更低级生物的抗凝血液，红细胞有核细胞，因此处理量为5-20 μl，当处理血样为血凝块，可选择液化柱CX1（TIANGEN，RK165）（需自备）对血凝块进行液化处理。 ...

实验准备：1. 抗凝或新鲜全血(本实验以10 ml人的新鲜全血（a）/抗凝血（b）分别为例 )2. 移液器及配套无菌枪头（2.5 μl，10 μl ，200 μl ，1ml），15 ml离心管3. 无水乙醇，70%乙醇，干净的吸水纸4. 涡旋振荡器，金属浴/水浴，台式离心机

实验准备：1. 抗凝全血(本实验以5 ml人的抗凝全血为例 )2. 移液器及配套无菌枪头（2.5 μl，10 μl ，200 μl ，1ml），15 ml离心管3. 无水乙醇，70%乙醇，干净的吸水纸4. 涡旋振荡器，金属浴/水浴，台式离心机

实验准备：1. 抗凝血 （200 μl以内抗凝全血，不足200 μl可加缓冲液GS补足体积至200 μl）2. 移液器及配套无菌枪头（200 μl ，1ml）3. 无水乙醇4. 涡旋振荡器，金属浴/水浴，台式离心机备注：本实验以人血为例，如提取哺乳动物全血可以用此流程，如果禽类、鸟类、两栖类或更低级生物的抗凝血液，红细胞有核细胞，因此处理量为5-20 μl，加缓冲液GS补足200 μl；当处理血样为血凝块，可选择液化柱CX1（TIANGEN，RK165）（需自备）对血凝块 ...

以下操作按照天根产品 DP348 血液基因组 DNA 提取试剂盒的说明书进行，所有反应现象仅适用于该产品及本文所标明的样本量。如使用其它操作流程或产品，样本量不同可能现象与本文有所差异。实验准备：1. 抗凝血 200 μl~1ml抗凝全血2. 移液器及配套无菌枪头（200 μl ，1ml）3. 无水乙醇4. 涡旋振荡器，金属浴/水浴，台式离心机备注：本实验以人血为例，如提取哺乳动物全血可以用此流程，如果禽类、鸟类、两栖类或更低级生物的抗凝血液，红细胞有核细胞，因此处 ...

实验准备：1. 干血斑 打孔器（3 mm）2. 无水乙醇3. 移液器及配套无菌枪头（10 μl， 200 μl ，1ml）4. 涡旋振荡器，金属浴/水浴，台式离心机实验准备-试剂盒准备：使用前先在漂洗液PW和GD中加入无水乙醇，加入体积请参照瓶上的标签。

实验准备：1. 石蜡切片或石蜡块2. 无水乙醇 二甲苯3. 移液器及配套无菌枪头（10 μl， 200 μl ，1ml），1.5 ml 离心管4. 涡旋振荡器，金属浴/水浴，台式离心机实验准备-试剂盒准备：使用前先在漂洗液PW和GD中加入无水乙醇，加入体积请参照瓶上的标签。

实验准备：1. 石蜡切片或石蜡块2. 无水乙醇3. 移液器及配套无菌枪头（10 μl， 200 μl ，1ml），1.5 ml 离心管4. 涡旋振荡器，金属浴/水浴，台式离心机实验准备-试剂盒准备：使用前先在漂洗液PW和GD中加入无水乙醇，加入体积请参照瓶上的标签。

实验准备：1. 口拭子2. 移液器及配套无菌枪头（200 μl ，1ml），2 ml离心管3. 无水乙醇4. 涡旋振荡器，金属浴/水浴，台式离心机注意：为了保证样本不被食物或者饮料污染，取样前 30 min内请勿进食和饮水。实验准备-试剂盒准备：使用前先在漂洗液PW和GD中加入无水乙醇，加入体积请参照瓶上的标签。

以下操作按照天根产品 DP321 快捷型植物基因组 DNA 提取试剂盒的说明书进行，所有反应现象仅适用于该产品及本文所标明的样本量。如使用其它操作流程或产品，样本量不同可能现象与本文有所差异。实验准备：1. 植物叶片2. 研钵 液氮3. 移液器及配套无菌枪头（200 μl ，1ml），1.5 ml离心管4. 异丙醇，70%乙醇，干净吸水纸5. 涡旋振荡器，金属浴/水浴，台式离心机本文版权归天根生化科技（北京）有限公司所有,仅供个人学习使用,请勿转载