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        10x Genomics 单细胞测序收样标准

        相关实验:单细胞测序数据分析

        最新修订时间:

        材料与仪器

        新鲜外周血、组织、细胞系样本;冻存的外周血单核细胞细胞和细胞系样本

        步骤

        物种来源

        人、小鼠(其他物种请于实验前沟通)

        送样方式

        送样请至少提前 24 小时告知。需要流式分选的至少提前 48 小时告知。

        本地客户

        组织样本:

        表 1. 组织样本表

        样本类型

        新鲜组织

        组织样本大小

        至少 250 mm3

        处理方式

        用 1640 培养基、PBS 缓冲液或生理盐水清洗 2-3 遍,客户也可以根据自己组织的情况,选择适宜培养基清洗。对于肿瘤等不易沾染血液的组织也可以不清洗。

        保存方式

        离体后 30 min 内置于 2 mL 的组织保存液(美天旎)4℃ 保存,组织需要完全浸没于组织保存液中。保存液需要置于 4℃ 保存。

        运输方式

        冰上(保持低温运输 4℃-16℃)运输,当天送达。

        收样时间

        工作日,特殊情况请提前沟通

        血液样本:

        表 2. 血液样本表

        样本类型

        新鲜血液

        血液样本量

        至少取 3 mL

        保存方式

        置于 EDTA 抗凝管

        运输方式

        冰上(保持低温运输 4℃-16℃)快递至百奥智汇,请当天送达

        收样时间

        工作日,特殊情况请提前沟通

        细胞样本:

        表 3. 细胞样本表

        样本类型

        消化细胞悬液、细胞系

        细胞数

        至少 5x105

        保存方式

        保存于含 10% 血清的 PBS 缓冲液中

        运输方式

        冰上(保持低温运输 4℃-16℃)快递至百奥智汇,请当天送达

        收样时间

        工作日,特殊情况请提前沟通

        外地客户

        组织样本:

        表 4. 组织样本表

        样本类型

        新鲜组织

        组织样本大小

        至少 250 mm3

        处理方式

        用 1640 培养基或 PBS 清洗 2-3 遍,特殊组织请用相关的适宜培养基清洗。对于肿瘤等不易沾染血液的组织也可以不清洗。

        保存方式

        离体后 30 min 内置于 2 mL 的组织保存液(美天旎)4℃ 保存,组织需要完全浸没于组织保存液中。保存液需要置于 4℃ 保存。

        运输方式

        冰袋上(保持低温运输 4℃-16℃)快递至百奥智汇,请于取样后 36 h 内送达。

        收样时间

        工作日,特殊情况请提前沟通

        血液样本:

        表 5. 血液样本表

        样本类型

        新鲜血液

        血液样本量

        至少取 3 mL

        保存方式

        置于 EDTA 抗凝管

        运输方式

        冰袋上(保持低温运输 4℃-16℃)快递至百奥智汇,请当天送达

        收样时间

        工作日,特殊情况请提前沟通

        冻存细胞:

        表 6. 冻存细胞表

        样本类型

        冻存消化细胞悬液,细胞系,PBMC

        细胞数

        至少 5x105

        处理方式

        提前将处理得到的单细胞用百奥智汇提供的 buffer 重悬,置于冻存盒内,冻存于-80℃ 冰箱。

        运输方式

        密封好置于干冰上运输,干冰需充足

        收样时间

        工作日,特殊情况请提前沟通

        上门服务

        对于外地客户,在与客户沟通当地具备实验条件的基础上,由客户自行完成组织消化和细胞分选,得到目的细胞后由百奥智汇人员进行后续实验。百奥智汇实验人员可携带试剂、仪器上门服务,合成 cDNA 后干冰运输至公司,完成后续实验。

        特殊要求

        活检组织样本:

        至少需要 2-3 条穿刺组织,尽量避免血液,若组织较少,需客户充分了解其中风险。活检组织取样后不需冲洗,直接置于 2 mL 的组织保存液(美天旎)4℃ 保存于冻存管。

        注意事项

        组织运输过程中,冰袋与样本管之间请用纱布/棉花等隔离,防止保存液结冰,避免组织冻伤导致细胞坏死。

        来源:丁香实验

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