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        精蛋白锌胰岛素注射液延缓作用检查法

        相关实验:激素生物测定法检定药品生物制品成品实验

        最新修订时间:

        简介

        精蛋白锌胰岛素注射液延缓作用检查法是使用精蛋白锌胰岛素注射液供试品处理实验动物,后续用以观察动物在供试品处理后的生命状态,并与注射标准品的动物进行比对。从而推断供试品毒力是否符合规定的实验方法。

        材料与仪器

        试剂

        ① 标准品溶液;

        ② 供试品溶液。

        实验动物:


        ① 体重 2000~ 3000 g 的健康实验家兔。

        步骤

        精蛋白锌胰岛素注射液延缓作用检查法的基本过程可分为如下几步:

        A. 标准品溶液的配制。

        精密称取胰岛素标准品适量,加入每 100 mL 中含有苯酚 0.2 g 并用盐酸调节 pH 为 2.5 的 0.9% 氯化钠溶液,使溶解成每 1 mL 所含效价 (单位) 与供试品相同的溶液。

        B. 供试品直接注射,不稀释。

        C. 动物选择:取体重 2000~3000 g 的健康家兔若干只,雌免须无孕。

        D. 动物处置。

        (1) 禁食:将家兔分置笼中,每笼 1 只,实验前禁食 18~20 小时,但仍给予饮水。

        (2) 分组:将家兔均分为两组,一组为胰岛素标准品组,一 组为供试品组;两组间家兔的性别和体重的分配情况应尽可能相同。

        (3) 采血样:在实验过程中,应停止饮水,注意避兔惊扰,分别自各兔耳静脉取血样(不得多于 1.5 mL),供测定正常血糖值用。

        (4) 注射:分别在各兔相同部位精确皮下注射相同体积的胰岛素标准品溶液或供试品溶液,般剂量为每兔 1.21 U。

        (5) 测血糖:胰岛素标准品组于注射后 2 小时及 6 小时,供试品组于注射后 6 小时及 9 小时,再分别自各兔取血样,用适宜的血糖测定法精密测定各血样的血糖值,以每 100 mL 血液中所含葡萄糖的量 (mg) 表示。

        注意事项

        A. 各次测定所得血糖值均不低于正常血糖值 90% 的家兔,或实验中途死亡的家兔,其记录均作废,不参加计算; 参加计算的家兔,每组不得少于 6 只,计算每兔在注射后的血糖值相当于该兔在注射前的正常血糖值的比率 (%)(简称血糖百分数),然后算出每一组内每一 时间各兔血糖百分数的平均值。

        B. 用于胰岛素标准品组的所有家兔,发生痉挛或实验中途死亡的动物数,不得超过 1/5;胰岛素标准品组于注射后 2 小时的血糖百分数平均值应不高于 65%,注射后 6 小时的血糖百分数平均值应不低于 95%,铡均应适当调整剂量,复试。供试品组于注射后 6 小时或 9 小时的血糖百分数平均值中较低的值不得大于 75%。

        来源:丁香实验

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