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        大鼠癫痫持续状态及自发发作模型

        相关实验:癫痫动物模型

        最新修订时间:

        丁香实验推荐阅读

        合作专家 | 李子涵博士

        肿瘤免疫 中山大学

        简介

        癫痫 (epilepsy) 是最常见的神经系统疾病之一。其特征是反复性惊厥发作,伴随不同的临床和脑电图表现。


        机理:乙酰胆碱 (ACh) 在癫痫发生中发挥着重要作用,ACh 受体激动剂匹罗卡品 (Pilocarpine) 全身给药能够引起癫痫发作;氯化锂可以有效提高机体对 Pilocarpine 的敏感性,即 Pilocarpine 的小剂量即可诱导发病,显著降低因 Pilocarpine 毒性作用所造成的动物死亡率;同时,使用溴甲基东莨菪碱用于减轻匹罗卡品引发的周围神经系统反应。

        材料与仪器

        实验动物:200~300 g SD 大鼠,雌雄皆可。


        器材:


        ① 注射器


        试剂:


        ① 东莨菪碱


        ② 氯化锂


        ③ 匹罗卡品 (Pilocarpine)

        步骤

        1、预先计算所需药品的总量,并分别称取溴甲基东莨菪碱、氯化锂和匹罗卡品的总需要量,用 0.9% 生理盐水溶解实验药品至指定的工作浓度。


        2、建模前一天,给予大鼠氯化锂 3 mmol/kg 腹腔注射。


        3、在氯化锂注射后 18~20 h,皮下注射溴甲基东莨菪碱 1 mg/kg,并记录给药时间。


        4、于 30 min 后给予首剂量 Pilocarpine 30 mg/kg 腹腔注射,详细观察并记录大鼠癫痫样发作程度。此后每间隔 30 min 于腹腔注射给予 10 mg/kg 追加剂量,直至出现Ⅳ级以上无明显间歇的 SE 样发作。注意极量为 60 mg/kg。


        5、SE 后 1 h,注射苯巴比妥钠 40 mg/kg 终止发作。


        6、注射苯巴比妥钠 30 min 后给予皮下注射生理盐水 10 ml,用以补充建模过程中所致的体液损失。


        判定结果参考 Racine 分级标准。

        注意事项

        1. 所需药品现配现用,特别是匹罗卡品,使用过程中避光存放,以确保药效。


        2. 若匹罗卡品注射已达极量 60 mg/kg,大鼠仍未出现 Ⅳ 级及以上程度发作,则可认为建模失败。


        3. 在建模过程中,如果大鼠出现间断性 IV 级发作,并伴有持续的 Ⅲ 级发作,发作过程中无明确的自主爬行及摸索动作,也可判定为符合模型标准。

        来源:丁香实验

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