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        二乙基亚硝胺诱导法

        相关实验:肝癌动物模型建模实验

        最新修订时间:

        简介

        二乙基亚硝胺进入人体经机体代谢后具有细胞毒性、肝毒性和免疫毒性的作用,其代谢物可导致体内相应核苷酸等物质发生甲基化反应,导致细胞外基质增加,诱导肝细胞发生凋亡、坏死,最终导致肝脏纤维化和肿瘤的发生。二乙基亚硝胺诱导法诱导成癌的模型大多都为肝细胞性肝癌,并且癌细胞分化程度相对较低,有一定侵袭及转移能力。该模型诱癌周期相对较短,成功率高,造模条件稳定。本模型很好地模拟了肝癌发展的几个阶段,肝细胞损伤,小叶内可见灶性坏死伴炎症细胞浸润,纤维组织增生,肝脏增生、硬化期,假小叶形成,癌肿发生、转移等病理阶段,与人肝癌常伴有肝硬化类似。

        原理

        二乙基亚硝胺诱导法的基本原理是二乙基亚硝胺进入人体经机体代谢后具有细胞毒性、肝毒性和免疫毒性的作用,其代谢物可导致体内相应核苷酸等物质发生甲基化反应,导致细胞外基质增加,诱导肝细胞发生凋亡、坏死,最终导致肝脏纤维化和肿瘤的发生。

        材料与仪器

        器材:


        注射器、大白鼠等。


        试剂:


        ①二乙基亚硝胺;


        ②100x10-6N-亚硝基吗啉水溶液;

        步骤

        二乙基亚硝胺诱导法的基本过程可分为如下几步:


        A 体重 250 g 左右的封闭群大白鼠,雌雄不拘。


        B 适应环境 1 周后,按 100 mg/kg 腹腔注射一次二乙基亚硝胺,第二天开始饲以致癌物,即用 100x10-6N-亚硝基吗啉水溶液灌胃,每周一次,或将 100x10-6N-亚硝基吗啉水溶液添加至水中,任其自由饮用。一般约 20 周可诱发成肝癌。

        注意事项

        1 制备动物模型的早期应注意预防动物感染的发生,特别是肺部感染,也别是在中后期,可能存在胸腹水,动物表现为咳嗽、气粗,在肿瘤形成期动物无明显征兆的死亡多为肝癌组织破裂出血所致。

        来源:丁香实验

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