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        大鼠炎症法

        相关实验:急性炎症实验

        最新修订时间:

        简介

        大鼠炎症法是因为组胺是广泛存在于人体组织的自身活性物质,组织中的组胺主要含于肥大细胞及嗜碱性粒细胞中。肥大细胞颗粒中的组胺常与蛋白质结合,物理或化学等刺激能使肥大细胞脱颗粒,导致组胺释放。

        原理

        大鼠炎症法的基本原理是组胺作用于靶细胞表面的 H1、H2 受体而产生炎症效应,主要表现为扩张小血管,增加微血管通透性,导致血液成分渗出,诱发急性炎症性充血反应,腹腔注射组胺后,立即通过尾静脉注射染料伊文思蓝,测定腹腔染料通透量,可判定炎性渗出的多少。

        用途

        大鼠炎症法可用于观察组胺对大鼠毛细血管通透性的影响。

        材料与仪器

        器材:

        分光光度计、离心机、大鼠固定筒、注射器(1 mL、5 mL)、试管、离心机、解剖剪、眼科镊。

        试剂:

        ① 0.1 mg/mL 磷酸组胺;

        ② 1% 伊文思蓝生理盐水溶液;

        ③ 生理盐水。

        步骤

        大白鼠急性炎症法的基本过程可分为如下几步:

        1. 取 160~200 g大鼠,随机分为实验组与对照组。

        2. 两组均按 1 mL/10 g,尾静脉注射染料 1% 伊文思蓝生理盐水溶液,然后实验组立即腹腔注射 0.1 mg/mL 磷酸组胺 0.2 mL,而对照组立即腹腔注射生理盐水 0.2 mL。

        3. 20 min 后断头放血处死大鼠,剪开腹腔,用 5 mL 生理盐水洗涤腹腔数次,收集洗涤液,1000 r/min 离心 5 min,用分光光度计在 590 nm 处测定吸光度(OD 值)。实验结束后,将各组结果汇总,列表 7-1 比较。

        表 7-1 组胺对大鼠毛细血管通透性的影响

        组别

        腹腔洗出液剂量/(mL/kg)

        腹腔洗出液光密度值(OD 值)

        对照组

        实验组

        注意事项

        (1)注入的染料量、组胺量及自注射组胺至处死的时间必须严格掌握。

        (2)冲洗腹腔时应避免液体外溢。

        (3)解剖时应避免腹腔出血。

        来源:丁香实验

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