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        Y 迷宫实验(Y-Maze)

        相关实验:Y-迷宫实验

        别名:Y 型迷宫实验,Y-Maze,Y 迷宫交替行为测试,电刺激 Y 迷宫测试

        最新修订时间:

        丁香实验推荐阅读

        审核专家 | 李娜硕士

        生理学 大连医科大学

        原理

        Y 迷宫测试是一种基于动物自然探索好奇心的行为测试,该测试中的自发交替行为被认为反映了短期空间工作记忆。其利用受试动物对于新环境探索的天性,实验过程中受试动物每次转换探索新的方向时都需要记住之前探索过的方向,因而 Y 型迷宫实验能够很好地反应测定动物的空间工作能力。

        用途

        用于评价啮齿类动物的空间工作记忆能力,评估大小鼠的短期记忆能力。

        主要应用领域为:功能减退、趋向性、空间工作记忆的研究、新药开发/筛选/评价等领域。如阿尔茨海默病动物模型种,受试动物空间记忆能力的评价。

        Morris 水迷宫实验

        优点:

        1)可以得到较多的实验指标,结果更为全面;

        2)实验结果客观,可信度更高。

        不足:

        1)受试动物训练时间长,实验周期长。

        八臂迷宫实验

        优点:

        1)可区分长期参考记忆和短期工作记忆;

        2)受试动物体能消耗较少,可避免受试动物运动能力对实验结果的干扰。

        不足:

        受试动物实验前需禁食。

        材料与仪器

        1. Y 迷宫设备:3 个等长臂组成,分为 i 新异臂(novel arm)、起始臂(start arm)和其他臂(other arm)。相邻两臂夹角 120 度,在臂的中央位置各有一个可移动的隔板,各个臂内贴有不同几何图形,作为受试动物的视觉标记;

        2. 完成电击所学铜棒;

        3. 12W 信号灯;

        4. 摄像镜头,实验过程全程录像。

        步骤

        Y 迷宫实验分为:Y 迷宫交替行为实验和电刺激 Y 迷宫实验。

        1. Y 迷宫交替行为实验:

        1) Y 迷宫交替行为实验:Y 迷宫设备由三个不透明的塑料臂(分别标记为Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ)制成,两臂之间的角度为 120°;

        2) 将小鼠轻柔的放入迷宫中央,并允许其自由探索 8 min。小鼠进入每个臂的标准为四肢完全进入。小鼠依次进入三个不同臂(例如ⅠⅡⅢ,ⅠⅢⅡ,ⅡⅢⅠ,ⅡⅠⅢ,ⅢⅠⅡ,ⅢⅠⅡ,)是一种交替;

        3) 交替分数的计算方法是将交替总数除以选择总数减去 2 乘以 100,如以下等式所示:自发交替率 (%) = [(自发交替次数)/(总进臂次数−2)]×100;

        4) 两只小鼠实验间隔中都需要 75% 酒精擦拭迷宫,并使酒精完全挥发,确保气味并不会对实验产生干扰。Y迷宫实验通过图像采集系统记录检测指标,实验数据 SPSS 软件进行分析。

        2. 电刺激 Y 迷宫实验:
        1)实验开始前,将下臂(Ⅰ臂)定为起步区,左侧(Ⅱ臂) 为安全区,右侧(Ⅲ 臂) 为电击区,三臂相交处为隔离区( 0 区) ;

        2)在迷宫装置底部放置铜棒,用于进行电刺激。各个臂顶端各装有 12W 的信号灯;

        3)实验正式开始时,先将受试动物置于 Y 迷宫,使其适应 5 min;

        4)每只小鼠每次电击延迟为 5 s,一次性从起步区逃至安全区的反应称为“正确反应”,否则为“错误反应”。以连续 10 次电击中正确反应达 9 次或以上定为学会标准。直到小鼠的训练过程中连续 9 次正确反应即为学会;

        5)受试动物受电击后达到学会标准所需的训练次数表示学习记忆成绩,,训练次数越少,说明学习能力越强。24 h 后进行记忆保持能力的检测,以正确反应次数占总检测次数的百分比表示记忆保持能力(正确反应的次数/总检测次数× 100%),此值越高说明小鼠学习能力越强好。

        Y 迷宫实验(Y-Maze)

        注意事项

        1、实验前,对受试动物进行筛选,剔除对电击耐受差或对电击不敏感的动物;

        2、保持实验环境安静、明暗适宜,每天固定时间进行实验;

        3、进行实验时,严格遵守操作规范,由固定人员执行实验;

        4、实验环境安静,光线适宜。尽量在每天相同时间进行实验;

        5、进行电刺激Y迷宫实验时,随时清理动物粪便,防止电栅短路;

        6、 每日实验结束后,对箱体进行清洗,消除动物留下的气味,防止干扰后续实验。

        常见问题

        1. 进行实验数据统计时,模型组和对照组无差异:

        可能是由于存在本身学习记忆障碍的受试动物,造成结果假阳性或假阴性。故而,实验前要对实验动物进行严格筛选,剔除本身学习记忆障碍的受试动物。

        2. 电刺激 Y 迷宫实验,电刺激动物后,动物精神萎靡,甚至出现动物死亡:

        可能时电刺激过强造成,适当减弱电刺激强度。

        来源:丁香实验

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