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        旋转大鼠模型

        相关实验:帕金森病动物模型

        最新修订时间:

        丁香实验推荐阅读

        合作专家 | 聂壹峰博士

        纳米生物医学 中国科学院大学

        简介

         Parkinson 病模型的构建是利用神经毒剂 6-羟基多巴胺(6-hydroxydopamine,6-OHDA)破坏黑质的多巴胺神经元,6-羟多巴胺是多巴胺的羟基化衍生物,其化学结构与多巴胺 DA 类似,因此能够同 DA 竞争摄取位点,当 6-羟多巴胺被摄入细胞内能够被氧化分解产生活性氧及氧自由基,或直接引起线粒体功能障碍,导致神经元死亡造成 Parkinson 病模型。

        旋转大鼠模型

        Hypothetical mechanism of 6-OHDA toxicity

        用途

        用于帕金森病病理机制和治疗方法的研究。

         

        参考:

        Blum D , Torch S , Lambeng N ,et al. Molecular pathways involved in the neurotoxicity of 6-OHDA, dopamine and MPTP: contribution to the apoptotic theory in Parkinson's disease[J].Progress in Neurobiology: An International Review Journal, 2001(2):65.

        材料与仪器

        器材:

        ① 常用手术器械;

        ② 缝合线;

        ③ 立体定向仪;

        ④ 微量注射器。

        试剂:

        ① 6-羟基多巴胺;

        ② 维生素 C;

        ③ 生理盐水;

        ④ 阿扑吗啡。

        步骤

        1、大鼠适应培养一段时间后,麻醉后固定于脑立体定向仪。

        2、剪开头皮后用棉签轻轻擦拭颅骨表面,将前囟(bregma)和后囟(lambda)点暴露出来,并确定黑质坐标:前囟后 4.4mm,中线旁开 1.1mm,硬膜下 7.5mm。

        3、以微量注射器向上述坐标点注入 6-羟基多巴胺 10μg(溶于 5μL 含 0.2mg/mL 维生素 C 的生理盐水中,用前临时配制),注药速度 0.5μL/min, 注药后留针 1~5 分钟。

        4、缝合伤口后抗感染治疗 3 天。

        5、两周后大鼠皮下注射阿扑吗啡 0.25mg/kg,诱发大鼠旋转,3~5 分钟动物出现旋转,确定 40 分钟总的旋转次数及力向,以后每周观察一次。

        6、确定旋转鼠模型成功的标准:连续两周测试平均转速 >7 次/分,持续旋转 >40 分钟。

        注意事项

        1. 黑质靶点的确定,应根据所用的定向图谱及立体定向仪认真调整验证。

        2. 选用 Wistar 大鼠的体重为 150~160g。

        3. 6-羟基多巴胺应新鲜配制,注意避光,颜色以橙红色为准。

        4. 注药速度与留针也很重要。

        5. 由于 6-OHDA 不能穿透血脑屏障,因此在使用 6-OHDA 进行帕金森造模时,需要直接注射入动物脑内,才能损伤中枢神经元。

        来源:丁香实验

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