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        植物细胞微丝骨架的活体观察

        相关实验:植物细胞微丝骨架的活体观察

        最新修订时间:

        简介

        从广义上来讲,细胞骨架是一种细胞器,包含微管、微丝和中间纤维 3 种不同的成分。迄今为止,在植物细胞中仅发现了微管和微丝这两种细胞骨架。它们在细胞内高度动态,参与着许多重要的生理过程:细胞形态建成、细胞分裂、胞质运输、细胞器的运动等。细胞内的骨架结合蛋白参与着细胞骨架的动态调控。

        材料与仪器

        器材:

        转入 GFP-Lifeact 基因的拟南芥。

        器具:

        ① 荧光显微镜

        ② 镊子

        ③ 载玻片

        ④ 盖玻片

        试剂:

        ① PBS 溶液

        ② NaCl 溶液(0.5 mol/L)

        步骤

        植物细胞微丝骨架的活体观察的基本过程可分为如下几步:

        (一)观察植物细胞内的微丝骨架阵列

        为了适应功能的需要,不同类型的植物细胞形成了其特有的形态。取转入 GFP-Lifeact 基因的拟南芥幼根及幼叶,制作临时装片,于显微镜明场下仔细观察

        幼叶上的表皮细胞和幼根成熟区上的根毛细胞的形态。然后转至荧光下(激发波长 488 nm)观察这两种类型的细胞内微丝骨架的排列方式。

        1. 幼根伸长区根毛细胞

        细胞形状呈长管状,在大多数的根毛细胞内微丝骨架的排列大致与根毛的生长方向平行。

        2. 幼叶的叶表皮细胞

        成熟的双子叶植物叶表皮细胞大多排列紧密,呈不规则的多边形。幼叶的表皮细胞还在生长发育中,其内的微丝骨架在细胞的某些部位密集,在该部位的进一步伸展中发挥作用。

        (二)观察盐溶液处理后植物细胞内微丝骨架阵列的变化

        植物细胞内的微丝骨架是高度动态的,根据植物细胞本身的生长状态,以及外界环境信号刺激的不同,微丝骨架的排列会发生显著的变化。

        重新取拟南芥幼根及幼叶,制作临时装片,于荧光显微镜下(激发波长 488 nm)观察叶表皮细胞和根毛细胞内微丝骨架的排列方式,并分别绘出大多数叶表皮细胞和根毛细胞内的微丝骨架阵列。然后取下该装片,在盖玻片的一端滴加 NaCl 溶液(0.5 mol/L),将吸水纸放在盖玻片另一端,轻轻地使 NaCl 溶液浸润标本,静置 2 min 后于荧光显微镜下观察细胞内微丝骨架的阵列是否发生变化。

        来源:丁香实验

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