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        家兔内生致热原性发热法

        相关实验:发热实验

        最新修订时间:

        简介

        家兔内生致热原性发热法中有用到 TNF-α ,其主要由脂多糖等激活的单核-巨噬细胞分泌的一种小分子蛋白质。小剂量的 TNF-a 直接作用于体温调节中枢,上调体温调定点,使机体产热增加,散热减少,体温升高,出现单相热。

        大剂量的TNF-a可出现双相热,第一热相是TNF-a直接作用于体温调节中枢所致,第二热相则是TNF-α通过作用于单核-巨噬细胞,促使其分泌白细胞致热原即白介素-1而引起的。

        原理

        家兔内生致热原性发热法的基本原理是通过耳缘静脉注射小剂量的重组 TNF-α 复制家兔内生致热原性发热模型,了解 rTNF-a 引起的单相热的特点,理解 rTNF-a 在发热发生机制中的作用。

        用途

        家兔内生致热原性发热法可用于学习掌握家兔内生致热原性发热模型的复制方法、观察肿瘤坏死因子α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)致家兔发热时的症状,了解家兔内生致热原性发热时的体温变化规律以及机体的功能与代谢变化特点、加深对内生致热原致家兔发热机制的理解。

        材料与仪器

        器材:

        台秤,兔台,5 mL注射器,医用人体肛温表。

        液体石蜡,BL-420生物机能实验系统,张力传感器,蛙心夹。


        试剂:

        ① 无热源生理盐水;
        ② rTNF-a(用无热源生理盐水稀释成0.5 μg/mL)。

        步骤

        家兔内生致热原性发热法的基本过程可分为如下几步:

        A. 取健康家兔4只,随机分为正常对照组和内生致热原性发热模型组。
        B. 家兔称重后仰卧位固定于兔台上。
        C. 连接传感器,描记呼吸。

        ①将蛙心夹夹在胸廓活动最明显处的胸壁上,另一端用丝线系于张力传感器感应片的小孔上。张力传感器与BL-420生物机能实验系统的1通道连接。
        ②打开电脑,运行 BL-420生物机能实验系统,进入系统主界面,在输入信号下拉菜单的1通道中,选择张力,开始记录正常家兔呼吸频率和幅度。


        D. 观察并记录各组家兔的一般情况:基础体温(肛温),恶寒(竖毛),耳廓(耳根温度、静脉的颜色和充盈度),球结膜(充血程度),呼吸(频率和幅度),心率,排尿,排便等。

        E. 内生致热原性发热模型组经耳缘静脉注射无热源生理盐水稀释的rTNF-a(0.5 μg/mL),剂量为2 mL/kg;正常对照组由耳缘静脉注入无热源生理盐水(2 mL/kg)。

        F. 注射完毕后密切观察上述指标的变化并记录,其中肛温在注射rTNF-α 后,每10 min测1次,共100 min。

        注意事项

        (1)家兔应健康,雌雄均可,雌性无孕,体温正常(38.5~39.5 ℃)。
        (2)rTNF-a无热源生理盐水稀释液从4 ℃冰箱取出后,应先在37 ℃的水中温浴20 min,然后再使用。
        (3)每次测量家兔肛温时,需将医用人体肛温表甩到35 ℃以下,末端涂少许液体石蜡,轻轻试探着插入肛门内3.5~4 cm,插入时不得用力太猛或旋转体温计,置肛门内3 min后取出,查看体温计读数。

        来源:丁香实验

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