DNA实验技术

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相关专题 假定你抽提 RNA 时使用到的有机试剂 - 氯仿、异丙醇、无水乙醇 - 都是国产的 (这是完全可以使用的)。我的问题是：你采取了什么措施来降低或者杜绝 RNase 的污染?具体地： 你是如何选择、预处理、使用和保存氯仿和异丙醇? 你是如何配制和保存 75% 乙醇? 坦率地讲，因为有机试剂的问题导致抽提失败，我真没有听到;或许有的问 ...

相关专题 核酸实验技术 核苷酸是生物体内核酸的重要组成构件，参与了多种代谢和调节活动，也是《生物化学》的重点知识点，其中所涉及的反应式也不少，本文对其结构、合成途径、分解代谢、以及当中所涉及的化学反应式等做详细的讲解和演示。核苷酸在人体内广泛分布，具有多种生物学功能：①核苷酸是构成核酸的基本单位，这是其最主要功能。②储存能量。三磷酸核苷酸，尤 ...

相关专题 本文展示了建立一个标准的酶切体系需要注意的13个要素，例如怎么去选择正确的酶，DNA甲基化问题，缓冲液，反应体积，反应时间和温度，终止反应，对照反应，稳定性，贮存条件等等。 一、 建立一个标准的酶切反应 目前大多数研究者遵循一条规则，即10个单位的内切酶可以切割1μg不同来源和纯度的DNA。通常，一个50μl的反应体系 ...

相关专题 不同的实验技术都是为了满足不同的实验需要，RNA转染提供了另一种有别于DNA转染的研究探索手段——直接将体外翻译的RNA、或者病毒RNA、或RNA oligos，或siRNA、甚至核糖体利用转染技术带入细胞中。由于不需要经过转录即可直接翻译，RNA转染得到的结果比DNA转染更快更直接，当然仅限于瞬时表达。RNA转染的这些特性很适合 ...

相关专题 质粒DNA的提取是DNA技术中的必备实验技能。质粒DNA上携带的基因信息可经过基因表达实验后表现出相应的性状。质粒DNA的分离提取包括了培养细胞——收集——分离纯化三大步骤。 质粒是细胞内的一种环状的小分子DNA，是进行DNA重组的常用载体。作为一个具有自身复制起点的复制单位独立于细胞的主染色体之外，质粒DNA上携带了部分的基因信 ...

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相关专题 成功走出第一步：DNA提取 1 主要配制试剂 1)0.5M Na2EDTA PH8.0 2) Proeinase K(20 μg/ul) 3)6M GuSCN 10ml GuSCN 7.2g 加D·W至10ml 水浴60℃～65℃溶解 4) 二氧化硅悬浮液(Silica susponsion、用前混匀) Silica 12g加 ...

相关专题 成功走出第一步：DNA提取 一、Chelex-100法提取生物检材中的DNA Chelex 100能有效除去非核酸有机物，主要用于提取全血或血痕、精液或精斑、混合斑、毛发、培养细胞等。但因生物样本来源不同其操作方法有所差异，以下分别介绍: (一)全血 (1)取3～10μl全血加到0.5ml离心管中，加人500μl纯水，剧 ...

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相关专题 ■ 未提出质粒或质粒得率较低：△ 大肠杆菌老化请涂布平板培养后，重新挑选新菌落进行液体培养。△ 质粒拷贝数低由于低使用低拷贝数载体引起的质粒DNA提取量低，可更换具有相同功能的高拷贝数载体。△ 菌体中无质粒有些质粒本身不能在某些菌种中稳定存在，经多次转接后有可能造成质粒丢失。例如，柯斯质粒在大肠杆菌中长期保存不稳定，因此不要频繁转接 ...

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