综述,顾名思义,就是在某一时间内,对某个领域内大量研究论文中的数据、资料和主要观点进行梳理、归纳、总结和展望,将该领域的进展和现状呈现于读者面前。综述虽然属于 “二手研究”,但能让读者在短时间内掌握某个领域的研究动态,因此有一定的学术价值。正因如此,多数学术杂志都会留出一定的版面,用于刊登综述。在过去几年,笔者曾和同事们在SCI杂志上发表过多篇综述,对于医学综述的写作有一定的心得体会。在此,笔者拟分享自己在SCI杂志上发表综述的心得体会,以期为有撰写综述计划的同行提供参考。 01、写作综述对科研新手来说是一种锤炼在已有很高造诣的专家眼中,综述的价值显然不及论著。因为论著反应了自己实实在在的科研成果,而综述只能证明自己阅读和整理了他人的研究成果。也正因如此,很多专家会在多种场合有意无意地流露出对综述的不屑。受此影响,很多科研新手也对综述写作不感兴趣。笔者认为这种思维和观念有待商榷,因为科研本身是分层次和等级的:对于掌握了大量资源,已经有很高造诣的研究者,目标当然是在高水平的杂志上发表论著;但是对于科研新手,完全可以将短期目标设定为撰写和发表一篇SCI综述。可以想象,对于刚刚涉足科研的新手
Strep-tag®:适用范围广 纯化选择多由于 His-tag 系统使用 Ni 离子,所以在纯化金属蛋白 (多数为酶) 时,可能会受到金属间交互作用的干扰,而使用 Strep-tag® 则不会出现此问题,因 Strep-Tactin® XT 与 Strep-tag® 的特异性结合不受金属离子影响。且因其温和的纯化流程,所以还能用于纯化大型蛋白、多亚基的蛋白复合体或是跨膜蛋白,并且保持蛋白功能。以 Strep-tag® 系统纯化出不同的蛋白,下图为例:依据研究项目的不同,各实验室使用不同的表达系统,最常用的有大肠杆菌、哺乳动物细胞、酵母、昆虫细胞或是植物细胞等。但若使用哺乳动物细胞来表达目的蛋白,His-tag 则不适宜,因为系统中的组氨酸会干扰其纯化表现,其他的生产商也不建议这样的使用方式 。而 Strep-tag® 系统则与这些表达系统都能互相搭配,见下图实验数据:_单一条带为纯化出来的目标蛋白全方位的蛋白质研究平台:从纯化到固定分析除了用来生产高纯度的蛋白,Strep-Tactin® XT 与 Twin-Strep-tag® 间的高亲和力更能利用来稳定的固定目标蛋白,以进行蛋白
无论是出于科研还是工业目的,成功的表达并且纯化所需的蛋白,都是进一步进行分析和研究的基础。在质上和量上有所不同,选择一个合适的纯化系统,来生产并纯化所需质和量的蛋白,值得慎重的考虑。一套合适的纯化系统,不仅可以节省时间和成本,更可以节省蛋白样品。亲和层析法将目的蛋白从其他细胞组分中纯化出来的方法多种多样。目前,最常用的方法之一是亲和层析法。在其中,通常的方法是将目的蛋白与一段特殊的短肽或蛋白,也就是亲和标签所融合。这种亲和标签针对配体有特殊的亲和力。而配体可以是固定在层析基质上的其他蛋白质,小分子或是金属。当融合有亲和标签的蛋白通过标签-配体作用结合再层析基质上时,通过洗杂步骤,即可去除掉其他的细胞成分。为了洗脱所需要的蛋白质,通过改变缓冲液的条件,如pH,或通过竞争亲和标签和配体连接的方法来进行。但怎样的纯化是较为成功的呢?仅达到所需的质量量级,如毫克级(或克级)即可满足吗?这些并不简单。质在蛋白纯化中同样尤为重要,比如,就蛋白的生物活性和纯度而言,通常会有所要求。以下我们来讨论并且比较2种技术:His-tag系统和Strep-tag®系统,都使用了亲和层析法来纯化得到所需的蛋白质,
Strep-tag®技术是亲和纯化重组蛋白的常用工具,它基于自然界中最强的非共价相互作用之一,即生物素与链霉亲和素的相互作用。该纯化系统的突出特点是纯化过程温和、目的蛋白纯度高、特异性强、兼容多种表达系统,对于有挑战性蛋白的纯化十分有帮助,因此近些年来脱颖而出。本文将从以下方面介绍Strep-tag®技术:标签介绍纯化原理标签-配体纯化步骤系统特点标签介绍目前有2种广泛使用的Strep标签:它们分别是:Strep-tag®II8 aa小标签(Trp-Ser-His-Pro-Gln-Phe-Glu-Lys)可放在N- 或 C-terminus不影响蛋白折叠和功能,无需移除分子量 1058DaTwin-Strep-tag® (也有叫做双Strep-tag®II)28 aa 标签(WSHPQFEK-GGGSGGGSGG-SA-WSHPQFEK)两段Strep-tag®II标签序列较Strep-tag®II对于Strep-Tactin®有更高亲和力分子量 2887Da二者均为小标签,不会对蛋白质的结构和功能活性产生影响,因此通常不需要在纯化后将其移除。纯化原理Strep标签纯化蛋白质的技术原理
详细实验说明与步骤
详细实验说明与步骤
对于职业发展早期的研究人员,开展科学研究、进行论文写作和发表,往往是其职业生涯中不可缺少的重要环节。在论文投稿和发表的过程中,从作者的角度,通常都非常关心自己稿件的审稿情况,比如审稿人对自己的稿件提出了哪些具体的修改意见和建议,等等,并据此对稿件进行修改完善,以及对审稿意见予以恰当的回复和必要的解释说明。值得一提的是,被审稿的作者和评审他人稿件的期刊审稿人,这两种角色是可以相互转换的。随着科研水平的提高和学术造 ...
自我管理能力对处于职业生涯各个阶段的科研人员都很重要。他们经常需要在科研、教学、社会服务和个人生活之间进行协调。本文为您提供了一些重要的提示和建议,无论您处在职业生涯的何种阶段,都可以帮您在各种需求中实现平衡。自我管理究竟是什么?自我管理的定义是「有意识地对思想、行为和情绪进行有效控制的能力」。自我管理能力也与情商、自我调节和自我意识有关 。自我管理技能可以如何帮到你?自我管理技能可以帮助个人完成工作,设定可实现的 ...
研究人员的论文发表之路往往很难一帆风顺,也就是说,通常情况下,很少有论文一经投稿、审稿就直接被录用发表。一般来说,在审稿后收到「小修(minor revision)」的修改意见,已经可谓是十分令人兴奋、皆大欢喜的情况了,论文已在很大程度上接近了被录用发表。然而,更多时候,稿件在经历同行评审之后,可能会连同大量的修改意见一起被返回给作者修改,也就是「大修(major revision)」,这意味着稿件难免要面临一番大动干戈、脱胎换 ...
对于学术科研论文的写作,一般宜采用正式的语气和简洁的表达,以突出研究内容本身的重要性和专业性。在实际的论文写作过程中,想要做到语气更正式、表达更简洁这两点,很多时候其实并不困难,更不需要对文字进行大篇幅的改写或重写,有时甚至只需巧妙替换个别单词即可。1、如何在学术论文写作过程中保持正式语气学术论文的写作需要遵守一些常见的表达惯例,例如一般采用书面英语,因此,应避免过多使用非正式的或口语化的英语表达。书面用语和日 ...
以前跟博士老板写文章的时候,老板面授机宜,说了一些写作要点。大体知道宏观上怎么安排文章了。然后跟博士后老板写第一篇文章的时候自我感觉总体上的把握没有问题,结果却发生如下对话:我写(为了说明简单,这样都翻译成中文):A 是由于 B 的存在造成的,而 C 会产生 B,为了减少 A,我们必须减少 C。老板说:你这样写,我不知道第二句为什么要提 C 呢?我一愣,很奇怪:因为 C 会产生 B 啊?(心想这不是很明显吗?)老板改成了:A 是由于 B 的存在造成的,B 会被 C 所诱发,所以减少 C,就会减少 A。我一看,换了个表述而已,有什么不同吗?百思不得其解。问老板为什么要这么改,老板还是那句话,按原先的写法,她不知道为什么要提 C。我最后还是不明白。直到有一天,我看到了这篇文章《The Science of Scientific Writing》by George D. Gopen and Judith A. Swan。 原来,句子有所谓的 the stress position,就是读者期望看到重要的信息和新信息的位置,所以写作的时候要把你重要的东西放在这个位置。句子还有所谓的 the t
14. 单词首个字母大写常见问题:单词首个字母大小写错误。解决办法:正确使用大小写。详解:单词首个字母大写适用于句首、城市名、公司名、人名、商标名和中药名等。但药物化学名在句中首个字母不大写,如 Qinghaosu vs artemisinin和Biltricide vs praziquantel。 15. 人名称呼常见问题:句中 professor 的首个字母大写。解决办法:使用小写。详解:正文中有时提及人名与称呼以感谢某人提供试剂、鉴定草药材料或给予某种方便以便资料收集等。人名前称呼,西方习惯用最高学位,如 Dr.或 PhD 和MD;国内习惯用职称,如 professor。注意句中 professor 的首个字母不大写。 16. 符号常见问题:使用字母而非符号。解决办法:插入符号。详解:α 与 a,β 与 b,γ 与 r,κ 与 k,μ 与 u 等,在正式的稿件中该用符号的地方不能用字母代替。使用符号,不需要改变字体,直接用插入功能。 17. 数字与拼写常见问题:句子中数字与拼写词混用。解决办法:根据具体情况正确使用。详解:譬如 “These ten mice” 与 “These
学术论文写作应遵循一定的书写格式。不同的期刊杂志(或出版商)可能有一套自己的书写格式要求。为避免因书写格式不规范而导致论文发表延迟,作者在投稿前尤其论文接受发表后,应严格按照杂志投稿指南认真准备稿件。本文简单介绍英文论文写作的一些格式要点及注意事项。 1. 纸张大小与页边距常见问题:页边距太宽或太窄。解决办法:根据纸张规格,适当调整页边距。详解:撰写论文用纸,世界上绝大多数国家使用标准的 A4 纸张,但北美是个例外,采用 Letter 纸张。两者大小有所差异,A4 为(宽 × 长)21.0 × 29.7 厘米(8.3 × 11.7英寸);Letter 为 21.6 × 27.9 厘米(8.5 × 11英寸)。由于纸张大小不一,页边距也不同。Letter 默认四周边距为 2.54 厘米(1英寸);A4 默认上下边距为 2.54 厘米(1英寸),左右 3.17 厘米(1.25 英寸)。根据杂志要求或实际需要,页边距可以适当调整,如减少右侧边距。 2. 语言常见问题:英式英语与美式英语混用,或夹杂有中文字体格式。解决办法:认真检查,保持语言前后一致。详解:根据杂志所在地选择英式英语(Bri
论文写完了,有了目标杂志,根据稿约要求调整好文章格式了,此时万事具备只欠东风,此时会不会有点小紧张呢?不用担心,投稿其实很容易,现在小编来为大家介绍一下投稿的步骤: 1. 注册 一般是默认用通讯作者的姓名和邮箱来进行注册,注册后投稿系统会自动保存信息,在 Elsevier editorial system(EES), Editorial Manager,Scholar One,Evise 系统杂志中,注册人的姓名和邮箱会在作者列表中自动默认为通讯作者(Hindawi 系列,Spandidos 系统除外),这几个系统同一个系统下的所有杂志共用的是一个账号信息,如果通讯作者邮箱不方便查收邮件,可以重新注册一个邮箱来投稿,这个邮箱也需要放在文稿中通讯作者邮箱后面。MDPI,Spandidos 系统杂志注册后需要激活,前者是一个链接,后者是一个是激活码。还有极少的杂志不需要注册,直接在杂志社的在线投稿系统填写信息之后就可以上传稿件,投稿完成之后也没有账号可以查询文稿动态,当文稿有了进一步的反馈意见后,杂志社会与投稿时所填写的通讯作者邮箱联系。(如Cancer Biomark;Journal
论文写作堪比西天取经,当我们经历“九九八十一难,取得真经“,还有最关键的一步,就是选刊发表。是“投石问路”,还是“投其所好”,这篇文章将为各位读者分享最实用最全面的投稿选刊技巧和工具。通常,我们在投稿前有下面几个问题是必须要考虑的:1.稿件的主题是否适合于期刊所规定的范围?2.期刊的学术质量和影响力如何,录用率怎样?3.期刊的审稿和发表周期是多久?4.版面费要多少?围绕上述问题,首先,我们需要评估自己的论文。在这个问题上,心态是首位,切勿好高骛远,如果您还是在读的学生,第一次的投稿经历更多的是为了给自己的科研道路开启一个振奋人心的开端,经验和过程远比最后的影响因子重要的多。而对于其他身份的人来说,我们也要回归如下现实:这篇文章是否对你毕业、考博或者评职称有影响。不同的期刊审稿出刊的时间都不同,短则半个月,长则 1 年多。关于版面费的问题。对于学生来说,其实无需担忧这个问题。这都是你的导师帮你解决的。如果没有人帮你处理这个问题,在这方面你可能要注意的是:1)水刊。“水刊”的版面费都很高,而且也可能有被剔除 SCI 的风险。怎么看它是不是水刊,大家可以去百度或者丁香园上看看网友的评论。2)
SCI 文章的类型繁多,有一部分科研工作者理解可能并不全面,这里给大家主要介绍 9 种 SCI 常用的文章类型及各自的特点。 1、Original research(article)原著论文又称为原始论文,即著作的原本,是作者经过具体选题所进行的调查研究、实验研究、临床研究的结果和临床工作经验的总结,是作者的第一手资料(即直接资料)。其内容比较广泛,可以是实验研究、临床观察、调查报告等;也可以是医学理论上的创新见解和新的科研成果;还可以是新知识、新理论、新技术、新方法应用于实际取得科学总结。这种类型也是目前最普遍的文章类型。绝大部分杂志都接收。这种类型的文章具有严格的写作结构(Introduction-methods-results-discussion)。具体投稿前需要认真翻看对应杂志的 Instruction for authors。 2、Review描述当前研究的进展综述。目前也是初入科研的学生起步要训练的写作类型。一篇 review 可以协助新手高效构建特定课题的知识框架体系。通过大量的阅读
位于日本京都 CiRA (Center for iPS Cell Research and Application)的著名实验室,Jun Takahashi 教授团队正在使用 MACSQuant® Tyto® 细胞分选仪对 iPSC 衍生的多巴胺能祖细胞进行符合 GMP 的细胞分选,用于帕金森病细胞移植。该团队目前的临床试验旨在利用 iPSC 衍生的多巴胺能神经元治疗帕金森病患者,该试验源自 2017 年 8 月发表在《自然》杂志上的灵长类动物模型研究。实际上,正是开创性工作的定义,人体试验在再生医学领域以及更远的领域受到了广泛关注,数十篇相关的新闻文章和报道,这在很大程度上要归功于诺贝尔奖得主 Shinya Yamanaka 的参与。Dr. Daisuke Doi 作为 CiRA 助理教授并积极参与由 Jun Takahashi 教授领导的帕金森病临床试验项目。实验室开发一种基于 iPSC 衍生的多巴胺能祖细胞治疗帕金森病的新细胞疗法。在建立异基因 iPSC 细胞系(来自 HLA 纯合子供体)和神经诱导分化后,他们必须对 Corin 阳性神经祖细胞进行分选,以获得高纯度靶细胞群进一步
由于基因编辑技术的日益演进,不仅细胞核内基因编辑可修复 DNA 缺陷帮助治疗遗传疾病 (如脊髓性肌萎缩症),也可导入特定基因增强细胞功能消灭恶性肿瘤(如 CART 治疗 B 细胞淋巴瘤)。今年 7 月 Nature 发表的线粒体基因编辑工具更是横空出世,这对于 mtDNA 突变引起的母系遗传 Leigh 综合征、线粒体肌病等线粒体遗传疾病的研究、治疗和治愈带来了希望。如今,结合基因治疗的造血干细胞移植,已有多项重大研究与临床应用正如火如荼地展开。如 2019 年欧盟批准基因治疗与干细胞治疗双剑合璧,来修复地中海贫血患者的造血干细胞缺陷。Bluebird bio 宣布欧盟有条件授权营销 ZYNTEGLO™(自体CD34+ 细胞 encoding βA-T87Q-globin gene)的基因治疗,针对 12 岁及以上患有输注依赖性β-地中海贫血的患者进行治疗。2019 年,中国北京大学-清华大学生命科学联合中心的邓宏魁教授研究团队, 建立基于 CRISPR 在人成体造血干细胞上进行 CCR5 基因编辑的技术体系,实现了经基因编辑后的成体造血干细胞在人体内长期稳定的造血系统重建。邓宏魁教授
丹麦奥胡斯大学医院传染病研究部门,Dr. Mariane H. Schleimann 与其团队现在正大量参与对新型冠状病毒(SARS-CoV-2)的研究。正如全世界的情况一样,迫切需要找到针对 COVID-19 有效的疫苗,以及治疗方法,这激发了许多基础研究、转化和临床组织共同投入到 COVID-19 研究中。以下是由美天旎生物技术与 Dr. Mariane H. Schleimann 根据其对 COVID-19 研究进行的访谈:1. Dr. Mariane H. Schleimann 团队在奥胡斯大学医院是如何设立的? 我们的部门本质上是医院和大学的结合,医学博士和博士生,博士后和其他科学家组成了团队的一部分。总的来说,我们由三个独立但紧密相连的群体组成,总共约有 40 人,他们每天都在研究传染病和临床医学。目前,其中一个目标是发现中和抗体用于 COVID-19 疗法,这也是我们在常规 HIV 研究中尝试使用的疗法;这是一种新的治疗方法,具有很大的潜力。 我们许多研究者进入细胞生物学领域,是为各种疾病努力寻找治疗方法,帮助患者。在医院里,我
基于针对细胞表面标记蛋白的偶联磁珠,利用磁场对目的细胞群体分离是 MACS 磁珠最广泛的应用领域。但 MACS Technology的神通广大不仅仅于此,在蛋白质、核酸分子水平的分离应用中也具有卓越的性能和优势,今天让我们了解一下。一个细胞也能做的 mRNA 分离和 cDNA 合成精确的基因表达分析离不开高质量的 mRNA 分离,必须克服潜在的 DNA 污染和 RNA 降解等严重影响数据的风险。传统提取核酸的方法有赖于多步骤的离心和沉降过程,这在样品细胞数量极少时,则带来极大的弊端。同样基于 MACS Technology 的 μMACS SuperAmp 试剂盒利用偶联了 poly-A 尾的 50 nm 超顺磁微珠准确高效捕获 mRNA 的同时,柱内 cDNA 合成保证了无原材料流失,进一步提高了反应的灵敏度和 RNA 分析的精确度,1 到 104 个细胞的转录组分析都可实现。上图分别为核酸提取(左图)和 cDNA 合成(右图)的基本原理极少量细胞的核酸提取及逆转录仅在 3 个小时内即可完成,并带来如下优势:✦超高灵敏度,所需细胞数量可少至 1 个,所需 RNA 总量可少至 10 p

