朊粒病的生物标志物的检测

与诊断标记物 PrP 检测不同的是， 此类生物标记物随病理过程的发展而变化， 其优势在于预测风险， 这就要求高灵敏度的而非高特异性的指标。这些生物标记物包括 14－3－3 蛋白。S100 钙结合蛋白等。这些蛋白质在 sCJD 患者脑脊液中含量增高， 代表了中枢神经系统损伤和神经元死亡的情况。

14－3－3 蛋白生物标记物检测的方法的基本原理是正常脑脊液中测不到 14－3－3 蛋白， 但当一些神经系统疾病发生时， 神经元损伤使得 14－3－3 蛋白进入脑脊液， 从而可在脑脊液中检测到 14－3－3 蛋白。14－3－3 蛋白在脑脊液中的含量可能与神经元被破坏程度有关。用 14－3－3 蛋白检测典型的 sCJD 患者敏感性较高。据统计，sCJD 患者的脑脊液 14－3－3 蛋白检出率约为 85％。

朊粒病的生物标志物的检测的实验步骤如下：

14－3－3 蛋白的检测： 该蛋白是一组真核细胞内高度保守的具有调节作用的蛋白质， 广泛分布于真核生物细胞内， 在哺乳动物脑中主要位于神经元， 约占脑蛋白总量的 3％。正常脑脊液中测不到 14－3－3 蛋白， 但当一些神经系统疾病发生时， 神经元损伤使得 14－3－3 蛋白进入脑脊液， 从而可在脑脊液中检测到 14－3－3 蛋白。14－3－3 蛋白在脑脊液中的含量可能与神经元被破坏程度有关。用 14－3－3 蛋白检测典型的 sCJD 患者敏感性较高。据统计，sCJD 患者的脑脊液 14－3－3 蛋白检出率约为 85％。因此， 脑脊液中 14－3－3 蛋白的检出已成为 sCJD 临床诊断标准之一。在非典型的 sCJD 和 vCJD患者中， 脑脊液中 14－3－3 蛋白的检出率较低。在散发性单纯疱疹性脑炎的脑脊液中 14－3－3 蛋白可有一过性增高现象， 在诊断中应注意鉴别。

目前多采用 WB 检测脑脊液 14－3－3 蛋白， 其中脑脊液质量是实验的关键。患者需排除其他神经系统疾病， 没有脑出血症状， 脑脊液不能变黄， 不能出现白细胞和红细胞。否则可能出现假阳性结果， 导致误诊。此外， 还应设置阳性对照， 如使用 10％ 的羊脑匀浆。患者脑脊液 14－3－3 蛋白测定的阳性结果， 结合患者脑电图检查的异常波形， 将有力支持 CJD 的诊断， 但脑脊液 14－3－3 蛋白阴性不能排除 CJD。CJD 实验室确诊要依赖于 WB、IHC 对脑脊液或脑组织中 PrP「的检测。